苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂含量分析方法
【专利摘要】苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂含量分析方法，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为乙腈，流动相B为pH2.5~pH3.5的庚烷磺酸钠水溶液，流动相A与流动相B的体积比为20:80；采用紫外检测器检测，检测波长280nm。
【专利说明】苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂含量分析方法
【技术领域】:
[0001]本发明涉及偏头痛治疗药物苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，尤其涉及利用反相离子对高效液相色谱法对苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量进行分析。
【背景技术】:
[0002]偏头痛是一种慢性致衰弱疾病，严重影响患者的生活质量。其侵扰总人口数已达5%~ 17%,通常女性比男性高:T 4倍。5-羟色胺I ( 5- HT I)受体激动药是治疗中至重度急性偏头痛发作的一类药物。其中，苯甲酸利扎曲普坦(Rizatriptan benzoate )是由美国Merck公司研发的第2代5- HT受体激动药，该品已于1998年6月29日批准上市。剂型为片剂，规格为5mg、10mg。临床上主要用于治疗急性偏头痛发作，具有起效迅速、疗效确切、用药安全、方便等优点。
[0003]苯甲酸利扎曲普坦尚未被国内外药典收载，目前已经有一些关于其含量分析方法的文献报道，B.Mallikarjuna Rao等采用氰基柱和三元流动相进行分离[J P harm B iomed Anal, 2006, 41( 4): 1146];陈钧等(中国医药工业杂志，2004, 35( 10 ): 613)及闻平等(Chin J N ew D rugs(中国新药杂志)，2005，14( 5 ): 585)开发的高效液相色谱法，不仅可以进行含量测定，而且可用于有关物质的检查，但二者均未对其色谱分离体系进行充分的验证。曹烈臻等(《药物分析杂志》，2011，31 (2)，274页)不仅建立了可同时用于含量及有关物质检测的高效液相离子对色谱法，而且还对其进行了充分的方法学验证，该方法的缺点是梯度洗脱繁琐不易实施。
[0004]在试验中发现采用紫外检测器测定时，苯甲酸有强吸收，干扰活性成分利扎曲普坦的测定。采用反相高效液相色谱法测定苯甲酸利扎曲普坦的含量时，苯甲酸和利扎曲普坦峰不能完全分开，保留时间相近，利扎曲普坦严重拖尾，不能精确测定含量。上述问题辛正洪等在文献《中国新药杂志》2005年第14卷第8期《高效液相色谱法测定苯甲酸利扎曲普坦的含量》也有提及。
【发明内容】
:
[0005]本发明提供了一种新的苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂含量分析方法，可以灵敏、快速、准确的测定苯甲酸利扎曲普坦的含量。实验结果表明，此分析方法的准确度、专属性、线性、精密度、稳定性等方面均满足方法学要求。
[0006]一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是:采用用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为乙腈，流动相B为pH2.5、H3.5的庚烷磺酸钠水溶液，流动相A与流动相B的体积比为20:80 ;采用紫外检测器检测，检测波长280nm。
[0007]所述的一种苯 甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是流动相B为PH3.0的庚烷磺酸钠水溶液。
[0008]所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是流动相B庚烷磺酸钠水溶液的浓度为15?25mmol/L。
[0009]所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是流动相B庚烷磺酸钠水溶液的浓度为20mmol/L。
[0010]所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是流动相B为由磷酸一三乙胺或者醋酸一三乙胺或者磷酸一醋酸一三乙胺组成的缓冲溶液体系。
[0011]所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是流动相B为磷酸一醋酸一三乙胺组成的缓冲溶液体系。
[0012]所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是色谱柱温度为 30°C ?50°C。
[0013]所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是色谱柱温度为 30。。。
[0014]所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为乙腈，流动相B为磷酸一醋酸一三乙胺缓冲体系调节的PH3.0的20mmol/L庚烷磺酸钠水溶液，流动相A与流动相B的体积比为20:80 ;采用紫外检测器检测，检测波长280nm。
[0015]本发明采用酸性环境，加入离子对试剂，苯甲酸、利扎曲普坦可以有效分离。因此可以准确测定利扎曲普坦含量。此方法简单易实施，且经过充分的方法学验证证明，可用于本品含量的测定。并且通过三乙胺的缓冲体系进一步改善了峰形，尤其是使用了缓冲能力更强的磷酸一醋酸一三乙胺的缓冲溶液体系，进一步保证了色谱体系在运行过程中的稳定性。另外离子对色谱体系对物质的保留更强，可以防止在以后稳定性样品可能产生的杂质对主峰干扰。
【专利附图】
【附图说明】:
[0016]图1:实施例1所得液相色谱图
[0017]图2:实施例4所得液相色谱图
[0018]图3:实施例5所得液相色谱图
【具体实施方式】:
[0019]下面将通过实施例对本发明作进一步的描述，这些描述并不是对本
【发明内容】
作进一步的限定。相关技术人员应理解，对本发明的技术特征所作的等同替换，或相应的改进，仍属于本发明的保护范围之内。
[0020]( I)实施例的试验样本:
[0021]供试品:自制5mg规格苯甲酸利扎曲普坦片剂
[0022]对照品:含量为99.5%以上的对照标准品或工作对照品。
[0023](2)实施例中对照品溶液的配制:
[0024]精密称取苯甲酸利扎曲普坦对照品7.27mg,置50ml量瓶中，加流动相溶解定容至刻度，摇匀制得每Iml约含利扎曲普坦0.1mg的对照溶液。
[0025](3)实施例中供试品溶液的配制:
[0026]取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于利扎曲普坦25mg)，置50ml量瓶中，加流动相适量，超声30分钟后加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
[0027](4)实施例的检测步骤:
[0028]按照高效液相色谱法(中国药典2010版二部附录VD)测定，记录色谱图；按外标法以利扎曲普坦峰面积计算，即得利扎曲普坦含量。
[0029]具体实施例:
[0030]实施例1
[0031]高效液相色谱仪:Agilentl200
[0032]检测器:紫外检测器检测波长:280nm
[0033]进样量:20μ I柱温:30°C
[0034]流速:1ml/min色谱柱:Agilent C18, 5 μ m, 4.6 X 250 mm
[0035]分析天平:十万分之一，Sartorius BS21S
[0036]流动相:以乙腈一庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠4.045g，加水适量溶解，加磷酸4ml，加冰醋酸8ml，用三乙胺调节pH值至3.0，加水稀释至1000ml，摇匀)(20:80)为流动
相。
[0037]实施例2
[0038]高效液相色谱仪:Agilentl200
[0039]检测器:紫外检测器检测波长:280nm
[0040]进样量:20μ I柱温:30°C
[0041]流速:1ml/min色谱柱:Agilent C18, 5 μ m, 4.6 X 250 mm
[0042]分析天平:十万分之一，Sartorius BS21S
[0043]流动相:以乙腈一庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠4.045g，加水适量溶解，加磷酸4ml，加冰醋酸4ml，用三乙胺调节pH值至3.0，加水稀释至1000ml，摇匀)(20:80)为流动相。
[0044]实施例3
[0045]高效液相色谱仪:Agilentl200
[0046]检测器:紫外检测器检测波长:280nm
[0047]进样量:20μ I柱温:30°C
[0048]流速:1ml/min色谱柱:AgilentC18, 5 μ m, 4.6 X 250 mm
[0049]分析天平:十万分之一，Sartorius BS21S
[0050]流动相:以乙腈一庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠4.045g，加水适量溶解，加磷酸4ml，加冰醋酸12.0ml，用三乙胺调节pH值至3.0，加水稀释至1000ml，摇匀)(20:80)为流动相。
[0051]实施例4
[0052]高效液相色谱仪:Agilentl200
[0053]检测器:紫外检测器检测波长:280nm
[0054]进样量:20μ I柱温:30°C
[0055]流速:1ml/min色谱柱:Agilent C18, 5 μ m, 4.6 X 250 mm
[0056]分析天平:十万分之一，Sartorius BS21S[0057]流动相:以乙腈一庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠4.045g，加水适量溶解，加磷酸4ml，加冰醋酸8ml，用三乙胺调节pH值至3.5，加水稀释至1000ml，摇匀)(20:80)为流动相。
[0058]实施例5
[0059]高效液相色谱仪:Agilentl200
[0060]检测器:紫外检测器检测波长:280nm
[0061]进样量:20μ1柱温:30°C
[0062]流速:1ml/min色谱柱:Agilent C18, 5 μ m, 4.6 X 250 mm
[0063]分析天平:十万分之一，Sartorius BS21S
[0064]流动相:以乙腈一庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠4.045g，加水适量溶解，加磷酸4ml，加冰醋酸8ml，用三乙胺调节pH值至2.5，加水稀释至1000ml，摇匀)(20:80)为流动相。
[0065]实施例6
[0066]高效液相色谱仪:Agilentl200
[0067]检测器:紫外检测器检测波长:280nm`[0068]进样量:20μ I柱温:30°C
[0069]流速:1ml/min色谱柱:Agilent C18, 5 μ m, 4.6 X 250 mm
[0070]分析天平:十万分之一，Sartorius BS21S
[0071]流动相:以乙腈一庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠3.034g，加水适量溶解，加磷酸4ml，加冰醋酸8ml，用三乙胺调节pH值至3.0，加水稀释至1000ml，摇匀)(20:80)为流动相。
[0072]实施例7
[0073]高效液相色谱仪:Agilentl200
[0074]检测器:紫外检测器检测波长:280nm
[0075]进样量:20μ I柱温:30°C
[0076]流速:1ml/min色谱柱:Agilent C18, 5 μ m, 4.6 X 250 mm
[0077]分析天平:十万分之一，Sartorius BS21S
[0078]流动相:以乙腈一庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠5.056g，加水适量溶解，加磷酸4ml，加冰醋酸8ml，用三乙胺调节pH值至3.0，加水稀释至1000ml，摇匀)(20:80)为流动相。
[0079]实施例8
[0080]高效液相色谱仪:Agilentl200
[0081]检测器:紫外检测器检测波长:280nm
[0082]进样量:20μ I柱温:30°C
[0083]流速:1.5ml/min色谱柱:Agilent C18, 5 μ m, 4.6 X 250 mm
[0084]分析天平:十万分之一，Sartorius BS21S
[0085]流动相:以乙腈一庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠4.045g，加水适量溶解，加磷酸4ml，加冰醋酸8ml，用三乙胺调节pH值至3.0，加水稀释至1000ml，摇匀)(20:80)为流动相。[0086]实施例9
[0087]高效液相色谱仪:Agilentl200
[0088]检测器:紫外检测器检测波长:280nm
[0089]进样量:20μ I柱温:40°C
[0090]流速:1ml/min色谱柱:Agilent C18, 5 μ m, 4.6 X 250 mm
[0091]分析天平:十万分之一，Sartorius BS21S
[0092]流动相:以乙腈一庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠4.045g，加水适量溶解，加磷酸4ml，加冰醋酸8ml，用三乙胺调节pH值至3.0，加水稀释至1000ml，摇匀)(20:80)为流动相。
[0093]实施例10
[0094]高效液相色谱仪:Agilentl200
[0095]检测器:紫外检测器检测波长:280nm
[0096]进样量:20μ I柱温:50°C
[0097]流速:1ml/min色谱柱:Agilent C18, 5 μ m, 4.6 X 250 mm
[0098]分析天平:十万分 之一，Sartorius BS21S
[0099]流动相:以乙腈一庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠4.045g，加水适量溶解，加磷酸4ml，加冰醋酸8ml，用三乙胺调节pH值至3.0，加水稀释至1000ml，摇匀)(20:80)为流动相。
[0100]实施例f 10结果如下:
[0101]
【权利要求】
1.一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是:采用用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为乙腈，流动相B为pH2.5、H3.5的庚烷磺酸钠水溶液，流动相A与流动相B的体积比为20:80 ;采用紫外检测器检测，检测波长280nm。
2.如权利要求1所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是流动相B为pH3.0的庚烷磺酸钠水溶液。
3.如权利要求2所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是流动相B庚烷磺酸钠水溶液的浓度为15~25mmol/L。
4.如权利要求3所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是流动相B庚烷磺酸钠水溶液的浓度为20mmol/L。
5.如权利要求1-4任一所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是流动相B为由磷酸一二乙胺或者醋酸一二乙胺或者磷酸一醋酸一二乙胺组成的缓冲溶液体系。
6.如权利要求5所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是流动相B为磷酸一醋酸一三乙胺组成的缓冲溶液体系。
7.如权利要求1-4任一所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是色谱柱温度为30°C~50°C。
8.如权利要求5所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是色谱柱温度为30°C~50°C。
9.如权利要求7所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是色谱柱温度为30°C。
10.如权利要求1所述的一种苯甲酸利扎曲普坦原料和片剂的含量分析方法，其特征是采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为乙腈，流动相B为磷酸一醋酸一三乙胺缓冲体系调节的pH3.0的20mmol/L庚烷磺酸钠水溶液，流动相A与流动相B的体积比为20:80 ;采用紫外检测器检测，检测波长280nm。
【文档编号】G01N30/02GK103869006SQ201210543818
【公开日】2014年6月18日 申请日期:2012年12月13日 优先权日:2012年12月13日
【发明者】郭志强, 李静 申请人:天津金耀集团有限公司