一种结核杆菌的检测方法
【专利摘要】本发明公开一种结核杆菌的检测方法，包括采集样本和挑选待测标本，用噬菌体感染待测样本；杀死结核杆菌外未感染噬菌体，并用噬菌体生物扩增法扩增已感染的噬菌体；用抗噬菌体的抗体将噬菌体标金，采用快速免疫层析法检测噬菌体的存在与否从而判断样品中是否有结核杆菌。该结核杆菌的检测方法具有准确性高，成本低，步骤简单，检测时间短的优点。
【专利说明】—种结核杆菌的检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种结核杆菌的检测方法。
【背景技术】
[0002]结核杆菌，是引起结核病的病原菌。可侵犯全身各器官，但以肺结核为最多见。结核病至今仍为重要的传染病。估计世界人口中1/3感染结核分枝杆菌。据WHO报道，每年约有800万新病例发生，至少有300万人死于该病。我国建国前死亡率达200-300人/10万，居各种疾病死亡原因之首，建国后人民生活水平提高，卫生状态改善，特别是开展了群防群治，儿童普遍接种卡介苗，结核病的发病率和死亡率大为降低。但应注意，世界上有些地区因艾滋病、吸毒、免疫抑制剂的应用、酗酒和贫困等原因，发病率又有上升趋势。结核分枝杆菌为细长略带弯曲的杆菌，大小I?4X0.4 μ m。分枝杆菌属的细菌细胞壁脂质含量较高，约占干重的60 %，特别是有大量分枝菌酸包围在肽聚糖层的外面，可影响染料的穿入。分枝杆菌一般用齐尼抗酸染色法，以5%石炭酸复红加温染色后可以染上，但用3%盐酸乙醇不易脱色。若再加用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色，而其他细菌和背景中的物质为蓝色。结核杆菌的检测与预防是降低结核病的发病率和死亡率的关键。目前检测结核杆菌的方法主要有结核菌素实验、结核菌Y干扰素释放试验、微生物学检查法和快速检测法等。其中结核菌素实验适合实验室研究，不适合疾病的诊断；结核菌Y干扰素释放试验所需技术高，成本高；微生物学检查法步骤繁琐；快速检测法准确性不高。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的技术问题是提供一种具有准确性高，成本低，步骤简单，检测时间短的结核杆菌的检测方法。
[0004]为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案:包括如下步骤:
[0005]I)用直接涂片的方式采集样本，挑出能检测出抗酸杆菌的涂片，标记此种样本，待测；
[0006]2)用待测样本感染噬菌体，并杀死结核杆菌外未感染噬菌体，既得已感染结核杆菌的噬菌体，备用；
[0007]3)将步骤2)中所得噬菌体用生物扩增法扩增已感染的噬菌体，备用；
[0008]4)将步骤3)中所得噬菌体用抗噬菌体的抗体标金，采用快速免疫层析法检测噬菌体的存在与否从而判断样品中是否有结核杆菌。
[0009]本发明的一种结核杆菌的检测方法及其制备方法的有益效果是:准确性高，成本低，步骤简单，检测时间短。
【具体实施方式】
[0010]为能进一步了解本发明的特征、技术手段及所达到的具体功能，下面以【具体实施方式】对本发明做详细描述。[0011]实施例:
[0012]一种结核杆菌的检测方法，
[0013]所述结核杆菌的检测方法的制备方法过程如下:
[0014]I)用直接涂片的方式采集样本，挑出能检测出抗酸杆菌的涂片，标记此种样本，待测；
[0015]2)用待测样本感染噬菌体，并杀死结核杆菌外未感染噬菌体，既得已感染结核杆菌的噬菌体，备用；
[0016]3)将步骤2)中所得噬菌体用生物扩增法扩增已感染的噬菌体，备用；
[0017]4)将步骤3)中所得噬菌体用抗噬菌体的抗体标金，采用快速免疫层析法检测噬菌体的存在与否从而判断样品中是否有结核杆菌。
[0018]实验例:
[0019]实验对象:200名感染结核杆菌程度不同的患者。
[0020]实验方法:200名患者全部用本发明的结核杆菌的检测方法检测。
[0021]实验结果:通过本发明的结核杆菌的检测方法检测，所有患者都成功地检测出来丙型结核杆菌。
[0022]由实验结果可知，使用本结核杆菌的检测方法准确性高，成本低，步骤简单，检测时间短。
[0023]以上已将本发明做一详细说明，以上所述，仅为本发明之较佳实施例而已，当不能限定本发明实施范围，即凡依本申请范围所作均等变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖范围内。
【权利要求】
1.一种结核杆菌的检测方法，其特征在于:包括以下步骤: 1)用直接涂片的方式采集样本，挑出能检测出抗酸杆菌的涂片，标记此种样本，待测； 2)用待测样本感染噬菌体，并杀死结核杆菌外未感染噬菌体，既得已感染结核杆菌的噬菌体，备用； 3)将步骤2)中所得噬菌体用生物扩增法扩增已感染的噬菌体，备用； 4)将步骤3)中所得噬菌体用抗噬菌体的抗体标金，采用快速免疫层析法检测噬菌体的存在与否从而判断样品中是否有结核杆菌。
【文档编号】G01N33/569GK104034889SQ201410260553
【公开日】2014年9月10日 申请日期:2014年6月12日 优先权日:2014年6月12日
【发明者】江崇才, 李作臻, 仇彩霞 申请人:江崇才