专利名称：化妆品中多环芳烃的测定方法
技术领域：
本发明涉及一种化学物质的检测方法，尤其是涉及一种化妆品中多环芳烃的测定方法。
背景技术：
近年来，随着人民生活水平的提高，人们对化妆品的需求不断高涨，我国已成为世界第8大、亚洲第2大化妆品市场。与此同时，化妆品安全已经日益引起人们的关注，化妆品中所添加的化学物质对人体的健康具有潜在的危害。我国化妆品卫生标准、化妆品卫生规范中明确规定，萘、苯并[a]蒽、屈、苯并[e]醋亚菲、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、苯并[e] 芘、苯并[j]荧蒽、二苯并[a，h]蒽等9种多环芳烃为化妆品组分中禁用物质。化妆品中多环芳烃的测定对于严格控制化妆品产品质量，防止化妆品对人体产生危害，确保化妆品的使用安全，保障人民群众身体健康具有重要意义。多环芳烃(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，PAHs)是以两个或两个以上之苯环聚合键结而形成之多环碳氢化合物，一般为不完全燃烧或高温热解的产物，主要的来源可分为天然来源及人为燃烧行为来源，自然界中PAHs来自火山爆发、森林及草原火灾的燃烧活动而形成，但是人类的活动已经急速的增加自然环境中PAHs的量，自然界的排放量无法与人类造成的PAHs量相比。人类燃烧行为所产生的PAHs主要来自于石化燃料的燃烧，如机动车辆的废气排放、焦炭炼制工业、浙青制造业及所有使用石化燃料之工业设备等。PAHs 通常存在于木馏油、焦油、炼油、染料、润滑油、防锈油、橡胶、塑料等石化产品中。毒性、生态毒性及环境科学委员会(CSTEE)经科学研究证实，多环芳烃脂溶性高，不易降解且易在生物体内积累，具有致癌、致畸和致突变的作用，对人类健康和生态环境具有巨大的潜在危害。有鉴于此，我国化妆品卫生标准、化妆品卫生规范中明确规定，苯并[e]醋亚菲、苯并 [a]蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、苯并[e]芘、苯并[j]荧蒽、二苯并[a，h]蒽、萘、屈等9 种多环芳烃为化妆品组分中禁用物质。现用于多环芳烃分析测定的方法有纸色谱、薄层色谱、填充柱气相色谱、毛细管柱气相色谱、气相色谱-质谱、高效液相色谱等方法。纸色谱、薄层色谱、填充柱气相色谱等方法能进行定量分析，但分离效能和分析速度比较差。毛细管柱气相色谱法和高效液相色谱法具有很高的分离度，灵敏度高，线性范围宽，定量准确度好，但是在定性上主要依据保留时间。
发明内容
本发明所解决的技术问题是提供一种准确、简便、快速的测定化妆品中9种多环芳烃的气相色谱方法，为完善《化妆品卫生规范》中的检测方法等提供技术依据。一种化妆品中多环芳烃的测定方法，采用气相色谱-质谱法测定，测定前将化妆品试样经过如下前处理过程(1)提取
称取化妆品试样0.5g，置于容器中，加入甲醇10_15mL充分混勻，在超声波清洗器中超声提取15-30min，将上清液用环己烷液液萃取4次，每次加入环己烷20mL，合并上层环己烷相，浓缩至约2mL;(2)净化采用硅胶-氧化铝复合柱净化法对步骤(1)得到的提取液净化，供气相色谱-质谱分析。多环芳烃的提取方法有索氏提取法、超声波提取法、固相萃取法、超临界流体提取法、微波萃取法、快速溶剂萃取法等。超声波提取法具有设备便宜、方便快速、溶剂用量少等优点，已成功应用于固体样品中多环芳烃的提取。常用的提取溶剂有丙酮、环己烷、正己烷、 二氯甲烷、甲苯、丙酮、乙腈或这些溶剂的混合物。但是申请人研究发现，在用于化妆品中多环芳烃提取时，用上述溶剂超声萃取对大多数多环芳烃化合物的萃取效率都很低，部分多环芳烃化合物存在严重干扰，因此，需要选择更合适的溶剂，增加提取效率减少干扰，并采取适当的净化措施。本申请综合化妆品的特性，提供上述前处理方法，最适用于化妆品中多环芳烃物质的提取和净化，使其可以顺利进行下一步的气相色谱-质谱分析。本发明的测定方法，其中所述步骤(1)优选步骤为称取化妆品试样0.5g，置于容器中，加入甲醇15mL充分混勻，在超声波清洗器中超声提取30min，再用环己烷液液萃取； 其中甲醇分2 3次加入，每次超声提取10 15min，共加入甲醇15mL，超声提取30min。最优选步骤为称取化妆品试样0. 5g，置于容器中，先加入甲醇10mL，充分混勻，在超声波清洗器中超声提取15min，将上清液转移至分液漏斗中，下层沉淀再用甲醇重复超声提取2次， 一起总共加入甲醇15mL，超声提取30min，合并上清液，再用环己烷液液萃取。本发明的测定方法，其中所述步骤( 净化的具体过程为净化柱下端为使用前用二氯甲烷索氏提取24h以上的脱脂棉，依次用二氯甲烷湿法装填IOg活化过的硅胶、5g中性氧化铝，上端为3g无水硫酸钠；用40mL正己烷淋洗硅胶柱，加入步骤(1)的提取液，用 25mL正己烷淋洗，弃去洗脱液，用40mL体积比3 2的正己烷和二氯甲烷混合液洗脱并收集，洗脱液经旋转蒸发浓缩至约2mL，定量转移至ImL刻度试管中，用氮气缓慢吹至lmL，过 0. 45 μ m有机滤膜后，供气相色谱-质谱分析。其中浓缩的条件和方法是操作的关键点，对于测定结果的准确性有很大的影响。本发明的测定方法，其中气相色谱-质谱分离所采用的具体条件，包括色谱柱种类、程序升温条件、进样模式、进样口温度等，是本领域技术人员可以常规选用的；凡是可以有效分离9种目标物质的方法均可以使用。根据本发明的一种优选实施方式，所述气相色谱-质谱分析的测定条件为色谱柱为30mX0. 25mmX0. 25 μ m;程序升温过程为起始温度50°C，保持anin，以20°C /min升至160°C，之后以4°C /min升至235°C，保持12min，最后以5°C /min升至290°C，保持5min ；进样口温度为280°C ；色谱-质谱接口温度为280°C;离子源温度为230°C ；四极杆温度为150°C ；离子源为EI ；电离能量为70eV ；质量扫描范围为 50amu 350amu ；载气为氦气，流速lmL/min ；进样量为1 μ L ；进样方式为不分流进样。本发明的测定方法适用于化妆品中多环芳烃化合物的测定，所述多环芳烃化合物为萘、苯并[a]蒽、屈、苯并[b]荧蒽、苯并[j]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[e]芘、苯并[a] 芘、二苯并[a，h]蒽等9种。可以准确、简便、快速的对化妆品中9种多环芳烃定性和定量。本发明的测定方法具体以下技术效果1)首次开发了同时测定化妆品中萘、苯并[a]蒽、屈等9种多环芳烃测定的实验方法，填补了技术空白；2)提供了气相色谱-质谱法测定化妆品中多环芳烃化合物的最优条件；3)采用常用的检测装置，方法易于普及。
图1为9种多环芳烃的选择离子色谱图，其中1 萘；2 苯并[a]蒽；3 屈；4 苯并 [b]荧蒽；5 苯并[j]荧蒽；6 苯并[k]荧蒽；7 苯并[e]芘；8 苯并[a]芘；9 二苯并[a, h]蒽。
具体实施例方式为进一步说明本发明，结合以下实施例具体说明实施例1 一种化妆品中多环芳烃化合物的测定方法，包括以下步骤1、样品前处理(1)提取称取化妆品试样0. 5g(精确到0. OOOlg)，置于50mL具塞三角瓶中，加入甲醇 10mL，充分混勻，在超声波清洗器中超声提取15min，将上清液转移至250mL分液漏斗中，下层沉淀用甲醇重复提取两次，每次2mL，合并上清液，用环己烷液液萃取4次，每次20mL，合并上层环己烷相，浓缩至约2mL。(2)净化净化柱下端为脱脂棉(使用前用二氯甲烷索氏提取Mh以上)，依次用二氯甲烷湿法装填IOg活化过的硅胶、5g中性氧化铝，上端为3g无水硫酸钠。用40mL正己烷淋洗硅胶柱，加入提取液，用25mL正己烷淋洗，弃去洗脱液，用40mL正己烷-二氯甲烷(3+2，ν/ ν)洗脱并收集，洗脱液经旋转蒸发浓缩至约2mL，定量转移至ImL刻度试管中，用氮气缓慢吹至lmL，过0. 45 μ m有机滤膜后，供GC-MS分析。2、气相色谱-质谱测定条件对气相色谱-质谱分离所采用的具体条件，包括色谱柱种类、程序升温条件、进样模式、进样口温度等不作限定，凡是可以有效分离9种目标物质的方法均可以使用。以下给出的是典型的测定条件。a)色谱柱:HP-5MS(30mX0. 25mm X 0. 25 μ m)；b)程序升温起始温度50°C (保持2min)，以20°C /min升至160°C，之后以4°C / min 升至 235°C，保持 12min，最后以 5°C /min 升至 290°C (保持 5min)；C)进样口温度280°C ；d)色谱-质谱接口温度280 V ；e)离子源温度230°C ；f)四极杆温度150°C ；g)离子源=EI ；h)电离能量70eV ；i)质量扫描范围50amu 350amu ；
j)载气氦气，流速lmL/min ；k)进样量=IyL;1)进样方式不分流进样；m)溶剂延迟时间6min。典型的色谱分离1所示；各物质的特征离子如表1所示表1多环芳烃的分子量、特征碎片离子和定量离子
权利要求
1.一种化妆品中多环芳烃的测定方法，采用气相色谱-质谱法测定，其特征在于测定前将化妆品试样经过如下前处理过程(1)提取称取化妆品试样0.5g，置于容器中，加入甲醇10-15mL充分混勻，在超声波清洗器中超声提取15-30min，将上清液用环己烷液液萃取4次，每次加入环己烷20mL，合并上层环己烷相，浓缩至约2mL;(2)净化采用硅胶-氧化铝复合柱净化法对步骤(1)得到的提取液净化，供气相色谱-质谱分析。
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于所述步骤(1)为称取化妆品试样 0. 5g，置于容器中，加入甲醇15mL充分混勻，在超声波清洗器中超声提取30min，再用环己烷液液萃取；其中甲醇分2-3次加入，每次超声提取10-15min，共加入甲醇15mL，超声提取 30mino
3.根据权利要求2所述的测定方法，其特征在于所述步骤(1)为称取化妆品试样 0. 5g，置于容器中，先加入甲醇10mL，充分混勻，在超声波清洗器中超声提取15min，将上清液转移至分液漏斗中，下层沉淀再用甲醇重复超声提取2次，一起总共加入甲醇15mL，超声提取30min，合并上清液，再用环己烷液液萃取。
4.根据权利要求1-3任一项所述的测定方法，其特征在于所述步骤( 净化的过程为净化柱下端为使用前用二氯甲烷索氏提取Mh以上的脱脂棉，依次用二氯甲烷湿法装填IOg活化过的硅胶、5g中性氧化铝，上端为3g无水硫酸钠；用40mL正己烷淋洗硅胶柱， 加入步骤(1)的提取液，用25mL正己烷淋洗，弃去洗脱液，用40mL体积比3 2的正己烷和二氯甲烷混合液洗脱并收集，洗脱液经旋转蒸发浓缩至约2mL，定量转移至ImL刻度试管中，用氮气缓慢吹至lmL，过0. 45 μ m有机滤膜后，供气相色谱-质谱分析。
5.根据权利要求1-4任一项所述的测定方法，其特征在于所述气相色谱-质谱分析的测定条件为色谱柱为30mX0. 25mmX0. 25 μ m;程序升温过程为起始温度50°C，保持 2min，以 20°C /min 升至 160°C，之后以 4°C /min 升至 235°C，保持 12min，最后以 5°C /min 升至^0°C，保持5min;进样口温度为；色谱_质谱接口温度为；离子源温度为230°C ；四极杆温度为150°C ；离子源为EI ；电离能量为70eV ；质量扫描范围为50amu 350amu ；载气为氦气，流速lmL/min ；进样量为1 μ L ；进样方式为不分流进样。
6.根据权利要求1-4任一项所述的测定方法，其特征在于所述多环芳烃化合物为萘、 苯并[a]蒽、屈、苯并[b]荧蒽、苯并[j]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[e]芘、苯并[a]芘、二苯并[a，h]蒽。
全文摘要
本发明涉及一种化妆品中多环芳烃的测定方法，采用气相色谱-质谱法测定，测定前将化妆品试样经过前处理过程后供气相色谱-质谱分析。本发明的测定方法适用于化妆品中多环芳烃化合物的测定，所述多环芳烃化合物为萘、苯并[a]蒽、屈、苯并[b]荧蒽、苯并[j]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[e]芘、苯并[a]芘、二苯并[a，h]蒽等9种。可以准确、简便、快速的对化妆品中9种多环芳烃定性和定量。
文档编号G01N30/72GK102323358SQ201110271960
公开日2012年1月18日 申请日期2011年9月14日 优先权日2011年9月14日
发明者于红梅, 付艳玲, 操卫, 王宏伟, 肖海清 申请人:中国检验检疫科学研究院