将抗体固定到自组装膜上的方法
【专利摘要】本发明的目的在于使自组装膜上所固定的抗体的量增加。本发明方法的特征在于进入了自组装膜与抗体之间的1分子氨基酸。例如一种将抗体固定到自组装膜上的方法，其依次具备以下的工序（a）～（b），工序（a）：准备具备1分子氨基酸及所述自组装膜的基材；工序（b）：将抗体供给至所述基材上，作为所述1分子氨基酸的羧基与所述白蛋白的氨基反应的结果形成由规定化学式表示的肽键。
【专利说明】将抗体固定到自组装膜上的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及将抗体固定到自组装膜上的方法。
【背景技术】
[0002]为了对试样中所含的抗原进行检测或定量，使用生物传感器。抗原与抗体之间的高亲和性可被用到生物传感器中。具体而言，将抗体固定到该生物传感器上。当将抗原供给至生物传感器时，由于抗原与抗体之间的高亲和性，抗原被固定到生物传感器上。
[0003]专利文献I公开了具备抗体的现有的生物传感器。该专利文献I与日本特表2002-520618号公报对应(参照专利文献I的第24页第23行?26行、第25页第3行?第20行、第25页第27行?第26页第13行、及第26页第14行?第22行、第28页第21行?第 23 行、或对应公报的第 0080、0082、0084、0085、0095、0109、0118 及 0119 段)。图 2 表示专利文献I的图7所公开的生物传感器。
[0004]根据专利文献I的图7有关的描述，该生物传感器用于对生物体分子的活性进行筛选。该生物传感器具备单层7、亲和性标记物8、衔接子分子9及蛋白10。单层7由化学式X-R-Y表示的自组装膜构成(参照专利文献I中的第24页第23行?26行、第25页第3行?第20行、第25页第27行?第26页第13行及第26页第14行?第22行。或者，参照对应公报的第0080、0082、0084、0085段)。X、R及Y的一个例子分别是HS-、链烷基及羧基(参照专利文献I中的第25页第3行?第20行、第25页第27?第26页第13行及第28页第21行?第23行。或者参照对应公报的第0084、0085及0095段)。
[0005]现有技术文献
[0006]专利文献
[0007]专利文献1:国际公开第00/04382号公报
【发明内容】
[0008]发明欲解决的课题
[0009]为了提高抗原的检测灵敏度或定量精度，需要增加固定在该生物传感器上的抗体的量。
[0010]本
【发明者】发现，通过使自组装膜与I分子氨基酸键合、然后将抗体固定，能够显著增加每单位面积所固定的抗体的量。基于该认识完成了本发明。
[0011]本发明的目的在于提供使自组装膜上所固定的抗体的量增加的方法及具有通过该方法固定的抗体的传感器。
[0012]用于解决课题的手段
[0013]以下的第I?21项解决了上述课题。
[0014](I) 一种将抗体固定到自组装膜上的方法，其具备以下工序:
[0015]工序(a):准备具备I分子氨基酸及自组装膜的基材，其中，
[0016]所述I分子氨基酸通过以下的化学式(I)所示的肽键键合于所述自组装膜，[0017]
【权利要求】
1.ー种将抗体固定到自组装膜上的方法，其具备以下エ序: エ序(a):准备具备I分子氨基酸及自组装膜的基材，其中， 所述I分子氨基酸通过以下的化学式(I)所示的肽键键合于所述自组装膜，
2.根据权利要求1所述的方法，其中， 所述エ序(a)具备以下的エ序(al)及(a2): エ序(al):准备表面上具备自组装膜的基材，其中，所述自组装膜在一端具有羧基，エ序(a2):将所述I分子氨基酸供给至所述基材，在所述化学式(I)所示的所述自组装膜的一端的所述羧基与所述I分子氨基酸的氨基之间形成肽键。
3.根据权利要求1所述的方法，其中， 在所述エ序(a)及所述エ序(b)之间还具备所述エ序(ab): エ序(ab):将所述I分子氨基酸的羧基用N-羟基琥珀酰亚胺及1-乙基-3- (3- 二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐的混合液活化。
4.根据权利要求2所述的方法，其中， 在所述エ序(al)及所述エ序(a2)之间还具备所述エ序(ala): エ序(alb):将所述自组装膜的羧基用N-羟基琥珀酰亚胺及1-乙基-3- (3- 二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐的混合液活化。
5.根据权利要求1所述的方法，其中， 所述化学式(II)如以下的化学式(III)所示:
6.根据权利要求1所述的方法，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸、苏氨酸、亮氨酸、缬氨酸及异亮氨酸组成的组。
7.根据权利要求1所述的方法，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸及苏氨酸组成的组。
8.根据权利要求1所述的方法，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸及谷氨酸组成的组。
9.根据权利要求1所述的方法，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺及酪氨酸组成的组。
10.一种传感器，其具备自组装膜、I分子氨基酸及抗体，其中， 所述自组装膜及所述抗体之间夹有所述I分子氨基酸， 所述抗体通过以下的化学式(II)所示的2个肽键键合于自组装膜，
11.根据权利要求10所述的传感器，其中， 所述化学式(II)如以下的化学式(III)所示:
12.根据权利要求10所述的传感器，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸、苏氨酸、亮氨酸、缬氨酸及异亮氨酸组成的组。
13.根据权利要求10所述的传感器，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸及苏氨酸组成的组。
14.根据权利要求10所述的传感器，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸及谷氨酸组成的组。
15.根据权利要求10所述的传感器，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺及酪氨酸组成的组。
16.ー种使用传感器对试样所含的抗原进行检测或定量的方法，其具备以下エ序: エ序(a):准备具备自组装膜、I分子氨基酸及抗体的传感器，其中， 所述自组装膜及所述抗体之间夹有所述I分子氨基酸， 所述抗体通过以下的化学式(II)所示的2个肽键键合于自组装膜，
自组装膜I分子氨基酸的残基
17.根据权利要求16所述的方法，其中， 所述化学式(II)如以下的化学式(III)所示:
18.根据权利要求16所述的方法，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸、苏氨酸、亮氨酸、缬氨酸及异亮氨酸组成的组。
19.根据权利要求16所述的方法，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸及苏氨酸组成的组。
20.根据权利要求16所述的方法，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸及谷氨酸组成的组。
21.根据权利要求16所述的方法，其中， 所述I分子氨基酸选自由组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、天冬酰胺及酪氨酸组成的组。
【文档编号】G01N33/543GK103492879SQ201180070414
【公开日】2014年1月1日 申请日期:2011年9月7日 优先权日:2011年6月10日
【发明者】畠冈由香利 申请人:松下电器产业株式会社