测定蜂蜜中过氧化氢酶活性的新方法

文档序号:6187235阅读:499来源:国知局
测定蜂蜜中过氧化氢酶活性的新方法
【专利摘要】本发明公开了一种测定蜂蜜中过氧化氢酶活性的新方法,准确称取13g?Na2HPO4·12H2O和3g?NaH2PO4·2H2O,用去离子水溶解并稀释至2000mL,配制成pH7.0的磷酸缓冲液;将透析袋置于2%碳酸氢钠溶液和pH8.0,1mol/L?EDTA的混合液中煮沸10-15min,存放于4℃冰箱中备用;准确称取5.0g蜂蜜样品于烧杯中,加入8mL磷酸缓冲液溶解,将溶解液移入透析袋中。然后将透析袋置于磷酸缓冲液中,4℃下透析22h。本发明的有益效果为:对蜂蜜中过氧化氢酶活性的测定方法进行了改进,对温育时间、邻联茴香胺溶液和过氧化物酶液的添加量进行优化。
【专利说明】测定蜂蜜中过氧化氢酶活性的新方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物化学【技术领域】,具体是一种测定蜂蜜中过氧化氢酶活性的新方法。
【背景技术】
[0002]蜂蜜是蜜蜂从显花植物的花中采集花蜜、分泌物或蜜露,经蜜蜂充分酿造而贮存在巢脾里的天然甜物质。蜂蜜是一种高度复杂的糖类饱和溶液,其中糖类约占3 / 4。此夕卜,蜂蜜中还含有蛋白质、氨基酸、维生素、微量元素、有机酸、色素、芳香物质、胶质物、蜂花粉、激素等。蜂蜜既是一种保健食品,也是一味传统中药,具有多种生物活性。药理研究表明,蜂蜜除具有抑菌、抗氧化、抗炎、抗诱变、抗肿瘤等生物活性外,还能够调节肠胃功能紊舌L、治疗胃炎,促进烧伤和烫伤组织愈合,增强机体免疫,治疗消化性溃疡,降低心血管疾病发病风险等功效。

【发明内容】

[0003]本发明的目的是提供一种测定蜂蜜中过氧化氢酶活性的新方法。
[0004]本发明的技术方案是这样实现的:测定蜂蜜中过氧化氢酶活性的新方法,其特征在于,准确称取13g Na2HPO4.12H20和3g NaH2PO4.2Η20,用去离子水溶解并稀释至2000mL,配制成pH7.0的磷酸缓冲液;将透析袋置于2%碳酸氢钠溶液和pH8.0,lmol / L EDTA的混合液中煮沸10_15min,用蒸馏水彻底清洗透析袋,然后将其置于pH8.0的溶液中再煮沸,冷却,用蒸馏水洗净,存放于4°C冰箱中备用;准确称取5.0g蜂蜜样品于烧杯中,加入SmL磷酸缓冲液溶解,将溶解液移入透析袋中。然后将透析袋置于磷酸缓冲液中,4°C下透析22h ;检测液,然后置于25°C水浴中反应5min,待检测液颜色稳定后,向其中加入100μ L,6mol /L HCl终止反应,振荡混合均匀后,以磷酸缓冲液为参比液,测定350nm波长处的吸光度,样品组的吸光度为As。
[0005]本发明的有益效果为:对蜂蜜中过氧化氢酶活性的测定方法进行了改进,对温育时间、邻联茴香胺溶液和过氧化物酶液的添加量进行优化。
【具体实施方式】
[0006]下面结合具体实施例对本发明作进一步解释说明。
[0007]测定蜂蜜中过氧化氢酶活性的新方法,准确称取13g Na2HPO4.12H20和3gNaH2PO4.2H20,用去离子水溶解并稀释至2000mL,配制成pH7.0的磷酸缓冲液;将透析袋置于2%碳酸氢钠溶液和pH8.0,lmol / L EDTA的混合液中煮沸10_15min,用蒸馏水彻底清洗透析袋,然后将其置于PH8.0的溶液中再煮沸,冷却,用蒸馏水洗净,存放于4°C冰箱中备用;准确称取5.0g蜂蜜样品于烧杯中,加入SmL磷酸缓冲液溶解,将溶解液移入透析袋中。然后将透析袋置于磷酸缓冲液中,4°C下透析22h ;检测液,然后置于25°C水浴中反应5min,待检测液颜色稳定后,向其中加入100 μ L,6mol / L HCl终止反应,振汤混合均勾后,以憐酸缓冲液为参比液,测定350nm波长处的吸光度,样品组的吸光度为As。
[0008]以上所述,仅为本发明较佳的【具体实施方式】,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.测定蜂蜜中过氧化氢酶活性的新方法,其特征在于,准确称取13g Na2HPO4* 12H20和3g NaH2PO4.2Η20,用去离子水溶解并稀释至2000mL,配制成pH7.0的磷酸缓冲液;将透析袋置于2%碳酸氢钠溶液和pH8.0,lmol / L EDTA的混合液中煮沸10_15min,用蒸馏水彻底清洗透析袋,然后将其置于PH8.0的溶液中再煮沸,冷却,用蒸馏水洗净,存放于4°C冰箱中备用;准确称取5.0g蜂蜜样品于烧杯中,加入SmL磷酸缓冲液溶解,将溶解液移入透析袋中。然后将透析袋置于磷酸缓冲液中,4°C下透析22h;检测液,然后置于25°C水浴中反应5min,待检测液颜色稳定后,向其中加入IOOu L,6mol / L HCl终止反应,振汤混合均勾后,以憐酸缓冲液为参比液,测定350nm波长处的吸光度,样品组的吸光度为As。
【文档编号】G01N21/78GK103743724SQ201310658728
【公开日】2014年4月23日 申请日期:2013年11月30日 优先权日:2013年11月30日
【发明者】万洪转 申请人:万洪转
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