一种制备产后逐瘀胶囊的检测方法
【专利摘要】本发明涉及一种制备产后逐瘀胶囊的检测方法，该方法涉及川芎、当归、益母草的薄层色谱鉴别，阿魏酸酸的高效液相色谱含量测定及其限度。
【专利说明】一种制备产后逐瘀胶囊的检测方法【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种制备产后逐瘀胶囊的检测方法。
【背景技术】
[0002]产妇分娩后的产后淤血主要是子宫内遗留的余血和浊液，是由气血运行失常，血瘀气滞引起，是妇产科临床常见病之一。
[0003]中医认为，本病病理主要是气血运行失常，血瘀气滞。西医认为，其病因主要是子宫复原不全，当部分胎盘、胎膜残留或感染而影响子宫收缩和复原；或产妇如患有慢性疾病、失血过多、过度疲倦、体质未能恢复，或子宫过度膨胀、子宫肌瘤等局部因素，均可影响子宫复原不全。其次，剖宫产术后，子宫壁切口裂开、手术时止血不彻底或因术后感染，影响子宫复原而导致流血不止。
[0004]因此，目前对妇女产后淤血，西医一般采用加速宫缩以止血，及补血，继以抗生素控制感染等，经过治疗虽能缓解症状，但有一定的不良反应，治疗效果不甚理想，在治疗该病时虽然能达到立竿见影的效果，但西药治疗妇女产后子宫淤血、毒副作用比较大，容易反复发作，而且不能从根本上彻底治愈该病。我国传统医学利用中药治疗妇女产后子宫淤血，不但能达到迅速止血的作用，更重要的是还能对人体进行双向调理，从而达到阴阳平衡，使气血正常运行，达到止血的目的。
[0005]目前，国内已经有相关专利申请例如2013107103201中即公开了一种产后逐瘀颗粒及其制备方法，但是该专利公开的制备方法并不完备，也缺乏保证产品质量的有效检测方法。而众所周知的，中药成份相辅相克，对制备工艺的要求非常高，否则很难达到预期的治疗效果。因此，目前现有技术中相关产品的制备方法都无法满足实际生产的需要。
【发明内容】
[0006]本发明正是从现有技术出发，提供了一种制备产后逐瘀胶囊的检测方法，其适于广泛应用实际生产过程中。
[0007]本发明提供的制备产后逐瘀胶囊的检测方法，其中所述产后逐瘀胶囊由益母草、当归、川芎、炮姜制成，所述产后逐瘀胶囊采用如下制备方法获得:
[0008]益母草1248g当归156g川芎178g炮姜78g
[0009]以上四味，取益母草、当归、川芎各20g粉碎成细粉，备用，剩余当归、川芎和炮姜加10倍量水蒸馏提取3小时，收集挥发油，药渣与剩余益母草分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，每一次2小时，第二次I小时，滤过，滤液合并，浓缩至相对密度在50°C测定为1.35的稠膏，加入上述细粉，混匀，烘干，制颗粒，再烘干，加入当归等挥发油，混匀，装胶囊，制成本品1000粒，即得；
[0010]制备所述产后逐瘀胶囊的检测方法为:
[0011](I)取本品10粒，倾出内容物，研细，加无水乙醇IOml超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液，另取当归、川芎对照药材各0.5g，分别加无水乙醇10ml，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10 μ 1，对照品溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9: I)为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0012](2)取本品5粒，倾出内容物，研细，加无水乙醇30ml回流提取I小时,滤过,滤液加活性炭0.5g，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取益母草对照药材lg，加无水乙醇30ml回流提取I小时，滤过，滤液加活性炭0.5g，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为对照药材溶液，再取盐酸水苏碱对照品加甲醇制成每Iml含Img的对照品溶液，照薄层色谱法试验，分别吸取上述溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以丙酮-无水乙醇-盐酸(10: 6: I)为展开齐U，展开，取出，晾干，置105°C加热5分钟，喷以稀碘化铋钾试液，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0013](3)含量测定
[0014]色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-1%冰醋酸溶液(19: 81)为流动相；检测波长为323nm;柱温40°C;流速0.8ml/min，理论板数按阿魏酸峰计算应不低于3000，
[0015]对照品溶液的制备取阿魏酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含IOyg的溶液，即得，
[0016]供试品溶液的制备取本品30粒，研细，倾出内容物，精密称定，研细，取约4g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理50分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液15ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得，
[0017]测定法分别精密吸取对照溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0018]优选的，每粒所述产后逐瘀胶囊含当归和川芎以阿魏酸(CltlHltlO4)计，不少于30 μ g0
[0019]优选的，含量测定过程中超声处理的功率为120W，频率为59KHz。
[0020]本发明通过大量的创造性劳动发现，处方中当归、川芎具有补血活血，调经止前之功效，均主含阿魏酸。因此，本发明采用高效液相色谱法对制剂中阿魏酸进行了定量，方法简便、灵敏，可作为控制和考察本品质量的核心要素。
[0021]另一方面，在制备产后逐瘀胶囊实际生产制备过程中，采用本发明的检测方法简便、灵敏，在有效控制生产成本的同时还能实现精确控制产品的质量，适于广泛应用实际生产过程中。
【专利附图】
【附图说明】
[0022]图1当归、川芎的TLC图谱的色谱图
[0023]图2益母草的TLC图谱
【具体实施方式】
[0024]下面，给出本发明产后逐瘀胶囊的检测方法的具体实施例。
[0025]实施例1、[0026]益母草1248g当归156g川芎178g炮姜78g
[0027]制备方法:
[0028]以上四味，取益母草、当归、川芎各20g粉碎成细粉，备用，剩余当归、川芎和炮姜加10倍量水蒸馏提取3小时，收集挥发油，药渣与剩余益母草分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，每一次2小时，第二次I小时，滤过，滤液合并，浓缩至相对密度1.35 (500C )的稠膏，加入上述细粉，混匀，烘干，制颗粒，再烘干，加入当归等挥发油，混匀，装胶囊，制成1000粒，即得。
[0029]检测方法:
[0030](I)取本品10粒，倾出内容物，研细，加无水乙醇IOml超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取当归、川芎对照药材各0.5g，分别加无水乙醇10ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液10μ1，对照品溶液5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9: I)为展开剂，展开，取出，晾干。在紫外光(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
[0031](2)取本品5粒，倾出内容物，研细，加无水乙醇30ml回流提取I小时,滤过,滤液加活性炭0.5g，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取益母草对照药材lg，加无水乙醇30ml回流提取I小时，滤过，滤液加活性炭0.5g，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为对照药材溶液。再取盐酸水苏碱对照品加甲醇制成每Iml含Img的对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，分别吸取上述溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以丙酮-无水乙醇-盐酸(10: 6: I)为展开剂，展开，取出，晾干，置105°C加热5分钟，喷以稀碘化铋钾试液，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0032](3)含量测定
[0033]色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-1%冰醋酸溶液(19: 81)为流动相；检测波长为323nm。理论板数按阿魏酸峰计算应不低于3000。
[0034]对照品溶液的制备取阿魏酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含IOyg的溶液，即得。
[0035]供试品溶液的制备取本品30粒，研细，倾出内容物，精密称定，研细，取约4g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHz) 50分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液15ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
[0036]测定法分别精密吸取对照溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0037]本品每粒含当归和川芎以阿魏酸(C10H1004)计，不得少于30 μ g。
[0038]实验例1:当归、川芎药材的薄层色谱鉴别
[0039]以当归、川芎对照药材为阳性对照(中国药品生物制品检定所提供，批号120927-200310，120918-200406)，以正己烷-醋酸乙酯(9: I)为展开为，展开后的斑点365nm检视，荧光斑点圆整，分离效果好。另取处方中不含当归、川芎的其它药材按制备方法制成阴性样品，再按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。经三批样品及阴性对照试验，阴性无干扰。
[0040]其中附图1中，1、当归对照药材2、川芎对照药材3、4、5三批样品6、阴性样品。
[0041]实验例2:益母草药材的薄层色谱鉴别
[0042]以盐酸水苏碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号110712-200306)及益母草对照药材(中国药品生物制品检定所，批号1120912-200306)为阳性对照，曾比较了 1:正丁醇-盐酸-水(4: I: 0.5)，I1:丙酮-无水乙醇-盐酸(10: 6: I)等展开剂，其中以展开剂II展开后的斑点圆整，分离效果好。另取处方中不含益母草的其它药材按制备方法制成阴性样品，再按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。经三批样品及阴性对照试验，阴性无干扰。
[0043]其中附图2中，1、盐酸水苏碱对照品2、益母草对照药材3、4、5三批样品6、阴性样品。
[0044]实验例3:阿魏酸含量测定
[0045]本品由益母划、当归、川芎、炮姜四味药组成。处方中当归、川芎具有补血活血，调经止前之功效，均主含阿魏酸。现采用高效液相色谱法对制剂中阿魏酸进行了定量，方法简便、灵敏，可作为控制和考察本品内在质量的方法。
[0046](I)仪器与试药
[0047]LC-1OADvp高效液相色谱仪(岛津)，SPD-1OAvp检测器，阿魏酸对照品(批号0773-9910，由中国药品生物制品检定所提供)，乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
[0048](2)色谱条件
[0049]色谱柱:十八烷基键合硅胶柱(0DS)4.6X250nm ;流动相:乙腈-1 %冰醋酸溶液(19: 81);检测波长:323nm;柱温40°C ;流速0.8ml/min。在此条件下阿魏酸与其它组分均能达到很好的分离，主峰与最近的杂质峰的分离度大于1.5。理论板数均大于3000。
[0050](3)检测波长的确定
[0051]取阿魏酸对照品溶液进行紫外外描，得吸收曲线，结果最大吸收峰为323nm，与文献报道一致，因此选用323nm波长作为检测波长。
[0052](4)流动相的选择
[0053]根据资料查找，曾以乙腈-1 %冰醋酸溶液不同比例的多种流动相体系进行试验，结果制剂中的其它组分与阿魏酸不能有效分离，而乙腈-1%冰醋酸溶液(19: 81)流动相体系，阿魏酸与其它组分分离完全，且出峰快，结果满意
[0054](5)供试品溶液的制备:取本品30粒，研细，倾出内容物，精密称定，研细，取约4g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHz) 50分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液15ml，置25ml量瓶中，力口水稀释至刻度，摇匀，即得。
[0055]另在实验过程中，比较了不同超声提取时间对含量结果的影响，结果如表I。
[0056]表I超声提取时间的选择
[0057]
【权利要求】
1.一种制备产后逐瘀胶囊的检测方法，其中所述产后逐瘀胶囊由益母草、当归、川芎、炮姜制成，所述产后逐瘀胶囊采用如下制备方法获得: 益母草1248g当归156g川芎178g炮姜78g 以上四味，取益母草、当归、川芎各20g粉碎成细粉，备用，剩余当归、川芎和炮姜加10倍量水蒸馏提取3小时，收集挥发油，药渣与剩余益母草分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，每一次2小时，第二次I小时，滤过，滤液合并，浓缩至相对密度在50°C测定为1.35的稠膏，加入上述细粉，混匀，烘干，制颗粒，再烘干，加入当归等挥发油，混匀，装胶囊，制成本品1000粒，即得； 制备所述产后逐瘀胶囊的检测方法为: (1)取本品10粒，倾出内容物，研细，加无水乙醇IOml超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液，另取当归、川芎对照药材各0.5g，分别加无水乙醇10ml，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液IOy 1，对照品溶液5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9: I)为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (2)取本品5粒，倾出内容物，研细，加无水乙醇30ml回流提取I小时,滤过,滤液加活性炭0.5g，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取益母草对照药材lg，加无水乙醇30ml回流提取I小时，滤过，滤液加活性炭0.5g，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为对照药材溶液，再取盐酸水苏碱对照品加甲醇制成每Iml含Img的对照品溶液，照薄层色谱法试验，分别吸取上述溶液各ΙΟμΙ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以丙酮-无水乙醇-盐酸(10: 6: I)为展开剂，展开，取出，晾干，置105°C加热5分钟，喷以稀碘化铋钾试液，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (3)含量测定 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-1 %冰醋酸溶液(19: 81)为流动相；检测波长为323nm;柱温40°C;流速0.8ml/min，理论板数按阿魏酸峰计算应不低于3000， 对照品溶液的制备取阿魏酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含10 μ g的溶液，即得， 供试品溶液的制备取本品30粒，研细，倾出内容物，精密称定，研细，取约4g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理50分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液15ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得， 测定法分别精密吸取对照溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.如权利要求1所述的检测方法，每粒所述产后逐瘀胶囊含当归和川芎以阿魏酸(C10H10O4)计，不少于 30 μ g。
3.如权利要求1或2所述的检测方法，含量测定过程中超声处理的功率为120W，频率为 59KHz。
【文档编号】G01N30/90GK103983734SQ201410228669
【公开日】2014年8月13日 申请日期:2014年5月26日 优先权日:2014年5月26日
【发明者】李明辉, 王刚 申请人:江西民济药业有限公司