一种高通量微孔板的制作方法
【专利摘要】本实用新型公开了一种高通量微孔板，微孔板包括多个微孔组，微孔组至少包括第一微孔和第二微孔，微孔组还包括用于连通所述第一微孔和所述第二微孔的气体扩散通道。利用本实用新型提供的高通量微孔板，能够高通量的实现酶抑制剂的筛选，检测灵敏度高，结果准确可靠。
【专利说明】一种高通量微孔板
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种生化检测装置，尤其涉及一种微孔板。
【背景技术】
[0002]微孔板，也常称作多孔样品盘，用于容纳多个(如6，12，24，48，96，384或更多)样品。能够通过放射自显影、液体闪烁计数、发光测量法等多种技术进行检定这些样品。
[0003]多孔微孔板主要用在化学、生物、药学领域中的检测方面，对液体标本进行分析和/或研究。标准微孔板装置通常包括具有多个开放式孔的微孔板和用于对孔进行封闭的可选择闭合装置。通常微孔板一般包括单一的模制结构，该模制结构包括用于容纳按矩形阵列排列的多个开放式孔的刚性框架。微孔板的尺寸多种多样；孔的尺寸大到可以容纳五毫升液体，小到仅能容纳少许液体。此外，微孔板的材料也多种多样，如聚苯乙烯、聚碳酸脂、聚丙稀、特氟乡仑、玻璃、陶资和石英。多种常见的传统微孔板包括开放式孔按8X12矩形阵列排列的96孔板，微孔数量更多的有16X24矩形阵列排列的384孔板和32X48矩形阵列排列的1536孔板。
[0004]在高通量检测过程中，如果能够在反应体系中直接检测目标物质，则这种检测是比较容易实现的，比如反应过后直接用酶标仪检测目标物质，(中国发明专利申请“一种快速筛选、评价抗菌生物活性物质的方法”，申请号:201010154968.1)。如果反应后的目标物质无法直接检测，例如，需要在反应后的反应体系中加入检测试剂，目标物质与检测试剂反应后才能使用仪器进行检测，则这种情况在一定程度上阻碍了高通量检测的进度。技术人员在高通量检测过程中常遇到的一个更大的困难是，生物和/或化学反应和目标物质检测根本无法在同一个系统中进行。造成这种困难的原因，包括检测试剂会干扰生物和/或化学反应的进行，或者，生物和/或化学反应中的其他物质会干扰检测的准确性和灵敏度。这些困难导致了此类反应无法使用高通量的手段进行检测，极大的阻碍了研发的进度。
[0005]特别是涉及到酶催化的反应，由于酶的催化活性，及易受到环境的影响，对酶催化产物的检测一般很难直接在酶催化体系中进行检测。例如，H2S是一个重要的气体信号分子，其具有广泛的生理功能。H2S在人体内主要通过Cystathionine β -synthase (CBS)和Cystathionine y -lyase (CSE)维生素B6依赖酶催化产生。到现在为止，还没有报道对CBS或CSE的高效和选择性的抑制剂的高通量检测方法。如何高通量的检测CBS或CSE催化产生H2S气体，是高通量检测CBS或CSE活力以及开发其活性调节剂的长期存在的一个研究瓶颈。无法高通量的检测CBS或CSE催化产生H2S气体的原因为，如果将用于检测H2S气体的Ellman试剂[5，5’ -二硫代二(2-硝基苯甲酸；DTNB]加入酶催化体系中会干扰酶反应，且反应体系中的其他成分会干扰检测的特异性、准确性和灵敏度。
[0006]因此，本领域的技术人员致力于开发一种适用于高通量检测的，生物和/或化学反应和目标物质检测互不干扰的技术方案，特别是开发出一种能够高通量的筛选酶活性调节剂的技术方案。实用新型内容
[0007]有鉴于现有技术的上述缺陷，本实用新型所要解决的技术问题是如何高通量检测生化反应中的产物，且能够避免生化学反应和目标物质检测的相互干扰。
[0008]为实现上述目的，本实用新型提供了一种高通量微孔板，所述微孔板包括多个微孔组，所述微孔组至少包括第一微孔和第二微孔，所述微孔组还包括用于连通所述第一微孔和所述第二微孔的气体扩散通道。本实用新型中，高通量微孔板是指能够高通量的对待测样品进行检测的微孔板。
[0009]优选地，所述气体扩散通道设置于所述第一微孔和所述第二微孔间的微孔壁上。本实用新型中所述的微孔壁是指微孔板中微孔之间的部分，即，用于隔开不同微孔使每个微孔形成独立空间的框架。
[0010]进一步地，所述第一微孔为反应孔，所述第二微孔为检测孔，所述气体扩散通道允许所述第一微孔中的至少一种反应产物经所述气体扩散通道进入所述第二微孔。
[0011]优选地，所述气体扩散通道为圆形、方形或矩形管状的通道。
[0012]优选地，所述气体扩散通道上边缘距离所述微孔壁顶部的距离小于所述第一微孔深度的三分之二。
[0013]优选地，所述气体扩散通道中设有具有选择性通透作用的膜。具有选择性通透作用的膜是指对不同粒子的通过具有选择性的薄膜，即，一种只给某种或某类分子或粒子扩散进出的薄膜。
[0014]优选地，所述微孔板上的微孔程矩形阵列排列，所述第一微孔和所述第二微孔间隔排列。
[0015]进一步地，为了适用于高通量检测生化反应中产生的气体目标物质，本实用新型提供了一种简单的气体扩散通道设置方式，即，所述气体扩散通道为在所述微孔壁顶部设置的凹槽。这种设置方式，加工简单方便，使用效果也很好。
[0016]优选地，所述凹槽深度小于所述第一微孔深度的三分之二。
[0017]更优选地，所述凹槽深度小于或等于所述第一微孔深度的二分之一。本实用新型中，关于凹槽的设置深度，只要保证第一微孔或第二微孔中的液体不会漫过凹槽进入另一侦牝就能够达到本实用新型的效果。
[0018]进一步地，本实用新型提供的用于高通量检测的微孔板，其中所述微孔组还包括三微孔，所述第三微孔和所述第一微孔之间设有第二通道，所述第二通道中设有具有选择性通透作用的膜。
[0019]优选地，所述第三微孔为物料孔，所述第三微孔中的反应原料经所述第二通道进入所述第一微孔中，反应后产物经所述气体扩散通道进入所述第二微孔。
[0020]本实用新型设置第三微孔的目的在于，在一些实施方式中，能够在第一微孔中培养细胞或微生物，第三微孔可以通过第二通道为这些生命体提供新鲜的营养物质，满足第一微孔中生命体的代谢需要。第一微孔中生命体代谢产生的代谢产物，能够通过气体扩散通道，进入第二微孔中，被定性或定量的检测出来。
[0021]优选地，本实用新型提供的微孔板，还包括密封所述微孔的密封装置，如封板膜。
[0022]技术效果
[0023]利用本实用新型提供的高通量微孔板，高通量的实现酶抑制剂的筛选，检测灵敏度高，结果准确可靠。通过筛选约7200个小分子化合物，最终筛选得到了 9个CBS酶抑制剂，其Κ5(ι〈50μΜ，为高效CBS抑制剂。
[0024]以下将结合附图对本实用新型的构思、具体结构及产生的技术效果作进一步说明，以充分地了解本实用新型的目的、特征和效果。
【专利附图】
【附图说明】
[0025]图1是本实用新型的一个较佳实施例的圆形孔微孔板的立体图
[0026]图2是图1中的A-A剖视图
[0027]图3是设有选择性通透作用的膜的微孔板结构
[0028]图4是本实用新型的具有凹槽通道的微孔板
[0029]图5是图4中A-A剖视图
[0030]图6本实用新型的具有凹槽通道的方形孔微孔板
【具体实施方式】
[0031]实施例1
[0032]如图1和图2所示，本实施例提供了一种用于高通量检测的微孔板，为8X12矩形阵列排列的96孔板，包括具有48个微孔组的基板I ;每个微孔组包括第一微孔11和第二微孔12,第一微孔和第二微孔之间设有气体扩散通道111。微孔为一端开放式孔,开口于基板I的一个表面；
[0033]气体扩散通道111设置于第一微孔11和第二微孔12间的微孔壁110上。
[0034]第一微孔为反应孔，第二微孔为检测孔，在实际使用过程中，气体扩散通道允许第一微孔中的至少一种气体反应产物经所述气体扩散通道进入所述第二微孔。
[0035]气体扩散通道可以设置为圆形、方形或矩形管状的通道。
[0036]气体扩散通道上边缘距离所述微孔壁顶部的距离小于所述第一微孔深度的三分之二。
[0037]实施例2
[0038]本实施例中的微孔板与实施例1中的结构基本一致，不同之处仅为，气体扩散通道111中设有具有选择性通透作用的膜1111。
[0039]实施例3
[0040]为了适用于高通量检测生化反应中产生的气体目标物质，本实施例提供的微孔板，为8X12矩形阵列排列的96孔板，包含48个微孔组，本实施例提供了一种简单的气体扩散通道设置方式，如图4和图5所示，气体扩散通道为在所述微孔壁顶部设置的凹槽1112。本实施例中所述凹槽深度为第一微孔11深度的二分之一。在其他的实施方式中，可以根据具体情况设置凹槽深度，如根据生化反应体系和检测体系中的液体体积选择适宜的凹槽深度，既保证两个体系中的液体不会通过凹槽混合，又能满足第一微孔中反应生成的气体能够及时扩散入第二微孔中。
[0041]实施例4
[0042]本实施例提供了一种方形孔的微孔板，图6所示，除微孔形状与实施3中不同外，微孔板的结构与实施例3中完全相同。[0043]以上详细描述了本实用新型的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本实用新型的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本【技术领域】中技术人员依本实用新型的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。
【权利要求】
1.一种高通量微孔板，其特征在于，所述微孔板包括多个微孔组，所述微孔组至少包括第一微孔和第二微孔，所述微孔组还包括用于连通所述第一微孔和所述第二微孔的气体扩散通道。
2.如权利要求1所述的微孔板，其特征在于，所述气体扩散通道设置于所述第一微孔和所述第二微孔间的微孔壁上。
3.如权利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述第一微孔为反应孔，所述第二微孔为检测孔，所述气体扩散通道允许所述第一微孔中的至少一种气体反应产物经所述气体扩散通道进入所述第二微孔。
4.如权利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述气体扩散通道为圆形、方形或矩形管状的通道。
5.如权利要求4所述的微孔板，其特征在于，所述气体扩散通道上边缘距离所述微孔壁顶部的距离小于所述第一微孔深度的三分之二。
6.如权利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述气体扩散通道中设有具有选择性通透作用的膜。
7.如权利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述气体扩散通道为在所述微孔壁顶部设置的凹槽。
8.如权利要求7所述的微孔板，其特征在于，所述凹槽深度小于所述第一微孔深度的三分之二。
9.如权利要求7所述的微孔板，其特征在于，所述凹槽深度小于或等于所述第一微孔深度的二分之一。
10.如权利要求1所述的微孔板，其特征在于，所述微孔组还包括第三微孔，所述第三微孔和所述第一微孔之间设有第二通道，所述第二通道中设有具有选择性通透作用的膜。
11.如权利要求10所述的微孔板，其特征在于，所述第三微孔为物料孔，所述第三微孔中的反应原料经所述第二通道进入所述第一微孔中，反应后气体产物经所述气体扩散通道进入所述第二微孔。
12.如上述任一权利要求所述的微孔板，其特征在于，所述微孔板还包括密封所述微孔的密封装置。
13.如权利要求12所述的微孔板，其特征在于，所述微孔密封装置为封板膜。
【文档编号】G01N33/00GK203551540SQ201320620517
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2013年10月9日 优先权日:2013年10月9日
【发明者】吴方, 周越洋, 于晶 申请人:上海交通大学