专利名称：一种组织透明试剂及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及组织样本制备领域，特别涉及到一种组织透明试剂及其制备方法和应用。
背景技术：
在医学和生物研究中，生物体组织样本的透明化有助于医生和科研人员的观察和研究。在透明组织样本制备领域，目前应用最广的透明剂是ニ甲苯，ニ甲苯是ー种无色透明、具有芳香气味的挥发性液体，它作用迅速，能与酒精混合，溶解石蜡，又可与封藏用的树胶混合，但使用时必须脱净水分，否则发生乳状混浊。为了避免材料收缩，应采取逐步从纯酒精过渡到ニ甲苯中，即无水酒精一1/2无水酒精+1/2 ニ甲苯一ニ甲苯。然而，ニ甲苯毒性较大，对人体健康有危害，它可通过吸入、食入、经皮吸收进入人体。其毒性主要是对中枢神经和植物神经的麻醉及黏膜的刺激作用。短期内吸入较高浓度核武器中可出现眼及上呼吸道明显的刺激症状、眼结膜及咽充血、头晕、恶心、呕吐、胸闷、四肢无力、意识模糊、步态蹒跚。重者可有躁动、抽搐或昏迷，有的有癔病样发作。长期接触有神经衰弱综合征，女エ有月经异常，工人常发生皮肤干燥、皲裂、皮炎。对眼及上呼吸道有刺激作用，高浓度时对中枢神经系统有麻酔作用，严重的可导致死亡。因此为了保证消费者的安全，目前欧美各国均禁止其在非安全地帯的应用。但还是有某些国家和地区成为全球性的公害。因此，现有技术还有待于改进和发展。
发明内容
鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种组织透明试剂及其制备方法和应用，g在解决目前采用组织样本透明剂ニ甲苯存在的安全和环保问题。本发明的技术方案如下
一种组织透明试剂，其中，按照体积百分比，包括以下组分 a-菔烯O. 59-0. 79% ；
b-菔烯O. 45-0. 65% ；
苎烯O. 45-0. 65% ；
萜烯O. 45-0. 65% ；
长叶烯O. 45-0. 65% ；
石竹烯O. 45-0. 65% ；
醛柠檬醛汁 O. 45-0. 65% ； d-芋烯32. 3-34. 3% ；
Y-松油烯26. 7-28. 7% ；
癸醛O. 45-0. 65% ；
辛醛O. 45-0. 65% ；
朽1 樣醒O. 45-0. 65% ；、正丁醇32. 3-34. 3%。所述的组织透明试剂，其中，按照体积百分比，包括以下组分 a-菔烯O. 69% ；
b-菔烯O. 55% ；
苎烯O. 55% ；
職烯O. 55% ；
长叶烯O. 55% ；
石竹烯O. 55% ；
醛柠檬醛汁 O. 55% ； d-芋烯33. 3% ；
Y-松油烯27. 7% ；
癸醛O. 55% ；
辛醛O. 55% ；
朽1檬醒O. 55% ；
正丁醇33. 3%。ー种如上所述的组织透明试剂的制备方法，其中，包括以下步骤
依次将a-菔烯、b-菔烯、苎烯、萜烯、长叶烯、石竹烯、醛柠檬醛汁、d-芋烯、Y-松油烯、癸醛、辛醛、柠檬醛、正丁醇加入到容器中,把电磁棒放进液体中，在电磁炉上搅拌60分钟。ー种如上所述的组织透明试剂的应用，其中，所述组织透明试剂的应用，将所述组织透明试剂用于透明动物、人体和临床病理组织。所述的组织透明试剂的应用，其中，包括以下步骤
取组织样品经酒精浸泡后，放入所述的组织透明剂中浸没6小吋。有益效果本发明的组织透明试剂，作用迅速，且能与酒精混合，溶解石蜡，又可与封藏用的树胶混合，具有强カ渗透的功效。经本发明组织透明试剂处理过的样本透明效果好，可替代常用试剂ニ甲苯，解决由于使用ニ甲苯所带来的安全和环保问题。
具体实施例方式为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进ー步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。本发明提供一种组织透明试剂，替代ニ甲苯透明化学试剂，其内容是复合的化学成分，具有强カ渗透的特殊功效，而且，是绿色环保产品。具体地，所述组织透明试剂，按照体积百分比，包括以下组分 a-菔烯O. 59-0. 79% ；
b-菔烯O. 45-0. 65% ；
苎烯O. 45-0. 65% ；
萜烯O. 45-0. 65% ；
长叶烯O. 45-0. 65% ；
石竹烯O. 45-0. 65% ；、醛柠檬醛汁 O. 45-0. 65% ； d-芋烯32. 3-34. 3% ；
Y-松油烯26. 7-28. 7% ；
癸醛O. 45-0. 65% ； 辛醛O. 45-0. 65% ；
朽1 樣醒O. 45-0. 65% ；
正丁醇32. 3-34. 3%。其中，所述萜烯的分子式为C3tlH48，分子量为408。所述癸醛的分子式为CltlH2tlO,分子量156. 26。所述醒朽1檬醒汁的分子式为CltlH16O,分子量为152. 23。所述正丁醇又名丁醇，分子式为C4HltlO,结构式为CH3(CH2)30H。本发明中提供所述组织透明试剂的制备方法，其具体包括以下步骤
根据上述配方，依次将各组分加入到容器中，把电磁棒放进液体中，在电磁炉上搅拌60分钟左右，直到全部溶解后即可得到本产品。所述组织透明试剂，能用于替代ニ甲苯透明化学试剂，其作用迅速，能与酒精混合，溶解石蜡，又可与封藏用的树胶混合。但所述组织透明试剂在使用时必须脱净水分，否则会发生乳状混浊。为了避免材料急性收缩，所述组织透明试剂应采取逐步从纯酒精过渡到即无水酒精一1/2无水酒精+1/2所述组织透明试剂一所述组织透明试剂。本发明中提供所述组织透明试剂的应用，将所述组织透明试剂用于透明动物、人体和临床病理组织。所述组织透明试剂可用于替代ニ甲苯透明组织，具有强于ニ甲苯的功效，又不便组织变脆，而且又不具有毒性作用，是环保绿色产品，对人体没有危害。所述组织透明试剂，按照体积百分比，最优选为包括以下组分 a-菔烯O. 69% ；
b-菔烯O. 55% ；
苎烯O. 55% ；
職烯O. 55% ；
长叶烯O. 55% ；
石竹烯O. 55% ；
醛柠檬醛汁 O. 55% ； d-芋烯33. 3% ；
Y-松油烯 27. 7% ；
癸醛O. 55% ；
辛醛O. 55% ；
朽1檬醒O. 55% ；
正丁醇33. 3%。经过大量的实验和发明人的研究调配，发现上述配方所制成的组织透明试剂所达到的效果最为理想。将组织经过酒精透明后，放入所述组织透明液内约6小时，然后浸入蜡内(65摄氏度)，经过切片证实，透明效果最好，又不至于使组织变脆，得到最理想的效果。以下通过具体的实施例对本发明作进ー步详细说明
实施例I按体积百分比，取a-菔烯25 ml、b-菔烯20 ml、芒烯20 ml、職烯20 ml、长
叶烯20 ml、石竹烯20 ml、醛柠檬醛汁20 ml、d_芋烯1200 ml、Y -松油烯1000 ml、癸醛20 ml、辛醛20 ml、柠檬醛20 ml、正丁醇1200 ml，依次将各组分加入到容器中，把电磁棒放进液体中，在电磁炉上搅拌60分钟，直到全部溶解后即可得到本产品。所述组织透明试剂脱水处理过程为无水酒精一1/2无水酒精+1/2所述组织透明试剂一所述组织透明试剂。取大鼠大脑、甲状腺、肺、肝脏等33个脏器和人体组织22种，样品经酒精浸泡后，放入所述的组织透明剂中浸没6小时，然后浸入65°C蜡液内，最后切片处理。经切片证实，实施例I所得效果最为理想，所述的组织透明试剂能够使处理的组织样品呈现很好透明效果，且不至于使组织变脆。实施例2
按体积百分比，取a-菔烯15. 8ml、b-菔烯9. 2 ml、芒烯11ml、職烯11 ml、长
叶烯11 ml、石竹烯11 ml、醒梓檬醒汁9. 2ml、d_芋烯686ml、Y -松油烯546ml、癸醒9. 2ml、辛醛11 ml、柠檬醛9. 2 ml、正丁醇660. 4ml，依次将各组分加入到容器中，把电磁棒放进液体中，在电磁炉上搅拌60分钟，直到全部溶解后即可得到本产品。所述组织透明试剂脱水处理过程为无水酒精一1/2无水酒精+1/2所述组织透明试剂一所述组织透明试剂。取大鼠大脑、甲状腺、肺、肝脏等20个脏器，样品经酒精浸泡后，放入所述的组织透明剂中浸没6小时，然后浸入65°C蜡液内，最后切片处理。经切片证实，所述的组织透明试剂能够使处理的组织样品呈现很好透明效果，且不至于使组织变脆。实施例3
按体积百分比，取a-菔烯11. 8 ml、b-菔烯11 ml、芒烯9. 2ml、職烯9.2
ml、长叶烯9. 2ml、石竹烯9. 2ml、醒朽1檬醒汁11 ml、d_芋烯646 ml、Y-松油烯574ml、癸醛Ilml、辛醛9. 2ml、柠檬醛IIml、正丁醇680ml，依次将各组分加入到容器中，把电磁棒放进液体中，在电磁炉上搅拌60分钟，直到全部溶解后即可得到本产品。所述组织透明试剂脱水处理过程为无水酒精一1/2无水酒精+1/2所述组织透明试剂一所述组织透明试剂。取大鼠大脑、甲状腺、肺、肝脏等30个脏器，样品经酒精浸泡后，放入所述的组织透明剂中浸没6小时，然后浸入65°C蜡液内，最后切片处理。经切片证实，所述的组织透明试剂能够使处理的组织样品呈现很好透明效果，且不至于使组织变脆。应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
权利要求
1.一种组织透明试剂，其特征在于，按照体积百分比，包括以下组分 a-菔烯O. 59-0. 79% ； b-菔烯O. 45-0. 65% ； 苎烯O. 45-0. 65% ； 萜烯O. 45-0. 65% ； 长叶烯O. 45-0. 65% ； 石竹烯O. 45-0. 65% ； 醛柠檬醛汁 O. 45-0. 65% ； d-芋烯32. 3-34. 3% ； Y-松油烯26. 7-28. 7% ； 癸醛O. 45-0. 65% ； 辛醛O. 45-0. 65% ； 朽1 樣醒O. 45-0. 65% ； 正丁醇32. 3-34. 3%。
2.根据权利要求I所述的组织透明试剂，其特征在于，按照体积百分比，包括以下组分 a-菔烯O. 69% ； b-菔烯O. 55% ； 苎烯O. 55% ； 職烯O. 55% ； 长叶烯O. 55% ； 石竹烯O. 55% ； 醛柠檬醛汁 O. 55% ； d-芋烯33. 3% ； Y-松油烯27. 7% ； 癸醛O. 55% ； 辛醛O. 55% ； 朽1檬醒O. 55% ； 正丁醇33. 3%。
3.—种如权利要求1-2任一项所述的组织透明试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 依次将a-菔烯、b-菔烯、苎烯、萜烯、长叶烯、石竹烯、醛柠檬醛汁、d-芋烯、Y -松油烯、癸醛、辛醛、柠檬醛、正丁醇加入到容器中,把电磁棒放进液体中,在电磁炉上搅拌60分钟。
4.一种如权利要求1-2任一项所述的组织透明试剂的应用，其特征在于，所述组织透明试剂的应用，将所述组织透明试剂用于透明动物、人体和临床病理组织。
5.根据权利要求4所述的组织透明试剂的应用，其特征在于，包括以下步骤 取组织样品经酒精浸泡后，放入所述的组织透明剂中浸没6小吋。
全文摘要
本发明公开了一种组织透明试剂及其制备方法和应用，所述组织透明试剂按照体积百分比，包括以下组分a-蒎烯0.59-0.79%；b-蒎烯0.45-0.65%；苎烯0.45-0.65%；萜烯0.45-0.65%；长叶烯0.45-0.65%；石竹烯0.45-0.65%；醛柠檬醛汁0.45-0.65%；d-芋烯32.3-34.3%；γ-松油烯26.7-28.7%；癸醛0.45-0.65%；辛醛0.45-0.65%；柠檬醛0.45-0.65%；正丁醇32.3-34.3%。所述组织透明试剂可替代常用透明试剂二甲苯，经所述组织透明试剂处理过的样本组织不变脆，透明效果好。
文档编号G01N1/30GK102749244SQ20121026723
公开日2012年10月24日 申请日期2012年7月31日 优先权日2012年7月31日
发明者王虎 申请人:王虎