用于检测食品大肠杆菌的基于二氧化钛纳米线的微流控芯片的制作方法
【专利摘要】用于检测食品大肠杆菌的基于二氧化钛纳米线的微流控芯片，涉及本发明涉及生物【技术领域】，也涉及电子【技术领域】。本发明由插片和固定在所述插片上的纳米线材组成，所述纳米线材为外表面修饰有单克隆抗体的直径为60nm的纳米线。使用时，将此微流控芯片封装在微流体通道内，当两种不同的病源体被两种不同抗体修饰的纳米磁珠分离后共同流经微流体通道（样品在5-15分钟通过微流体通道），这两种病原体将被TiO2纳米线材阵列上固定的不同中抗体所捕获。
【专利说明】用于检测食品大肠杆菌的基于二氧化铁纳米线的微流控芯 片
【技术领域】
[0001] 本发明涉及本发明涉及生物【技术领域】，也涉及电子【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 纳米材料和生物芯片技术相结合，通过固定有能选择性结合祀分子的生物探针的 纳米传感器称为纳米生物传感器。由于纳米技术和生物技术的结合，实现了在分子水平内 检测更加高效、简便，并可实现对生物分子进行识别、组装，W及生物材料加工。纳米生物传 感器在食品安全、环境监测、疾病诊断等方面有着十分广泛的应用前景。
[0003] 目前，酶联免疫吸附剂测定技术和聚合酶链反应是最常见的快速检测食品中大肠 杆菌含量的方法。然而，ELISA法仍然需要长达6 8小时的时间来完成检测。PCR技术可 W在3 6小时完成检测。随着食品生产和流通速度的加快，食品微生物检测技术也面临 着迅速提高的压力，我们更需要发展快速检测食品中甚至速成食品中低含量细菌的方法或 仪器，实现快速测定。
[0004] 近年来，在世界范围内不断出现了食品的安全事件，如英国"疯牛病"和"口蹄疫" 事件、比利时"二嗯英"事件，国内的苏丹红、吊白块、毒米、毒油、孔雀石绿、瘦肉精等事件， W及由致病微生物及其毒素引起的食物中毒现象大量存在，日益加剧的环境污染和频繁发 生的食品安全事件给人类生命和健康带来了巨大的威胁，并已成为人们关注的热点问题。
【发明内容】
[0005] 本发明目的是提出一种可用于快速检测食品中大肠杆菌的基于二氧化铁纳米线 的微流控芯片。
[0006] 本发明由插片和固定在所述插片上的纳米线材组成，所述纳米线材为外表面修饰 有单克隆抗体的直径为60nm的纳米线。
[0007] 使用时，将此微流控芯片封装在微流体通道内，当两种不同的病源体被两种不同 抗体修饰的纳米磁珠分离后共同流经微流体通道(样品在5-15分钟通过微流体通道)，该两 种病原体将被Ti化纳米线材阵列上固定的不同中抗体所捕获。当病源体被特异性的抗体 所捕获之后，会产生不同的化学信号。由于Ti化纳米线材具有介电性，不同的化学信号会 导致纳米线材会产生不同频率下（1化to 1 MHz)的阻抗。在测量过程中，一个1-10 mV 小振幅的直流电施加在微电极上有助于相应电流的测量。复杂的阻抗值可W通过电压矢量 必6'"；与电流矢量的比值来获得，计算公式如下： Z(ju)=U(jc〇Vl(jc〇)=Zju)+jZju) 其中/=,円，CO是角频率、么（CO)代表复合电极实部、么（CO)代表复合电极虚部。 通过标准样品中阻抗值与大肠细菌数量的比例关系，来确定待测样品中大肠杆菌的数量。
[0008] 本发明利用纳米材料的特殊性能与生物分子的相互作用而制备的纳米生物传感 器具有高效、迅速监测多种细菌病原体及化学物质的优点，将在食品安全、环境监测、疾病 诊断等方面发挥重要作用。
【具体实施方式】
[0009] 1、制备修饰的纳米线材：将直径为60nm的纳米线进行修饰后，利用单克隆技术将 抗体通过共价键附着在修饰后的纳米线表面。
[0010] 例如；利用娃焼偶联剂修饰纳米线材的表面，用于检测抑值及抗生物素蛋白PM浓 度、生物质Ca"浓度。利用生物素连接公.CO"抗体的修饰的纳米线和抗生物素蛋白结合 到纳米线表面检测细菌杞co7i)等，制备出可W捕捉和固定单个细胞的纳米生物传感器。
[0011] 2、制备芯片；将纳米线材固定在插片上。
【权利要求】
1.用于检测食品大肠杆菌的基于二氧化钛纳米线的微流控芯片，由插片和固定在所述 插片上的纳米线材组成，所述纳米线材为外表面修饰有单克隆抗体的直径为60nm的纳米 线。
【文档编号】G01N33/577GK104237516SQ201310231831
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2013年6月13日 优先权日:2013年6月13日
【发明者】沈金明, 董文钧 申请人:江苏康宝电器有限公司