专利名称：十味乳香制剂的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物制剂的检测方法，尤其涉及一种十味乳香制剂的检测方法，属于中药检测技术领域。
背景技术：
十味乳香丸为藏药，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》藏药分册中，标准编号为 WS3-BC-0211-95。
处方乳香100g、诃子150g、决明子80g、毛诃子100g、黄葵子80g、余甘子120g、木香85g、宽筋藤100g、巴夏嘎80g、渣驯膏50g。
制法以上十味，除渣驯膏外，其余粉碎成细粉，过筛，混勻，用渣驯膏加适量水泛丸，干燥，即得。
主要用于治疗“干黄水”引起的四肢关节红肿疼痛及湿疹。
乳香、诃子、决明子、毛诃子、余甘子、木香均收载于中国药典2010年版一部中。宽筋藤收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》(1995年版)藏药第一册。
原标准中乳香和决明子鉴别重现性不佳，无法实现对十味乳香丸质量标准检测方法的可控性，因此在其基础上做了修改；对原部颁标准中乳香鉴别方法也作了适当修改，对决明子鉴别方法作了改变，以便提供一种重现性好、专属性强，符合准确、简便、灵敏、快速的原则，可以有效的控制产品的质量。发明内容
因此，本发明的目的是提供一种专属性强、重现性好、操作简便的十味乳香制剂的检测方法，能够有效地控制其质量，使十味乳香制剂质量稳定、可控安全。
针对上述目的，本发明的技术方案如下
本发明提供一种十味乳香制剂的检测方法，该方法通过薄层色谱法检测其中的乳香、木香和决明子，包括以下步骤
1)制备乳香样品溶液组、木香样品溶液组和决明子样品溶液组；
2)将乳香样品溶液组点于的硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯为展开剂；将木香样品溶液组点于的硅胶G薄层板上，环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯为展开剂；将决明子样品溶液组点于的硅胶G薄层板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，喷以香草醛硫酸溶液风吹至斑点显色清晰，进行检测，即得。
优选地，在步骤1)中，所述乳香样品溶液组包括乳香供试品溶液、乳香对照药材溶液和乳香阴性样品溶液。
优选地，在步骤2、中，所述乳香样品溶液组检测的具体步骤为吸取乳香样品溶液组，照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，将其分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中饱和，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液风吹至斑点显色清晰。
优选地，吸取上述乳香样品溶液组中各溶液均为0. 001 0. 02体积份，所述环己烷和乙酸乙酯的体积比为1 20 0. 1 5 ；薄层板置展开缸中饱和0 40分钟，喷以5% 重量体积比(称取5重量份香草醛，加100体积份硫酸，搅拌均勻即得。重量份/体积份= g/ml。)香草醛硫酸溶液热风吹至斑点显色清晰。
更为优选地，吸取上述乳香样品溶液组中各溶液均为0.005体积份，所述环己烷和乙酸乙酯的体积比为9 1，薄层板置展开缸中饱和20分钟。
优选地，在步骤1)中，所述制备乳香样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂0. 5 10重量份，研细，加丙酮3 30体积份，超声处理10 60分钟，滤过，滤液浓缩至0. 1 20体积份，作为乳香供试品溶液；另取乳香对照药材0. 05 5重量份，按照所述乳香供试品溶液的制备方法制成乳香对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含乳香的阴性样品，并按所述乳香供试品溶液的配制方法制成乳香阴性样品溶液；
更为优选地，在步骤1)中，所述制备乳香样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂2重量份，研细，加丙酮10体积份，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2体积份， 作为乳香供试品溶液；另取乳香对照药材0. 5重量份，按照所述乳香供试品溶液的制备方法制成乳香对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含乳香的阴性样品，并按所述乳香供试品溶液的配制方法制成乳香阴性样品溶液。
优选地，在步骤1)中，所述木香样品溶液组包括木香供试品溶液、木香对照药材溶液和木香阴性样品溶液。
优选地，在步骤2~)中，所述木香样品溶液组检测的具体步骤为照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取木香样品溶液组，将其分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中饱和，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液风吹至斑点显色清晰。
优选地，吸取上述木香样品溶液组中各溶液均为0. 001 0. 02体积份，所述环己烷、二氯甲烷和乙酸乙酯的体积比为5 30 1 10 0. 1 5 ；薄层板置展开缸中饱和 0 40分钟，喷以5% (重量体积比，即称取5重量份香草醛，加100体积份硫酸，搅拌均勻即得，重量份/体积份=g/ml。)香草醛硫酸溶液热风吹至斑点显色清晰。
更为优选地，吸取上述木香样品溶液组中各溶液均为0. 008体积份，所述环己烷、 二氯甲烷和乙酸乙酯的体积比为15 5 1，薄层板置展开缸中饱和20分钟。
优选地，在步骤1)中，所述制备木香样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂0. 5 10重量份，研细，加甲醇3 30体积份，超声处理10 60分钟，滤过，滤液浓缩至0. 1 20体积份，作为木香供试品溶液；另取木香对照药材0. 1 10重量份，按照所述木香供试品溶液的制备方法制成木香对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含木香的阴性样品，并按所述木香供试品溶液的配制方法制成木香阴性样品溶液；
更为优选地，在步骤1)中，所述制备木香样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂2重量份，研细，加甲醇10体积份，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2体积份， 作为木香供试品溶液；另取木香对照药材1重量份，按照所述木香供试品溶液的制备方法制成木香对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含木香的阴性样品，并按所述木香供试品溶液的配制方法制成木香阴性样品溶液。
优选地，在步骤1)中，所述决明子样品溶液组包括决明子供试品溶液、决明子对照药材溶液和决明子阴性样品溶液。
优选地，在步骤2、中，所述决明子溶液检测的具体步骤为制备决明子样品溶液组后，照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取决明子样品溶液组，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，薄层板置展开缸中饱和，展开；取出，晾干，紫外光灯下检视。
优选地，吸取决明子样品溶液组中各溶液均为0. 001 0. 02体积份，所述石油醚、 甲酸乙酯和甲酸的体积比为5 30 1 10 0. 1 5，所述石油醚为60 90°C的石油醚，薄层板置展开缸中饱和0 40分钟，展开晾干后，于365nm，紫外光灯下检视。
更为优选地，吸取决明子样品溶液组中各溶液均为0.01体积份，所述石油醚、甲酸乙酯和甲酸的体积比为15 5 1，薄层板置展开缸中饱和20分钟。
优选地，在步骤1)中，所述制备决明子样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂0. 5 10重量份，研细，加甲醇5 40体积份，加热回流10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2. 5mol/L硫酸溶液5 40体积份，超声处理1 15分钟，加入三氯甲烷5_40 体积份，加热回流10 60分钟，冷却，移至分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取两次，每次2 30体积份，合并三氯甲烷液，用铺有无水硫酸钠的漏斗滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0. 1 5体积份溶解，作为决明子供试品溶液；另取决明子对照药材0. 1 5 重量份，按照所述决明子供试品溶液的制备方法制成决明子对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决明子的阴性样品，并按所述决明子供试品溶液的配制方法制成决明子阴性样品溶液；
更为优选地，在步骤1)中，所述制备决明子样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂2重量份，研细，加甲醇20体积份，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加 2. 5mol/L硫酸溶液20体积份，超声处理5分钟，加入三氯甲烷20体积份，加热回流30分钟，冷却，移至分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取两次，每次10体积份， 合并三氯甲烷液，用铺有无水硫酸钠的漏斗滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1体积份溶解，作为决明子供试品溶液；另取决明子对照药材1重量份，按照所述决明子供试品溶液的制备方法制成决明子对照样品药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决明子的阴性样品， 并按所述决明子供试品溶液的配制方法制成决明子阴性样品溶液。
优选地，所述十味乳香制剂由以下重量份的各原料组成乳香100份、去核的诃子 150份、决明子80份、毛诃子100份、黄葵子80份、余甘子120份、木香85份、宽筋藤100 份、巴夏嘎80份和渣驯膏50份。
以上乳香、去核的诃子、决明子、毛诃子、黄葵子、余甘子、木香、宽筋藤、巴夏嘎和渣驯膏，除渣驯膏外，其余粉碎成细粉，过蹄，混勻，用渣驯膏加适量水制丸，干燥，即得，本品为黑褐色水丸，微香，味苦。或以上十味，粉碎成细粉，过筛，混勻，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上可接受的口服制剂颗粒剂、丸剂、胶囊剂、片剂或散剂。
优选地，所述十味乳香制剂的剂型还可制成片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂或散剂。
该藏药十味乳香制剂用于治疗干黄水、用于四肢关节红肿疼痛及湿疹。
用法与用量日服用量为2. 4_3g生药量，一日2次。
贮藏密闭，置阴凉干燥处。
本发明的检测方法对处方中乳香、木香、决明子进行了薄层色谱法检测研究，改进的薄层色谱法具有重现性、稳定性好、操作方法简便、精密度高、专属性强、斑点显色清晰、 分离度好等优点，通过建立方法可靠，专属性强的质量检测方法，能够有效控制十味乳香制剂的质量标准检测方法，使十味乳香制剂的质量达到稳定、可控安全。
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中
图1为本发明所述的乳香鉴定薄层色谱图，图中1-3为乳香鉴定中的乳香供试品， 4-5为乳香对照药材，6为乳香阴性样品；
图2为本发明所述的木香鉴定薄层色谱图，图中1-3为木香鉴定中的木香供试品， 4-5为木香对照药材，6为木香阴性样品；
图3为本发明所述的决明子鉴定薄层色谱图，图中1-3为决明子鉴定中的决明子供试品，4-5为决明子对照药材，6为决明子阴性样品。
具体实施方式
下述实验例和实施例只是用于说明本发明而不是限制本发明。
实验例1 乳香的薄层饩谱检测
(1)仪器
乳钵、电子秤、具塞锥形瓶、移液管、超声波提取仪、漏斗、滤纸、蒸发皿、点样器、硅胶G板、层析缸、喷雾瓶、电吹风。
(2)对照药材
乳香对照药材
(3)试剂
乙醇、丙酮、乙醚、正己烷、环己烷、乙酸乙酯、香草醛、硫酸。
(4)检验方法
提取溶剂的选择分别采用乙醇、丙酮、乙醚等溶液为提取溶剂；
提取方法的选择分别采用超声和冷浸；
展开剂的选择分别采用正己烷-乙酸乙酯(体积比为9 1)、环己烷-乙酸乙酯(体积比为9 1)、环己烷-乙酸乙酯体积比为(6 4)为展开剂；分别选择以上提取溶剂、提取方法和展开剂进行试验，结果如下表1所示
表 权利要求
1.一种十味乳香制剂的检测方法，其特征在于，该方法通过薄层色谱法检测其中的乳香、木香和决明子，包括以下步骤1)制备乳香样品溶液组、木香样品溶液组和决明子样品溶液组；2)将乳香样品溶液组点于硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯为展开剂；将木香样品溶液组点于硅胶G薄层板上，环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯为展开剂；将决明子样品溶液组点于硅胶G薄层板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，喷以香草醛硫酸溶液风吹至斑点显色清晰，进行检测，即得。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤1)中，所述乳香样品溶液组包括乳香供试品溶液、乳香对照药材溶液和乳香阴性样品溶液。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，在步骤幻中，所述乳香样品溶液组检测的具体步骤为吸取乳香样品溶液组分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中饱和，展开，取出，晾干，喷以香草酸硫酸溶液风吹至斑点显色清晰；优选地，吸取所述乳香样品溶液组中各溶液均为0. 001 0. 02体积份，所述环己烷和乙酸乙酯的体积比为1 20 0. 1 5 ；薄层板置展开缸中饱和0 40分钟，喷以5%重量体积比的香草醛硫酸溶液热风吹至斑点显色清晰；更优选地，吸取所述乳香样品溶液组中各溶液均为0. 005体积份，所述环己烷和乙酸乙酯的体积比为9 1，薄层板置展开缸中饱和20分钟。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤1)中，所述制备乳香样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂0. 5 10重量份，研细，加丙酮3 30体积份，超声处理10 60分钟，滤过，滤液浓缩至0. 1 20体积份，作为乳香供试品溶液；另取乳香对照药材0. 05 5重量份，按照所述乳香供试品溶液的制备方法制成乳香对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含乳香的阴性样品，并按所述乳香供试品溶液的配制方法制成乳香阴性样品溶液；优选地，所述制备乳香样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂2重量份，研细，加丙酮10体积份，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2体积份，作为乳香供试品溶液； 另取乳香对照药材0. 5重量份，按照所述乳香供试品溶液的制备方法制成乳香对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含乳香的阴性样品，并按所述乳香供试品溶液的配制方法制成乳香阴性样品溶液。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤1)中，所述木香样品溶液组包括木香供试品溶液、木香对照药材溶液和木香阴性样品溶液。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤幻中，所述木香样品溶液组检测的具体步骤为吸取木香样品溶液组，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中饱和，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液风吹至斑点显色清晰；优选地，吸取所述木香样品溶液组中各溶液均为0. 001 0. 02体积份，所述环己烷、二氯甲烷和乙酸乙酯的体积比为5 30 1 10 0. 1 5 ；薄层板置展开缸中饱和0 40分钟，喷以5%重量体积比的香草醛硫酸溶液热风吹至斑点显色清晰；更优选地，吸取所述木香样品溶液组中各溶液均为0. 008体积份，所述环己烷、二氯甲烷和乙酸乙酯的体积比为15 5 1，薄层板置展开缸中饱和20分钟。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤1)中，所述制备木香样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂0. 5 10重量份，研细，加甲醇3 30体积份，超声处理10 60分钟，滤过，滤液浓缩至0. 1 20体积份，作为木香供试品溶液；另取木香对照药材0. 1 10重量份，按照所述木香供试品溶液的制备方法制成木香对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含木香的阴性样品，并按所述木香供试品溶液的配制方法制成木香阴性样品溶液；优选地，在步骤1)中，所述制备木香样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂2 重量份，研细，加甲醇10体积份，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2体积份，作为木香供试品溶液；另取木香对照药材1重量份，按照所述木香供试品溶液的制备方法制成木香对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含木香的阴性样品，并按所述木香供试品溶液的配制方法制成木香阴性样品溶液。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤1)中，所述决明子样品溶液组包括决明子供试品溶液、决明子对照药材溶液和决明子阴性样品溶液。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤2)中，所述决明子样品溶液组检测的具体步骤为吸取决明子样品溶液组，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以石油醚-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，薄层板置展开缸中饱和，展开；取出，晾干，紫外光灯下检视；优选地，吸取所述决明子样品溶液组中各溶液均为0. 001 0. 02体积份，所述石油醚、 甲酸乙酯和甲酸的体积比为5 30 1 10 0. 1 5，所述石油醚为60 90°C的石油醚，薄层板置展开缸中饱和0 40分钟，展开晾干后，于365nm，紫外光灯下检视；更优选地，吸取所述决明子样品溶液组中各溶液均为0. 01体积份，所述石油醚、甲酸乙酯和甲酸的体积比为15 5 1，薄层板置展开缸中饱和20分钟。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤1)中，所述制备决明子样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂0. 5 10重量份，研细，加甲醇 5 40体积份，加热回流10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2. 5mol/L硫酸溶液5 40 体积份，超声处理1 15分钟，加入三氯甲烷5 40体积份，加热回流10 60分钟，冷却， 移至分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取两次，每次2 30体积份，合并三氯甲烷液，用铺有无水硫酸钠的漏斗滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0. 1 5体积份溶解，作为决明子供试品溶液；另取决明子对照药材0. 1 5重量份，按照所述决明子供试品溶液的制备方法制成决明子对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决明子的阴性样品， 并按所述决明子供试品溶液的配制方法制成决明子阴性样品溶液；优选地，所述制备决明子样品溶液组的具体步骤为取所述十味乳香制剂2重量份，研细，加甲醇20体积份，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2. 5mol/L硫酸溶液20体积份，超声处理5分钟，加入三氯甲烷20体积份，加热回流30分钟，冷却，移至分液漏斗中， 分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取两次，每次10体积份，合并三氯甲烷液，用铺有无水硫酸钠的漏斗滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1体积份溶解，作为决明子供试品溶液；另取决明子对照药材1重量份，按照所述决明子供试品溶液的制备方法制成决明子对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决明子的阴性样品，并按所述决明子供试品溶液的配制方法制成决明子阴性样品溶液。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述十味乳香制剂由以下重量份的各原料组成乳香100份、去核的诃子150份、决明子80份、毛诃子100份、黄葵子80份、余甘子120份、木香85份、宽筋藤100份、巴夏嘎80份和渣驯膏50份。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述十味乳香制剂的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂或散剂。
全文摘要
本发明提供一种藏药十味乳香制剂的检测方法，该方法通过薄层色谱法检测其中的乳香、木香和决明子，包括以下步骤1)制备乳香样品溶液组、木香样品溶液组和决明子样品溶液组；2)再将步骤1)中制得的三组样品分别点于三个硅胶G薄层板上，通过展开剂展开，喷以香草醛硫酸溶液风吹至斑点显色清晰，进行检测，即得。本发明的检测方法对处方中乳香、木香、决明子进行了薄层色谱法检测研究，改进的薄层色谱法具有重现性、稳定性好、操作方法简便、精密度高、专属性强、斑点显色清晰分离度好等优点，通过建立方法可靠，专属性强的质量检测方法，能够有效控制十味乳香制剂的质量标准检测方法，使十味乳香制剂的质量达到稳定、可控安全。
文档编号G01N30/90GK102520110SQ201110423240
公开日2012年6月27日 申请日期2011年12月16日 优先权日2011年12月16日
发明者张国霞, 才让卓玛, 陈丽娟 申请人:西藏奇正藏药股份有限公司