专利名称：平消片检验方法
技术领域：
本发明涉及一种药品的检验方法，具体是一种平消片检验方法。
背景技术：
现有平消片检验方法，虽然对平消片有比较成熟的检验技术，但其检验的精度仍有待提闻的余地。
发明内容
本发明的目的是提供一种更精确的检验平消片的方法。本发明是在现有的平消片检验方法的基础上所进行的研究，做出了一种新的、t匕现有方法提高了的检验方法。本发明包括平消片鉴定方法和马钱子、麸炒枳壳含量测定。本发明检验增加了平消片中五灵脂薄层色谱鉴别项及枳壳的含量测定项，作为控制平消片的质量依据。五灵脂薄层色谱鉴别项对专属性、耐用性方法学验证要求的变动因素无明显影响，方法灵敏度高，重现性好，操作方法简便，斑点清晰，分离效果好，经阴性对照试验，阴性样品无干扰。枳壳的含量测定项对准确度、精密度、专属性、范围、耐用性、含量限度方法学验证要求的因素试验表明方法精密度好，灵敏度高，线性、范围及回收率均符合测定要求，且阴性对照溶液对测定无干扰。`
具体实施例方式本发明平消片检验方法包括平消片鉴定方法和马钱子、麸炒枳壳含量测定。一、本发明平消片鉴定方法为:(I)取平消片置显微镜下观察:单细胞非腺毛形似纤维，多碎断，基部膨大似石细胞，木化(马钱子粉)；作为下述各步骤使用。(2)取平消片20片，除去包衣，研细，取4g，加三氯甲烷-乙醇(体积比10: I),混合液IOml与浓氨(质量浓度25% -28% ) 0.5ml，密塞，振摇5分钟，放置2小时，滤过，滤液作为供试品溶液；另取马钱子对照药材lg，加三氯甲烷-乙醇(体积比10: I)混合液IOml与浓氨(质量浓度25% -28% )试液0.5ml，密塞，振摇5分钟，放置2小时，滤过，滤液作为对照药材溶液；再取士的宁对照品、马钱子碱对照品，加三氯甲烷制成每Iml各含Img的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各5 10 iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液(体积比4: 5: 0.6: 0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(3)取平消片10片，除去包衣，研细，取2g，加甲醇20ml，加热至沸腾，回流2小时，滤过，滤液作为供试品溶液。另取枳壳对照药材lg，加甲醇20ml，加热至沸腾，回流2小时，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各6 yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水(体积比10: 2: 3)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4)取平消片20片，除去包衣，研细，加石油醚(质量浓度30 60°C )50ml，超声处理20分钟，滤过，滤渣挥干，加乙醇50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取五灵脂对照药材lg，加石油醚(30 600C ) 50ml，超声处理20分钟,滤过,滤渣挥干,加乙醇50ml，超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，取上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5 yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(20: 4)为展开剂，展至12cm，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点。二、马钱子含量，照高效液相色谱法(中国药典附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值至2.8)和乙腈(79: 21)为流动相(200-2000ml);检测波长为254nm。理论板数按士的宁峰计算应不低于5000。
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对照品溶液的制备:取士的宁对照品7.5mg，精密称定，加三氯甲烷制成每Iml含
0.3mg 士的宁的溶液。精密量取2ml，置IOml量瓶中，加甲醇稀释至10ml，摇匀，即得(每Iml 含士的宁 60 ii g)。供试品溶液的制备:取平消片20片，除去包衣，精密称定3g，研细，置具塞锥型瓶中，加入三氯甲烷20ml、浓氨试液1ml，加热至沸腾，回流2小时,放冷,再称定重量,用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，用铺有少量无水硫酸钠的滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。测定法:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测
定，即得。本品每片含马钱子粉以士的宁(C21H22N202)计，应为0.25 0.35mg。三、麸炒枳壳含量，照高效液相色谱法(中国药典附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(20: 80)(用磷酸调节pH值至3)为流动相；检测波长为283nm。理论板数按柚皮苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备:取等量的柚皮苷、新橙皮苷对照品，加甲醇制成每Iml含柚皮苷、新橙皮苷共80 u g的混合溶液，即得。
供试品溶液的制备:取平消片20片，除去包衣，研细，取0.25g，精密称定，置具塞锥型瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1.5小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测
定，即得。本品每片含麸炒枳壳以柚皮苷(C27H32014)计，不得少于0.80mg ；以新橙皮苷(C 28H34015)计，不得少于 0.60mg。
权利要求
1.一种平消片鉴定方法，步骤为: (1)取平消片置显微镜下观察:单细胞非腺毛形似纤维，多碎断，基部膨大似石细胞，马钱子粉木化；作为下述各步骤使用； (2)取平消片，除去包衣，研细，加三氯甲烷-乙醇，混合液与浓氨试液密塞，振摇，放置后滤过，滤液作为供试品溶液； 另取马钱子对照药材，加三氯甲烷-乙醇混合液与浓氨试液，密塞，振摇，放置后滤过，滤液作为对照药材溶液； 再取士的宁对照品、马钱子碱对照品，加三氯甲烷制成每混合溶液，作为对照品溶液； 吸取上述三种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (3)取平消片，除去包衣，研细，加甲醇，加热至沸腾，回流，滤过，滤液作为供试品溶液； 另取枳壳对照药材，加甲醇，加热至沸腾，回流，滤过，滤液作为对照药材溶液； 吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (4)取平消片除去包衣，研细，加石油醚，超声处理，滤过，滤渣挥干，加乙醇，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取五灵脂对照药材，加石油醚，超声处理，滤 过，滤渣挥干，加乙醇，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯使溶解，取上清液作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点。
2.根据权利要求1所述的平消片鉴定方法，在步骤(2)中:取平消片20片，除去包衣，研细，取4g，加三氯甲烷-乙醇(体积比10: I)，混合液IOml与浓氨(质量浓度25% -28% )试液0.5ml，密塞，振摇5分钟，放置2小时，滤过，滤液作为供试品溶液； 另取马钱子对照药材lg，加三氯甲烷-乙醇(体积比10: I)混合液IOml与浓氨(质量浓度25%-28%)试液0.5ml，密塞，振摇5分钟，放置2小时，滤过，滤液作为对照药材溶液； 再取士的宁对照品、马钱子碱对照品，加三氯甲烷制成每Iml各含Img的混合溶液，作为对照品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 10 yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯丙酮-乙醇-浓氨试液(体积比4: 5: 0.6: 0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.根据权利要求1所述的平消片鉴定方法，在步骤(3)中:取平消片10片，除去包衣，研细，取2g,加甲醇20ml，加热至沸腾，回流2小时，滤过，滤液作为供试品溶液； 另取枳壳对照药材lg，加甲醇20ml，加热至沸腾，回流2小时，滤过，滤液作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6 u 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸水(体积比10: 2: 3)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的突光斑点。
4.根据权利要求1所述的平消片鉴定方法，在步骤(4)中:取平消片20片，除去包衣，研细，加石油醚(质量浓度30 60°C ) 50ml，超声处理20分钟，滤过，滤渣挥干，加乙醇50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取五灵脂对照药材lg，加石油醚(30 60°C ) 50ml，超声处理20分钟，滤过，滤渣挥干，加乙醇50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，取上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5 yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(20: 4)为展开剂，展至12cm，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
5.一种平消片中马钱子含量测定方法，其步骤是: 色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.0lmol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值至2.8)和乙腈(79: 21)为流动相(200-2000ml);检测波长为254nm ;理论板数按士的宁峰计算应不低于5000 ； 对照品溶液的制备:取士 的宁对照品7.5mg,精密称定,加三氯甲烧制成每Iml含0.3mg士的宁的溶液。精密量取2ml，置IOml量瓶中，加甲醇稀释至10ml，摇勻，即得(每Iml含士的宁 60 V- g)； 供试品溶液的制备:取平消片20片，除去包衣，精密称定3g，研细，置具塞锥型瓶中，力口入三氯甲烷20ml、浓氨试液Iml，加热至沸腾，回流2小时，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，用铺有少量无水硫酸钠的滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得； 测定法:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 yl，注入液相色谱仪，测定，即得; 本品每片含马钱子粉以士的宁(C21H22N202)计，应为0.25 0.35mg。
6.一种平消片中麸炒枳壳含量测定方法，其步骤是: 色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(20: 80)(用磷酸调节pH值至3)为流动相；检测波长为283nm。理论板数按柚皮苷峰计算应不低于3000 ； 对照品溶液的制备:取等量的柚皮苷、新橙皮苷对照品，加甲醇制成每Iml含柚皮苷、新橙皮苷共80 u g的混合溶液，即得； 供试品溶液的制备:取平消片20片，除去包衣，研细，取0.25g，精密称定，置具塞锥型瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1.5小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 yl，注入液相色谱仪，测定，即得;本品每片含麸炒积壳以柚皮苷(C27H32014)计，不得少于0.80mg；以新橙皮苷(C28H34015)计，不得少于0.60mg。
全文摘要
本发明涉及一种药品平消片检验方法。它是在现有的平消片检验方法的基础上所进行的研究，本发明包括平消片鉴定方法和马钱子、麸炒枳壳含量测定。鉴定步骤为取平消片，加试，滤液作为供试品溶液；另取马钱子对照药材滤液作为对照药材溶液；再取士的宁混合溶液，作为对照品溶液。本发明方法灵敏度高，重现性好，操作方法简便，斑点清晰，分离效果好，经阴性对照试验，阴性样品无干扰。
文档编号G01N21/64GK103245649SQ201310172208
公开日2013年8月14日 申请日期2013年5月13日 优先权日2013年5月13日
发明者方祎 申请人:宁夏金太阳药业有限公司