一种人热休克蛋白(Hsp90α)的检测试纸及其制备方法

文档序号:6190150阅读:340来源:国知局
一种人热休克蛋白(Hsp90α)的检测试纸及其制备方法
【专利摘要】本发明公开一种免疫层析试纸,具体涉及一种检测人热休克蛋白(Hsp90α)的免疫层析试纸及其制备方法。所述免疫层析试纸上设置有检测线,检测线由抗体包被形成,所述抗体选白鼠抗人Hsp90α单克隆抗体;质控线为由羊抗鼠IgG多克隆抗体包被形成;将鼠抗人Hsp90α单克隆抗体和胶体金制备成胶体金结合垫。Hsp90α检测免疫层析试纸的制备方法,步骤如下:A、将各抗体检测线工作液和质控线工作液在硝酸纤维素膜上进行包被,所得硝酸纤维素膜在36-38℃下干燥8-12小时得层析膜;B、将鼠抗人Hsp90α单克隆抗体和胶体金制备成胶体金结合垫;C、将层析膜和胶体金结合垫按照样品垫、胶体金结合垫、层析膜、吸水垫的顺序依次粘贴在胶板上制备得所述检测Hsp90α免疫层析试纸。
【专利说明】—种人热休克蛋白(Hsp90a)的检测试纸及其制备方法【技术领域】
[0001]本发明公开一种免疫层析试纸,具体涉及一种检测人热休克蛋白(Hsp90a)的免疫层析试纸及其制备方法。
【背景技术】
[0002]免疫层析试纸是一种利用层析原理将待检测液中的目标检测分子或成分等在试纸上流动至检测线(T线)和质控线(C线),当检测线发生颜色变化则说明检测结果为阳性,否则为阴性,当质控线发生颜色变化时,则说明检测结果有效,否则无效。
[0003]免疫层析试纸在检测或诊断某些疾病时具有非常便利的优点,因此其已被充分运用到多种疾病或症状的检测或诊断过程中。一般情况下,免疫层析试纸包含有以下几种结构:样品垫、结合垫、层析膜、吸水垫、支撑垫,所述样品垫、胶体金结合垫、层析膜利吸水垫依次粘贴在支撑垫上;所述层析膜上依次设置有检测线和质控线;其工作原理为:将待测液滴加至样品垫上,待测液利用层析原理流向结合垫,待测液中待测物与结合垫中的胶体金结合物结合,并与其共同依次流向层析膜上的检测线和质控线;当待测液中含有目标检测分子,则目标检测分子、胶体金结合物会与检测线内包含的抗体成分结合从而形成免疫复合物,同时检测线颜色发生变化;当待测液流至质控线时,质控线内包含的抗体成分会与胶体金结合物结合,从而质控线颜色发生变化。
[0004]人热休克蛋白90a,即Hsp90a,是热休克蛋白家族中的重要成员。1989年国外专家首次报道了 Hsp90a 的基因序列,确认了该蛋白的身份。1992年外国科学家发现,Hsp90 a能被肿瘤细胞分泌到细胞外,但其分泌调控机制在此后很长时间里并不清楚。
[0005]Hsp90 a这一全新肿瘤标志物的目前已得到确认,同时揭开了细胞外Hsp90 a与细胞内Hsp90a的分子差异,进一步说明了分泌型Hsp90 a能促进肿瘤侵袭及转移,且其在血液中的含量与肿瘤恶性程度正相关。这些发现证明了血液中Hsp90a作为肿瘤标志物的良好潜质。Hsp90 a肿瘤标志物具有广谱的特性,可用于肝癌、乳腺癌、结直肠癌等多个瘤种的临床检测,可实时准确地反映治疗效果。Hsp90 a作为肿瘤标志物,检查更方便快捷,成本也人人降低。只需取一滴血,即可通过这种试剂盒检测血浆中Hsp90 a的含量。有些肿瘤患者尽管并未表现出相关症状,但其Hsp90 a含量可能已经升高,如果先检测Hsp90a在血液中水平,再进行深入检查,就可能被确诊为肿瘤,这能使患者早日接受治疗,从而人人提高治愈率或延长生存期。
[0006]此外,患者血浆中Hsp90 a含量的高低与病情变化有较好的对应性,因此可实时、较准确地反映治疗效果,为医生制定和及时调整治疗方案提供参考。

【发明内容】

[0007]有鉴于此,本发明提供一种检测Hsp90 a的免疫层析试纸及其制备方法,具有采样容易、操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测等优点。
[0008]为解决以上技术问题,本发明的技术方案是采用一种Hsp90 a检测免疫层析试纸,该免疫层析试纸包括有样品垫、结合垫、层析膜、吸水垫和支撑垫;所述样品垫、胶体金结合垫、层析膜、吸水垫依次按顺序与支撑垫连接;其特征在于:层析膜上依次设置有检测区和质控区,所述检测区靠近胶体金结合垫一端,质控区靠近吸水垫一端;所述检测区内设置有检测线,所述检测线为由鼠抗人Hsp90 a单克隆抗体包被形成;所述质控区内设置有质控线,所述质控线为由羊抗鼠IgG多克隆抗体包被形成;所述胶体金结合垫:将鼠抗人Hsp90 a单克隆抗体和胶体金制备成胶体金结合垫。
[0009]所述检测线以及质控线中各抗体的工作液浓度为鼠抗人Hsp90 a单克隆抗体
3.0-2.5mg/mL、羊抗鼠 IgG 多克隆抗体 1.0-2.0mg / mL。
[0010]所述检测线以及质控线中各抗体的工作液浓度为鼠抗人Hsp90 a单克隆抗体
2.0mg/mL、羊抗鼠IgG多克隆抗体3.0mg / mL。
[0011]所述Hsp90 a检测免疫层析试纸的制备步骤如下:
[0012]A、将各抗体检测线工作液和质控线工作液在硝酸纤维素膜上进行包被,所得硝酸纤维素膜在36-38°C下干燥8-12小时得层析膜;
[0013]B、将鼠抗人Hsp90a单克隆抗体和胶体金制备成胶体金结合垫;
[0014]C、将A和B步骤所得的层析膜和胶体金结合垫按照样品垫、胶体金结合垫、层析膜、吸水垫的顺序依次粘贴在胶板上制备得所述检测Hsp90 a免疫层析试纸。
[0015]本发明的有益效果是:一种检测Hsp90a的免疫层析试纸及其制备方法,和传统试剂相比,具有采样容易、操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测减少检测人员的工作量的等优点。
【专利附图】

【附图说明】:
[0016]图lHsp90 a检测试剂盒试纸结构示意图。
[0017]附图符号说明:1:样品垫;2:结合垫;3:层析膜;4:吸水垫;5:检测线⑴;6:质控线(C) ;7:支撑垫。
【具体实施方式】
[0018]实施例:
[0019]A、将各抗体检测线工作液和质控线工作液在硝酸纤维素膜上进行包被,所得硝酸纤维素膜在36-38°C下干燥8-12小时得层析膜;
[0020]B、将鼠抗人Hsp90a单克隆抗体利胶体金制备成胶体金结合垫;
[0021]C、将A和B步骤所得的层析膜和胶体金结合垫按照样品垫、胶体金结合垫、层析膜、吸水垫的顺序依次粘贴在胶板上制备得所述检测Hsp90 a免疫层析试纸。
【权利要求】
1.一种HSp90a检测免疫层析试纸及其制备方法,该免疫层析试纸包括有样品垫、结合垫、层析膜、吸水垫和支撑垫;所述样品垫、胶体金结合垫、层析膜、吸水垫依次按顺序与支撑垫连接;其特征在于:层析膜上依次设置有检测区和质控区,所述检测区靠近胶体金结合垫一端,质控区靠近吸水垫一端;所述检测区内设置有检测线,所述检测线为由鼠抗人Hsp90 α单克隆抗体包被形成;所述质控区内设置有质控线,所述质控线为由羊抗鼠IgG多克隆抗体包被形成;所述胶体金结合垫:将鼠抗人Hsp90a单克隆抗体和胶体金制备成胶体金结合垫。
2.根据权利要求1所述HSp90a检测免疫层析试纸,其特征在于:所述检测线以及质控线中各抗体的工作液浓度为鼠抗人Hsp90a单克隆抗体0.5-3.0mg / mL、羊抗鼠IgG多克隆抗体 2.0-5.0mg / mL。
3.根据权利要求2所述HSp90a检测免疫层析试纸,其特征在于:所述检测线以及质控线中各抗体的工作液浓度为鼠抗人Hsp90 a单克隆抗体2.0mg/mL、羊抗鼠IgG多克隆抗体 3.0mg / mL。
4.一种制备权利要求1所述HSp90a检测免疫层析试纸的制备方法,其特征在于包括有以下各步骤: A、将各抗体检测线工作液和质控线工作液在硝酸纤维素膜上进行包被,所得硝酸纤维素膜在36-38°C下干燥8-12小时得层析膜; B、将鼠抗人Hsp90a单克隆抗体和胶体金制备成胶体金结合垫; C、将A和B步骤所得的层析膜和胶体金结合垫按照样品垫、胶体金结合垫、层析膜、吸水垫的顺序依次粘贴在胶板上制备得所述检测Hsp90 a免疫层析试纸。
【文档编号】G01N33/68GK103713139SQ201310729382
【公开日】2014年4月9日 申请日期:2013年12月14日 优先权日:2013年12月14日
【发明者】凌中鑫 申请人:凌中鑫
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