前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒的制作方法

文档序号:6121531阅读:230来源:国知局
专利名称:前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒的制作方法
技术领域
本发明属于酶联免疫测定试剂盒,具体的涉及一种前列腺素F2 α酶联免疫测定试齐U盒。
背景技术
前列腺素是血管内皮细胞花生四烯酸代谢的主要产物,前列腺素F2 α (以下简称 PGF2 α )对生殖、循环、呼吸系统具有广泛作用。其中对生殖系统的作用为对妊娠各期子宫都有收缩作用,以妊娠晚期子宫最为敏感;对循环、呼吸系统系统的细胞的生理和病例性变化也有作用。

发明内容
本发明的目的在于提供一种前列腺素F2 α酶联免疫测定试剂盒。为实现上述技术目的,达到上述技术效果,本发明通过以下技术方案实现 本发明的前列腺素F2 α酶联免疫测定试剂盒,包括
1)已包被PGF2ci-牛血清白蛋白连接物酶标板,-20°C保存;
2)明胶;
3)PGF2a标准品,4°C保存;
4)抗体PGF2 a -IgG,4°C保存;
5)羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物,-20°C保存;
6)邻苯二胺;
7)稀释液,用前用蒸馏水作1:20稀释;
8)底物液,用前用蒸馏水作1:5稀释。本发明的检测原理如下
抗原(PGF2 a -BSA)包被固相载体,与游离抗原(标准品或待测样品)竞争性地与一定量得抗体结合,洗涤后加过量酶标抗体,再加底物显色。根据显色程度(0D值)即可从标准曲线上推算出待测样品PGF2 α含量。与现有技术相比,本发明具有以下有益效果
1、本发明的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒合具有良好的特异性,可有效测定人和动物的血浆、血细胞、体液或组织中PGF2 α的浓度;
2、本发明的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒合在生殖、循环、呼吸系统中的鉴别诊断灵敏度高,可保证良好的线性关系;
3、本发明的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒合在-20°C条件下可可保存6个月。上述说明仅是本发明技术方案的概述,为了能够更清楚了解本发明的技术技术方案,并可依照说明书的内容予以实施,以下以本发明的较佳实施例。
具体实施例方式一种前列腺素F2 α酶联免疫测定试剂盒,其包括
1)已包被PGF2ci-牛血清白蛋白连接物酶标板,-20°C保存;
2)明胶,Ig/瓶;
3)PGF2 α 标准品,1600pg/ml,4°C保存;
4)抗体PGF2a-IgG,lml,滴度 1:2000,4°C保存;
5)羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物(GARIgG-HRP),100ug/ml,_20°C保存;
6)邻苯二胺(0PD),15mg/瓶;
7)稀释液(PBS),0.2M,用前用蒸馏水作1:20稀释;
8)底物液化吐作『2),0.1M,用前用蒸馏水作1:5稀释。利用本发明的前列腺素F2 α酶联免疫测定试剂盒的检测步骤如下 1、一次反应
将PGF2a标准品用0. 1%明胶倍比稀释成8个浓度1. 25、2. 5、5、10、20、40、80和160 pg/0. 1ml,用 0. 1% 明胶(PBS 配制)将抗 PGF2 a-IgG 作 1:10 稀释。零标准(BO)孔加稀释液IOOul,标准(ST)孔加PGF2 α标准品IOOul,样品(SMP) 孔加待测样品IOOul。各孔均加抗体PGF2 a-IgGlOOul (ΤΑ孔除外)。37 °C 2hr 或室温下 4hr。tween-PBS稀释液洗板5次。2、二次反应
用0. 1%明胶(稀释液配制)12ml将GARIgG-HRP稀释,各孔均加200ul (ΤΑ孔除外)。 37 °C 2hr或室温下4hr。tween-PBS 洗板 5 次。3、反应测定
用底物液新鲜配制OPD-H2A基质(OPD浓度lmg/ml,每毫升底物液中加入0. 5微升30% H2O2),每孔注入200ul。37°C放置20min或至显色较好时,用3M硫酸50ul终止反应。置室温lOmin,在酶标检测仪上测定OD49tl,以TA孔调零。4、计算
权利要求
1.前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒,其特征在于,包括1)已包被PGF2α-牛血清白蛋白连接物酶标板;2)明胶;3)PGF2a标准品;4)抗体PGF2a -IgG ;5)羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物;6)邻苯二胺;7)稀释液;8)底物液。
2.根据权利要求1所述的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒,其特征在于所述明胶为Ig/瓶。
3.根据权利要求1所述的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒,其特征在于所述 PGF2a 标准品为 1600pg/ml。
4.根据权利要求1所述的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒,其特征在于所述抗体 PGF2 a -IgG 为 1ml,滴度为 1:2000。
5.根据权利要求1所述的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒,其特征在于所述羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物为100ug/ml。
6.根据权利要求1所述的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒,其特征在于所述邻苯二胺为15mg/瓶。
7.根据权利要求1所述的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒,其特征在于稀释液为 0. 2M。
8.根据权利要求1至7中任意一项所述的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒,其特征在于底物液为0. 1M。
全文摘要
本发明公开了一种前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒,其包括已包被PGF2α-牛血清白蛋白连接物酶标;明胶;PGFF2α标准品;抗体PGF2α-IgG;羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物;邻苯二胺;稀释液和底物液。本发明的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒合具有良好的特异性,可有效测定人和动物的血浆、血细胞、体液或组织中的PGF2α的浓度。
文档编号G01N33/88GK102520197SQ20111042007
公开日2012年6月27日 申请日期2011年12月15日 优先权日2011年12月15日
发明者何杨, 王兆钺, 阮长耿, 陈德春 申请人:苏州博赛生物医药有限公司, 苏州大学, 苏州苏大赛尔免疫生物技术有限公司
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