一种24-羟基甘草酸的检测方法
【专利摘要】本发明提供了一种24-羟基甘草酸的检测方法，本发明所建立的反向高效液相色谱梯度洗脱法能快速准确检测24-羟基甘草酸的含量，具有良好的精密度，重现性，可靠性，方法先进简单，能够安全、有效、全面的对24-羟基甘草酸的质量进行控制。
【专利说明】一种24-羟基甘草酸的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药检测【技术领域】，具体涉及一种24-羟基甘草酸的检测方法。
【背景技术】
[0002] 国家药典认定的甘草药材原植物有三种，即甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch·)、胀果甘草（Glycyrrhiza inflata Bat.)和光果甘草（Glycyrrhiza glabra L.) 的干燥根及根茎。其中以甘草分布最广，产量最多，质量最好。甘草是我国传统中药材，应 用历史悠久，名扬海内外。甘草酸是甘草中最主要的活性成分，甘草酸及其系列产品，对肉 瘤、癌细胞生长有抑制作用，对艾滋病的抑制率更高达90%，有较强的增加人体免疫功能作 用，而且也是很好的食品添加剂和香料基料。近年来，它在医药、化工、食品、日用化工等行 业也得到了广泛应用。
[0003] 本实验室从甘草提取物中分离制备出天然存在的高纯度24-羟基甘草酸，在此基 础上建立该检测方法。在已经公开的相关文献和专利中，还没有与本发明相关或类似的报 道。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种24-羟基甘草酸的含量测定方法，本方法相对简单， 具良好的精密度，重现性和稳定性，适用于24-羟基甘草酸的含量。
[0005] 本发明提供一种24-羟基甘草酸的高效液相检测方法，该方法包括以下步骤：
[0006] (1)对照品溶液的制备：称取24-羟基甘草酸对照品适量，加适量稀乙醇溶解制成 对照品溶液。
[0007] (2)供试品溶液的制备：称取24-羟基甘草酸样品适量，加入适量稀乙醇，超声溶 解5?20,放冷，即得。
[0008] (3)色谱条件及系统适应性：室温，相对湿度25?40%;以十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂，色谱柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);以乙腈溶液为流动相A，以0. Olmol/L磷酸水溶液 为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱，流速：0. 8?1. 2ml/min，柱温25?40°C，检测 波长250?254nm。
[0009] 流动相洗脱梯度
[0010]
【权利要求】
1. 一种24-羟基甘草酸的检测方法，其特征在于，该方法具体按照以下步骤进行： (1) 对照品溶液的制备： 精密称取24-羟基甘草酸对照品，加适量稀乙醇溶解制成每lml含0. 5mg24-羟基甘草 酸的对照品溶液。 (2) 供试品溶液的制备： 精密称取24-羟基甘草酸样品适量，加入稀乙醇超声溶解10分钟，放冷，再用稀乙醇定 容制成lmg/ml的溶液，即得供试品溶液。 (3) 色谱条件及系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱 (4.6mmX250mm，5ym);流动相梯度为 在0. 01分钟，流速1. Oml/min，乙腈和0. 01mol/L磷酸水溶液体积比为32 : 68 ; 在0. 01-10分钟，流速1. Oml/min，乙腈和0. 01mol/L磷酸水溶液体积比为38 : 62 ; 在10-20分钟，流速1. 0ml/min，乙腈和0. 01mol/L磷酸水溶液体积比为42 : 58 ; 在20-35分钟，流速1. 0ml/min，乙腈和0. 01mol/L磷酸水溶液体积比为50 : 50。 室温20°C，柱温30°C ;检测波长252nm，进样量20 μ 1。 (4) 测定法： 将按照步骤（1)和（2)制得的对照品溶液和供试品溶液在步骤（3)的色谱检测条件下 注入高效液相色谱仪进行检测，记录色谱图，然后计算样品中24-羟基甘草酸的含量。
【文档编号】G01N30/89GK104251899SQ201310274411
【公开日】2014年12月31日 申请日期:2013年6月28日 优先权日:2013年6月28日
【发明者】易铭, 杨永安, 汤文建, 朱海亮 申请人:江苏天晟药业有限公司