一种菠菜中草酸含量的测定方法
【专利摘要】本发明公开了一种菠菜中草酸含量的测定方法，包含有如下步骤:A:将新鲜的菠菜样品洗净晾干，取200g剪碎混匀的样品，加入150ml水，放入组织匀浆机中匀浆，用50ml水冲洗，冲洗液并入匀浆液混匀备用；B:称取2.0g匀浆液进行菠菜草酸含量的测定，总草酸含量的测定是加入一定量的HC1溶液浸提20min，然后用水定容至100ml；水溶性草酸的测定是直接加水至50ml左右，水浴浸提，冷却后定容至100ml;将上述定容后的溶液在转速为5000-15000r/min，离心时间为5-20min的条件下离心，澄清，稀释5?20倍，过滤膜后用色谱仪测定。本方法具有操作简便、干扰小、灵敏、回收率高等特点，可作为蔬菜不同形态草酸含量测定的分析方法。
【专利说明】一种菠菜中草酸含量的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种草酸含量测定方法，具体为一种菠菜中草酸含量的测定方法。
【背景技术】
[0002] 草酸是植物体内普遍存在的一种二元羧酸，主要以游离态（草酸钠和草酸钾）和 草酸钙结晶的形式存在，从环境毒理学和食品营养学的角度看，草酸是一种环境毒素和抗 营养因子，长期食用草酸含量高的蔬菜容易引发关节炎、低血钙、膀胱结石和肾结石等疾 病。另一方面，草酸在钝化重金属和增强植物抗逆性等方面起着重要的作用，是植物体内环 境胁迫的响应因子，参与钙离子和pH值调节。利用化学法或仪器分析法可以定量分析测 定植物水溶性草酸和总草酸含量，总草酸和水溶性草酸的差值为难溶性草酸。水溶性草酸 较易被人体吸收，进入体液循环系统，与人类健康关系较为密切，测定总草酸含量可为研究 植物代谢生理提供重要信息。传统的高锰酸钾容量法中总草酸含量的测定使用3ml 6mol/ L HC1浸提，而用离子色谱法测定时，使用高浓度的盐酸浸提，会造成待测液中含有大量的 氯离子，过高的氯离子浓度易引起阴离子柱过载，降低柱效。
【发明内容】
[0003] 本发明提供一种菠菜中草酸含量的测定方法，本方法具有操作简便、干扰小、灵 敏、回收率高等特点，可作为蔬菜不同形态草酸含量测定的分析方法。
[0004] 本发明创造通过以下技术方案实现：一种菠菜中草酸含量的测定方法，包含有如 下步骤： A :将新鲜的菠菜样品洗净晾干，取200g剪碎混匀的样品，加入150ml水，放入组织匀 浆机中匀浆，用50ml水冲洗，冲洗液并入匀浆液混匀备用； B:称取2. 0g匀浆液进行菠菜草酸含量的测定， 总草酸含量的测定是加入一定量的HC1溶液浸提20min，然后用水定容至100ml ; 水溶性草酸的测定是直接加水至50ml左右，水浴浸提，冷却后定容至100ml ; 将上述定容后的溶液在转速为5000-15000r/min，离心时间为5-20min的条件下离 心，澄清，稀释5?20倍，过滤膜后用色谱仪测定。
[0005] 所述色谱条件为：IonPac AS11 阴离子柱（4mmX250mm)，IonPac AG11 保护柱，抑制电流：50mA ;淋洗液：12mmol/L NaOH ; 流速η ;进样量：25μ1。
[0006] 所述转速为10000r/min，离心时间为lOmin。
[0007] 所述滤膜的孔为0· 45 μ m。
[0008] 本发明的有益效果是： 采用IonPac AS11阴离子柱，电导检测器，以12mmol/L NaOH为淋洗液，可有效分离和 定量分析菠菜中的水溶性草酸和总草酸。菠菜草酸的提取测定主要受难溶性草酸的影响， 菠菜中难溶性草酸占总草酸百分比较高，其水溶性草酸随水浴浸提温度的升高而增大，总 草酸含量在此1加入量低于2.〇1111时随!1(：1加入量的增加而增大。采用211110.5111〇1/1!1(：1 浸提总草酸，用沸水浴20min浸提水溶性草酸，适用于各种菠菜样品中草酸的提取测定。采 用该方法对菠菜各品种进行测定，其加标回收率在95. 5%?103. 5%之间。本方法具有操作 简便、干扰小、灵敏、回收率高等特点，可作为蔬菜不同形态草酸含量测定的分析方法。
【具体实施方式】
[0009] 下述结合【具体实施方式】对本发明做进一步描述。
[0010] 实施例1 : (1) 将新鲜的菠菜样品洗净晾干，取200g剪碎混匀的样品，加入150ml水，放入组织 匀浆机中匀浆，用50ml水冲洗，冲洗液并入匀浆液混匀备用； (2) 称取2. 0g匀浆液进行菠菜草酸含量的测定，总草酸含量的测定是加入一定量的 HC1溶液浸提20min，然后用水定容至100ml;水溶性草酸的测定是直接加水至50ml左右， 水浴浸提，冷却后定容至l〇〇ml ;将上述定容后的溶液在转速为5000r/min，离心时间为 20min的条件下离心，澄清，稀释20倍，过0.45μπι滤膜后用色谱仪在色谱条件为：IonPac AS11阴离子柱（4_X250mm)，IonPac AG11保护柱，抑制电流：50mA;淋洗液：12mmol/L NaOH;流速：1.0ml/mi η ;进样量：25μ1，测定。
[0011] 实施例2 (1) 将新鲜的菠菜样品洗净晾干，取200g剪碎混匀的样品，加入150ml水，放入组织 匀浆机中匀浆，用50ml水冲洗，冲洗液并入匀浆液混匀备用； (2) 称取2. 0g匀浆液进行菠菜草酸含量的测定，总草酸含量的测定是加入一定量的 HC1溶液浸提20min，然后用水定容至100ml;水溶性草酸的测定是直接加水至50ml左右， 水浴浸提，冷却后定容至l〇〇ml ;将上述定容后的溶液在转速为10000r/min，离心时间为 10min的条件下离心，澄清，稀释5倍，过0. 45 μ m滤膜后用色谱仪在色谱条件为：IonPac AS11阴离子柱（4_X250mm)，IonPac AG11保护柱，抑制电流：50mA;淋洗液：12mmol/L NaOH;流速：1.0ml/mi η ;进样量：25μ1，测定。
[0012] 实施例3 (1) 将新鲜的菠菜样品洗净晾干，取200g剪碎混匀的样品，加入150ml水，放入组织 匀浆机中匀浆，用50ml水冲洗，冲洗液并入匀浆液混匀备用； (2) 称取2. 0g匀浆液进行菠菜草酸含量的测定，总草酸含量的测定是加入一定量的 HC1溶液浸提20min，然后用水定容至100ml;水溶性草酸的测定是直接加水至50ml左右， 水浴浸提，冷却后定容至l〇〇ml ;将上述定容后的溶液在转速为15000r/min，离心时间为 5min的条件下离心，澄清，稀释10倍，过0. 45 μ m滤膜后用色谱仪在色谱条件为：IonPac AS11阴离子柱（4_X250mm)，IonPac AG11保护柱，抑制电流：50mA;淋洗液：12mmol/L NaOH;流速：1.0ml/mi η ;进样量：25μ1，测定。
【权利要求】
1. 一种菠菜中草酸含量的测定方法，其特征在于：包含有如下步骤： A :将新鲜的菠菜样品洗净晾干，取200g剪碎混匀的样品，加入150ml水，放入组织匀 浆机中匀浆，用50ml水冲洗，冲洗液并入匀浆液混匀备用； B:称取2. 0g匀浆液进行菠菜草酸含量的测定， 总草酸含量的测定是加入一定量的HC1溶液浸提20min，然后用水定容至100ml ; 水溶性草酸的测定是直接加水至50ml左右，水浴浸提，冷却后定容至100ml ; 将上述定容后的溶液在转速为5000-15000r/min，离心时间为5-20min的条件下离 心，澄清，稀释5?20倍，过滤膜后用色谱仪测定。
2. 根据权利要求1所述的一种菠菜中草酸含量的测定方法，其特征在于：所述色谱条 件为：I〇nPac AS11 阴离子柱（4mmX250mm)，IonPac AG11 保护柱，抑制电流：50mA ;淋洗液：12mmol/L NaOH ; 流速：l.〇ml/mi η ;进样量：25μ1。
3. 根据权利要求1所述的一种菠菜中草酸含量的测定方法，其特征在于：所述转速为 10000r/min，离心时间为 lOmin。
4. 根据权利要求1所述的一种菠菜中草酸含量的测定方法，其特征在于：所述滤膜的 孔为 〇· 45 μ m。
【文档编号】G01N30/06GK104215700SQ201310212402
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2013年5月31日 优先权日:2013年5月31日
【发明者】李洪岩 申请人:李洪岩