专利名称：一种对椰子类食品中月桂酸含量的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种检测方法，具体地说，涉及一种对椰子汁、椰浆、椰子粉等椰子类食品的检测方法。
背景技术：
目前食品安全问题已经是一个非常严重的问题，加强检测，建立完善的食品安全检测系统，以及建立控制标准，是保障食品安全的有效措施。对于椰子类食品，目前其质量控制项目偏少(椰子类食品的理化控制指标目前只有蛋白质和脂肪含量两项)，从而导致椰子类食品容易出现掺假、掺伪、质量低等的食品质量安全事件。因此迫切需要探索一套对椰子类食品中月桂酸的提取、纯化、定量的检测方法，建立产品中的月桂酸含量标准，在目前的行业标准中添加月桂酸这项控制指标，以此来控制产品的整体质量，避免出现食品质量安全事件的隐患。我国种植椰子已有2000多年的历史，现主要集中在海南省各地，椰子在海南经济作物中占有重要的地位，营养价值很高，现代科学研究表明，椰汁及椰肉中含有蛋白质、糖类、油脂类、维生素类以及钙、磷、铁等微量元素及矿物质，食品工业上可利用研制多种食品，如椰果、椰子酒、椰子水饮料等。椰子油的主要成分以月桂酸为主，此外还含有己酸、辛酸、癸酸、肉豆蘧酸、棕榈酸、硬脂酸等饱和脂肪酸及少量油酸等不饱和脂肪酸。月桂酸，即十二烷酸，是重要的化工原料，主要是利用一些天然植物油脂经水解、精馏等工艺制得。目前已有文献报道利用气相色谱方法来直接快速测定水解山苍籽核仁油制得的月桂酸的含量。也有文献采用GC-FID法对椰子油中的脂肪酸成分进行了分析报道，也有文献报道使用高温气相色谱一 EI质谱(GC-MS)法对椰子油中的脂肪酸甘油三酯进行了分析。但目前并没有文献报道对椰子汁、椰浆、椰子粉等椰子类食品中月桂酸的提取、纯化、定量的整套检测方法。因此建立一套对椰子类食品中月桂酸的提取、纯化、定量的检测方法，形成对产品的一系列检测数据的积累，从而建立产品中的月桂酸含量标准，在目前的行业标准中添加月桂酸这项控制指标，以此来控制椰子类食品的整体质量具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种对椰子汁、椰浆、椰子粉等椰子类食品的检测方法，用于提高椰子类食品的质量控制水平，该方法是一种客观有效的用于分析椰子类食品质量的检测手段，从而避免椰子类食品质量控制项目偏少(目前椰子类食品的理化控制指标只有蛋白质和脂肪含量两项)，容易出现掺伪、质量低的缺陷，避免出现食品质量安全事件的隐患。本发明的技术方案利用建立一套对椰子类食品中月桂酸的提取、纯化、定量的检测方法，形成对产品的一系列检测数据的积累，从而建立产品中的月桂酸含量标准，在目前 的行业标准中添加月桂酸这项控制指标，以此来控制产品的整体质量。本发明涉及的对椰子类食品中月桂酸含量的检测方法，步骤如下
步骤一准备测试样品包括提取脂肪和皂化，将测试样品中的月桂酸转化为月桂酸甲酯；步骤二 标准工作液的制备包括月桂酸标准贮备液的制备和月桂酸甲酯标准工作液的制备；步骤三气相色谱分析分析处理通过分析待测样液和配制的标准液的谱图，获得椰子类食品中月桂酸的含量。
通过上述步骤完成对椰子类食品中月桂酸的提取、甲酯化、定量的检测方法。由于月桂酸为椰子的特征性成分，属于饱和脂肪酸，沸点为299°C，出于安全与检测条件的考虑，本发明中将其转化为沸点较低(261 262°C)的月桂酸甲酯来进行定量检测。本检测方法在提取脂肪的步骤中，对于待测样品是椰浆或椰子汁的脂肪提取，主要是在加入氨水、乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜，使脂肪游离出来，再加入石油醚、乙醚，提取粗脂肪。对于椰子粉的脂肪提取则采用传统的索氏提取法，然后对提取的脂肪酸用氢氧化钠的甲醇溶液皂化，再让皂化物与BF3-乙醚混合溶液反应转化为脂肪酸甲酯，得到待测样液。最后通过气相色谱分析待测样液和配制的标准液的谱图，获得椰子类食品中月桂酸的含量。本发明涉及的对椰子类食品中月桂酸含量的检测方法具体如下步骤一、准备测试样品包括提取脂肪和皂化，将测试样品中的月桂酸转化为月桂酸甲酯，具体步骤如下(I)提取脂肪步骤a、对于待测样品是椰浆或椰子汁的脂肪提取吸取10. Oml椰子汁或2 5g椰浆试样于IOOml量筒中，加入I. 25ml氨水，充分混匀，置60°C水浴中加热15min，振摇2min，加入IOml乙醇,充分摇勻；于冷水中冷却后,加入IOml乙醚,振摇0. 5min,加入IOml石油醚，振摇0. 5min,静置30min,待上层澄清时，读取有机层体积并记录；吸取有机层提取液
10.Oml于50ml于圆底烧瓶中，水浴挥去乙醚，得残留物；b、对于待测样品是椰子粉的脂肪提取称取2 5g椰子粉样品，移入滤纸筒内；将滤纸筒放入脂肪抽提器的抽提筒内，连接干燥的IOOml圆底烧瓶，加入无水乙醚至瓶内体积的三分之二处，于水浴上加热，使乙醚不断回流提取出次/h-8次/h)，一般抽提6h-12h ;提取完成后，取出装置，将接收瓶里的乙醚提取液转移至50ml容量瓶中，定容至刻度。吸取20. Oml提取液于50ml于圆底烧瓶中，水浴挥去乙醚，得残留物；(2)阜化步骤将步骤(I)中的残留物用正已烧溶解，正己烧用量3 8mL,再加入3 SmL的氢氧化钠甲醇溶液，接上冷凝器，在适宜温度的水浴中回流12-18min，再从冷凝器顶部加入3 8m L三氟化硼-乙醚继续回流3min ;停止加热,将烧瓶连带冷凝装置从加热设备中取出，立即从冷凝管顶部加入5ml正己烷，冷却至室温，取下烧瓶，加入12 18ml饱和氯化钠溶液，塞好瓶塞，剧烈摇动至少15s，继续加入饱和氯化钠溶液至烧瓶颈处，静置分层，用滴管将上层正己烷萃取液转移至25ml容量瓶中，再用正己烷多次萃取，定容至刻度，摇匀，为待测样液；该皂化步骤即是月桂酸转变为月桂酸甲酯。
步骤二、标准工作液的制备包括月桂酸标准贮备液的制备和月桂酸甲酯标准工作液的制备；具体步骤如下(I)月桂酸标准贮备液的制备称取月桂酸标准品0. 6g于50mL棕色容量瓶中，用正已烷溶解并定容，摇匀，贮存于冰箱中备用；(2)月桂酸甲酯标准工作液的制备移取月桂酸标准贮备液5. OmL，加入3 SmL的氢氧化钠甲醇溶液，接上冷凝器，在适宜温度的水浴中回流12-18min，再从冷凝器顶部加入3 8mL三氟化硼-乙醚继续回流3min ;停止加热,将烧瓶连带冷凝装置从加热设备中取出，立即从冷凝管顶部加入5ml正己烷，冷却至室温，取下烧瓶，加入12 18ml饱和氯化钠溶液，塞好瓶塞，剧烈摇动至少15s，继续加入饱和氯化钠溶液至烧瓶颈处，静置分层，用滴管将上层正己烷萃取液转移至25ml容量瓶中，再用正己烷多次萃取，定容至刻度，摇匀，为甲酯标准溶液(上述步骤后即得到甲酯化的标准储备液)，将甲酯化后的标准储备液转 移至25ml容量瓶中，用正己烷定容至刻度，摇匀。分别吸取上述溶液0. 5、I. 0,2. 0,3. 0,4. 0于5ml容量瓶中，定容至刻度，摇匀，为月桂酸甲酯标准工作溶液；步骤三、气相色谱分析通过分析待测样液和配制的标准液的谱图，获得椰子类食品中月桂酸的含量；具体分析方法如下气相色谱的参考条件色谱柱Agilent HP-5毛细管柱30mX0. 25mmX0. 25 y m ;载气流速1. Oml/min(恒流模式)；升温程序初始温度150°C，以10°C /min升至250°C，保持3min ;进样口温度250°C ;检测器温度280°C ;分流进样(分流比):50 1，进样量Iul ;流速氮气 40ml/min ;氢气 40ml/min ;空气 400ml/min ；将步骤二中配制好的月桂酸甲酯标准工作液在上述色谱条件下进样，以保留时间定性，色谱峰面积定量。以月桂酸浓度(mg/ml)为横坐标，以峰面积积分为纵坐标制定标准曲线；将步骤A(2)项下的待测样液在上述色谱条件下进样，以色谱峰面积积分定量。试样中月桂酸的含量按如下式(I)计算
权利要求
1.一种对椰子类食品中月桂酸含量的检测方法，步骤如下 步骤一准备测试样品包括提取脂肪和皂化，将测试样品中的月桂酸转化为月桂酸甲酯； 步骤二 标准工作液的制备包括月桂酸标准贮备液的制备和月桂酸甲酯标准工作液的制备； 步骤三气相色谱分析分析处理通过分析待测样液和配制的标准液的谱图，获得椰子类食品中月桂酸的含量。
2.根据权利要求I的检测方法，其中步骤一所涉及的准备测试样品的具体步骤如下 (1)提取脂肪步骤 a、对于待测样品是椰浆或椰子汁的脂肪提取吸取10.Oml椰子汁或2 5g椰浆试样于IOOml量筒中，加入I. 25ml氨水，充分混匀，置60°C水浴中加热15min，振摇2min，加入IOml乙醇,充分摇勻；于冷水中冷却后，加入IOml乙醚,振摇O. 5min,加入IOml石油醚,振摇O. 5min，静置30min，待上层澄清时，读取有机层体积并记录；吸取有机层提取液10. Oml于50ml于圆底烧瓶中，水浴挥去乙醚，得残留物； b、对于待测样品是椰子粉的脂肪提取称取2 5g椰子粉样品，移入滤纸筒内；将滤纸筒放入脂肪抽提器的抽提筒内，连接干燥的IOOml圆底烧瓶，加入无水乙醚至瓶内体积的三分之二处，于水浴上加热，使乙醚不断回流提取(6次/h-8次/h)，一般抽提6h-12h ；提取完成后，取出装置，将接收瓶里的乙醚提取液转移至50ml容量瓶中，定容至刻度。吸取20. Oml提取液于50ml于圆底烧瓶中，水浴挥去乙醚，得残留物； (2)皂化步骤将步骤(I)中的残留物用正已烷溶解，正己烷用量3 8mL，再加入3 SmL的氢氧化钠甲醇溶液，接上冷凝器，在适宜温度的水浴中回流12-18min，再从冷凝器顶部加入3 8m L三氟化硼-乙醚继续回流3min ;停止加热,将烧瓶连带冷凝装置从加热设备中取出，立即从冷凝管顶部加入5ml正己烷，冷却至室温，取下烧瓶，加入12 18ml饱和氯化钠溶液，塞好瓶塞，剧烈摇动至少15s，继续加入饱和氯化钠溶液至烧瓶颈处，静置分层，用滴管将上层正己烷萃取液转移至25ml容量瓶中，再用正己烷多次萃取，定容至刻度，摇匀，为待测样液。
3.根据权利要求I的检测方法，其中步骤二所涉及的标准工作液的制备具体步骤如下 (1)月桂酸标准贮备液的制备称取月桂酸标准品O.6g于50mL棕色容量瓶中，用正已烷溶解并定容，摇匀，贮存于冰箱中备用； (2)月桂酸甲酯标准工作液的制备移取月桂酸标准贮备液5.OmL，加入3 SmL的氢氧化钠甲醇溶液，接上冷凝器，在适宜温度的水浴中回流12-18min，再从冷凝器顶部加入3 8mL三氟化硼-乙醚继续回流3min ;停止加热,将烧瓶连带冷凝装置从加热设备中取出，立即从冷凝管顶部加入5ml正己烷，冷却至室温，取下烧瓶，加入12 18ml饱和氯化钠溶液，塞好瓶塞，剧烈摇动至少15s，继续加入饱和氯化钠溶液至烧瓶颈处，静置分层，将甲酯化后的标准储备液转移至25ml容量瓶中，用正己烷定容至刻度，摇匀。分别吸取上述溶液O. 5、I. O、2. O、3. O、4. O于5ml容量瓶中，定容至刻度，摇匀，为月桂酸甲酯标准工作溶液。
4.根据权利要求I的检测方法，其中步骤三所涉及的气相色谱分析分析处理具体如下气相色谱的参考条件色谱柱Agilent HP-5毛细管柱30mX0. 25mmX0. 25μπι ;载气流速1. Oml/min(恒流模式)；升温程序初始温度150°C，以10°C /min升至250°C，保持3min ;进样口温度250°C ;检测器温度280°C ;分流进样(分流比):50 1，进样量1 μ I ;流速氮气 40ml/min ;氢气 40ml/min ;空气 400ml/min ； 将步骤二中配制好的月桂酸甲酯标准工作液在上述色谱条件下进样，以保留时间定性，色谱峰面积定量。以月桂酸浓度(mg/ml)为横坐标，以峰面积积分为纵坐标制定标准曲线；将步骤A(2)项下的待测样液在上述色谱条件下进样，以色谱峰面积积分定量。
试样中月桂酸的含量按如下式(I)计算
全文摘要
本发明提供一种对椰子汁、椰子粉等椰子类食品中月桂酸成分的检测方法，该方法步骤包括准备测试样品、标准工作液的准备以及气相色谱分析处理，通过这三个步骤完成对椰子类食品中月桂酸的提取、甲酯化、定量的检测方法。该方法是一种客观有效的用于分析椰子类食品质量的检测手段，从而避免椰子类食品质量控制项目偏少(目前椰子类食品的理化控制指标只有蛋白质和脂肪含量两项)，容易出现掺伪、质量低的缺陷，避免出现食品质量安全事件的隐患。
文档编号G01N30/02GK102662008SQ20121012149
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月24日 优先权日2012年4月24日
发明者兰余, 吴炜, 王化山, 雷燕, 黄卓 申请人:海南椰岛(集团)股份有限公司