专利名称：一种用于土壤和肥料中三聚氰胺测定前处理的提取方法
技术领域：
本发明涉及一种用于土壤和肥料中三聚氰胺测定前处理的提取方法，该方法在提取方式、提取液与稀释液的选取等方面有很大创新，能够真实有效的测定上述土壤和肥料样品中三聚氰胺的含量，其提取效果非常满意。
背景技术：
被添加入奶粉、宠物食品及动物饲料，引发一系列的人畜发生肾衰竭而死亡事件的三聚氰胺(melamine)，是一种重 要的氮杂环有机化工原料，常被用于生产塑料、胶水、纺织、皮革、医药和阻燃剂，在亚洲部分国家也被用来制造化肥。同时，三聚氰胺还是一种名为灭蝇胺的农药的代谢产物，三聚氰胺与人们的生活密切相关，其生物安全性已经成为消费者关注的一个热点话题。由于三聚氰胺含氮量很高(接近67% )，人们通常把它作为缓释肥料广泛使用。亚洲作为世界农业的大户，使用含有三聚氰胺的化肥可能存在的风险需要引起足够的重视。目前，对三聚氰胺的检测方法虽然成熟，但对三聚氰胺的提取方法研究较少，现有的部分文献报道的土壤和肥料中三聚氰胺的提取方法提取效果不佳，因此优化土壤和肥料中三聚氰胺的提取方法，以便真实测定上述样品中三聚氰胺的含量，对肥料中三聚氰胺的质量安全和监管意义重大。
发明内容
本发明主要侧重于优化土壤和肥料中三聚氰胺测定前处理的提取方法，通过提取方式、提取液、稀释等的选择比较，找到了最佳的土壤和肥料中三聚氰胺测定前处理的提取方法。一种用于土壤和肥料中三聚氰胺的提取方法，它由下列步骤组成步骤1:称取干燥的不同化肥样品各一定量，研钵磨碎后，各称量lg(精确到O.1mg)，置于酸煮洗净的锥形瓶中，加入事先配好的碱性有机化合物(如5% -30%的氨水甲醇水溶液)30mL作为提取液。用盖子封口后，置于特制的振荡仪上；步骤2 :打开振荡仪，设定振荡功率为250W、振荡时间30min，开始振荡。待振荡结束，快速把上清液移至离心管，然后放入冷冻离心机中，设置时间5min、转速6000rpm后离心；步骤3 :将得到的离心液倒入干净的锥形瓶中，取出IOmL的离心液，选择合适的吹干方式(如氮气吹干)，用缓冲溶液有机溶剂作为稀释液来定容；步骤4 :取2mL定容后的提取液，经过O. 45 μ m有机滤膜后，放入进样瓶中，HPLC上机检测。本发明与现有技术相比，最大的贡献在于(I)提取方式优化采用机械振荡提取能得到明显优于文献报道的其它提取方法(如超声提取)；(2)提取液优化碱性有机化合物在本案例中对三聚氰胺的提取效果优于其它水溶性有机化合物(如甲醇水溶液)；(3)稀释液优化含有少量盐的缓冲有机溶剂(pH为3-5)作为稀释液效果明显优于单一的有机溶剂。说明书是具体实施部分对本发明的内容有更具体的描述，可以更详细的了解本发明的细节。
具体实施例方式以下通过实例进一步说明本发明。实施例1机械振荡提取效果明显优于超声振荡I)超声提取步骤称取四种化肥样品lg(精确到O.1mg)于50mL离心管中，加入25mL氨水甲醇溶液,超声30min,离心5min,将上清液倒入另一 50mL离心管中；再次加入25mL氨水甲醇溶液,超声30min,离心5min,将两次上清液混合,取IOmL提取液经氮气吹干，用稀释液定容至5mL，过O. 45 μ m有机滤膜，HPLC检测。2)机械振荡提取步骤称取化肥样品Ig于IOOmL锥形瓶中，加入30mL氨水甲醇溶液，振荡30min，离心5min，将上清液倒入50mL离心管中；再次加入30mL氨水甲醇溶液，振荡30min,离心5min,将两次上清液混合,取IOmL提取液,氮气吹干,用稀释液定容至5mL,过O. 45 μ m有机滤膜，HPLC检测。多次试验的结果见表1:表I不同提取方式检测化肥中三聚氰胺
权利要求
1.一种用于土壤和肥料中三聚氰胺测定前处理的提取方法，它由下列步骤组成 步骤1:称取干燥的不同土壤或肥料样品各一定量，研钵磨碎后，各称量lg，置于酸煮洗净的锥形瓶中，加入事先配好的提取液一定量。用盖子封口后，置于特制的振荡仪上；步骤2 :打开振荡仪，设定振荡参数后开始振荡。待振荡结束，快速把上清液移至离心管，然后放入离心机中，设置离心参数后离心； 步骤3 :将得到的离心液倒入干净的锥形瓶中，取出一定体积的离心液，选择合适的吹干方式吹干，之后用稀释液来定容； 步骤4 :取一定量定容后的提取液，经过有机滤膜后，放入进样瓶中，HPLC上机检测。
2.根据权利要求1所述的提取液为碱性有机化合物，其中氨水比例以5%-30%为佳(本案以20%为例，其具体比例为氨水甲醇水=20 70 10)。
3.根据权利要求1所述的振荡方式为机械振荡(如水平振荡、旋转振荡、倾斜式振荡等
4.根据权利要求1所述的吹干方式至少有三种(如氮吹、旋转蒸发、马弗炉等)。
5.根据权利要求1所述的稀释液为缓冲有机溶剂(pH范围为3-5)，本案以15%乙腈溶液的盐缓冲溶液(pH为3. 5)为例。
全文摘要
本文涉及一种用于土壤、肥料中三聚氰胺测定前处理的提取方法，该方法通过对提取方式、提取液组成、稀释液组成能多个方面参数的优化，得到了检测肥料、土壤中三聚氰胺的最佳提取条件，以便于更准确、更真实可靠的检测上述样品中三聚氰胺的含量。该方法可以用于同类样品中三聚氰胺检测的前处理提取方法，该方法科学合理，可操作性强，适用性广，通过加标回收以及标准对照，结果令人满意。
文档编号G01N30/06GK103048411SQ201210277118
公开日2013年4月17日 申请日期2012年8月6日 优先权日2012年8月6日
发明者孙明星, 任盼盼, 王亭亭, 赵雨薇, 张继东, 屠虹, 高运川, 沈国清 申请人:上海出入境检验检疫局工业品与原材料检测技术中心, 上海师范大学