一种鉴定雌性麻蝇种类的方法及应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种鉴定雌性麻蝇种类的方法及应用。该方法为利用子宫骨片鉴定雌性麻蝇种类。本发明发明人发现，子宫骨片具有种的特异性，能用于鉴定雌性麻蝇种类。通过子宫骨片鉴定雌性麻蝇种类的方法简单，用时短，且准确性高。该方法特别适合在法医鉴定领域和/或检验检疫领域中进行应用。
【专利说明】一种鉴定雌性麻蝇种类的方法及应用
【技术领域】
[0001]本发明属于昆虫鉴定领域，特别涉及一种鉴定雌性麻蝇种类的方法及应用。
【背景技术】
[0002]麻蝇种类繁多，分布全世界，全世界已知种大概有2500种，可以携带多种病原体，是重要的媒介生物之一。
[0003]麻蝇的准确种类鉴定对进一步采取适合的防疫措施，防止疾病的传播有非常重要的意义。由于有些麻蝇是食尸性的，因此还是重要的法医昆虫，可以根据尸体上麻蝇的发育状态，推断死亡时间和是否是第一作案现场。但现在国际上通用的麻蝇种类鉴定是根据雄性麻蝇的尾器的形态进行鉴定的，不同种类的雌性麻蝇由于外部形态差别很小，且具有趋同性，因此很难根据外部形态，鉴定雌性麻蝇的种类。但在自然界中，往往雌性麻蝇多于雄性麻蝇，雌性麻蝇产卵，孵化成幼虫即-蛆，从这种意义上，雌性麻蝇的种类鉴定更为重要，因此急需一种有效的雌性麻蝇种类的鉴定方法。
【发明内容】
[0004]本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种鉴定雌性麻蝇种类的方法。
[0005]本发明的另一目的在于提供所述鉴定雌性麻蝇种类的方法的应用。
[0006]本发明的目的通过下述技术方案实现:一种鉴定雌性麻蝇种类的方法，包括如下步骤:通过子宫骨片鉴定雌性麻蝇种类；
[0007]所述的鉴定雌性麻蝇种类的方法，包括如下具体步骤:将采集到的雌性麻蝇标本进行解剖，得到待确定种类的子宫骨片；将待确定种类的子宫骨片与已明确种类的雌性麻蝇的子宫骨片进行比对，即可确定所采集到的雌性麻蝇标本的种类；
[0008]所述的雌性麻蝇种类包括雌性野亚麻蝇、雌性白头亚麻蝇、雌性多突亚麻蝇、雌性绯角亚麻蝇、雌性酱亚麻蝇和雌性短角亚麻蝇；优选为雌性野亚麻蝇；
[0009]当所述的雌性麻蝇为雌性野亚麻蝇时，子宫骨片如图1所示，形似不规则的花瓶的平面，上窄下宽，从窄的一端至宽的一端，两侧的弧线先往内延伸，形成颈的结构；再往外延伸，最后往内收，形成肚的结构；
[0010]当所述的雌性麻蝇为雌性白头亚麻蝇时，子宫骨片如图2所示，子宫骨片分化为左右两部，形状为“一”字下面接“八”字；“八”字的一撇一捺形如短袜；
[0011]当所述的雌性麻蝇为雌性多突亚麻蝇时，子宫骨片如图3所示，形如倒置的元宝的平面图；
[0012]当所述的雌性麻蝇为雌性绯角亚麻蝇时，子宫骨片如图4所示，形如倒置的、少了中间凸起的元宝的平面图；
[0013]当所述的雌性麻蝇为雌性酱亚麻蝇时，子宫骨片如图5所示，形如伸出脑袋但不见四肢的龟的俯视图；
[0014]当所述的雌性麻蝇为雌性短角亚麻蝇时，子宫骨片如图6所示，形如人的肩部以上部分(包括脑袋、颈、少许肩部)的后视图；
[0015]所述的鉴定雌性麻蝇种类的方法特别适合在法医鉴定领域和/或检验检疫领域中进行应用。
[0016]利用子宫骨片鉴定雌性野亚麻蝇的方法，包括如下步骤:
[0017](I)解剖待检标本，获得子宫骨片；
[0018](2)将待检标本的子宫骨片与雌性野亚麻蝇的子宫骨片比较；
[0019](3)待检标本的子宫骨片与雌性野亚麻蝇的子宫骨片形状基本相同，即表示待检标本为雌性野亚麻蝇；待检标本的子宫骨片与雌性野亚麻蝇的子宫骨片形状不同，即表示待检标本不是雌性野亚麻蝇；
[0020]利用子宫骨片鉴定雌性白头亚麻蝇的方法，包括如下步骤:
[0021](I)解剖待检标本，获得子宫骨片；
[0022](2)将待检标本的子宫骨片与雌性白头亚麻蝇的子宫骨片比较；
[0023](3)待检标本的子宫骨片与雌性白头亚麻蝇的子宫骨片形状基本相同，即表示待检标本为雌性白头亚麻蝇；待检标本的子宫骨片与雌性白头亚麻蝇的子宫骨片形状不同，即表示待检标本不是雌性白头亚麻蝇；
[0024]利用子宫骨片鉴定雌性多突亚麻蝇的方法，包括如下步骤:
[0025](I)解剖待检标本，获得子宫骨片；
[0026](2)将待检标本的子宫骨片与雌性多突亚麻蝇的子宫骨片比较；
[0027](3)待检标本的子宫骨片与雌性多突亚麻蝇的子宫骨片形状基本相同，即表示待检标本为雌性多突亚麻蝇；待检标本的子宫骨片与雌性多突亚麻蝇的子宫骨片形状不同，即表示待检标本不是雌性多突亚麻蝇；
[0028]利用子宫骨片鉴定雌性绯角亚麻蝇的方法，包括如下步骤:
[0029](I)解剖待检标本，获得子宫骨片；
[0030](2)将待检标本的子宫骨片与雌性绯角亚麻蝇的子宫骨片比较；
[0031](3)待检标本的子宫骨片与雌性绯角亚麻蝇的子宫骨片形状基本相同，即表示待检标本为雌性绯角亚麻蝇；待检标本的子宫骨片与雌性绯角亚麻蝇的子宫骨片形状不同，即表示待检标本不是雌性绯角亚麻蝇；
[0032]利用子宫骨片鉴定雌性酱亚麻蝇的方法，包括如下步骤:
[0033](I)解剖待检标本，获得子宫骨片；
[0034](2)将待检标本的子宫骨片与雌性酱亚麻蝇的子宫骨片比较；
[0035](3)待检标本的子宫骨片与雌性酱亚麻蝇的子宫骨片形状基本相同，即表示待检标本为雌性酱亚麻蝇；待检标本的子宫骨片与雌性酱亚麻蝇的子宫骨片形状不同，即表示待检标本不是雌性酱亚麻蝇；
[0036]利用子宫骨片鉴定雌性短角亚麻蝇的方法，包括如下步骤:
[0037](I)解剖待检标本，获得子宫骨片；
[0038](2)将待检标本的子宫骨片与雌性短角亚麻蝇的子宫骨片比较；
[0039](3)待检标本的子宫骨片与雌性短角亚麻蝇的子宫骨片形状基本相同，即表示待检标本为雌性短角亚麻蝇；待检标本的子宫骨片与雌性短角亚麻蝇的子宫骨片形状不同，即表示待检标本不是雌性短角亚麻蝇；
[0040]本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:
[0041](I)本发明发明人发现，子宫骨片的形态结构在种内不同个体间的结构是稳定的，在不同的种间差异性大，从而提供了通过子宫骨片鉴定雌性麻蝇的方法。
[0042](2)本发明发明人首次分离得到雌性野亚麻蝇、雌性酱亚麻蝇、雌性多突亚麻蝇、雌性绯角亚麻蝇和雌性短角亚麻蝇的子宫骨片，有效拓宽了利用子宫骨片鉴定雌性麻蝇的方法的使用范围。
[0043](3)本发明提供的方法操作简单，用时短，且准确性高。
【专利附图】
【附图说明】
[0044]图1是雌性野亚麻蝇的子宫骨片照片图。
[0045]图2是雌性白头亚麻蝇的子宫骨片照片图。
[0046]图3是雌性多突亚麻蝇的子宫骨片照片图。
[0047]图4是雌性绯角亚麻蝇的子宫骨片照片图。
[0048]图5是雌性酱亚麻蝇的子宫骨片照片图。
[0049]图6是雌性短角亚麻蝇的子宫骨片照片图。
【具体实施方式】
[0050]下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0051]实施例1
[0052](I)野外采集得到正在交配的雌雄性麻蝇；
[0053](2)利用雄虫的尾器和外部特征对雄虫进行鉴定，从而判断所配对的雌性麻蝇的种类。
[0054](3)利用DNA条形码技术，比对配对雌雄性配对麻蝇的DNA条形码序列是否一致，从而判断雌性麻蝇与配对雄性种类是否一致。具体步骤如下:取麻蝇的一条腿，用动物组织基因组DNA提取试剂盒(TIANGEN ;编号:DP304)中的裂解液浸泡5个小时以上，用动物组织基因组DNA提取试剂盒提取基因组DNA。以LC01490和HC02198为引物，经PCR，反应体系为:5倍Phus1n HF缓冲液10 μ 1，1mM dNTPs I μ 1，正反向引物(浓度为1pmoI/L)各I μ I, Phus1n超保真DNA聚合酶0.5 μ 1，基因组DNA2y 1，用ddH20补足50 μ I ;PCR的条件为:94°C变性 5min ；94°C 40S、54°C 40S、72°C lmin，29 个循环；72°C延伸 1min ;使用质量体积比I %的琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行分离，对目的条带(700bp左右)进行切胶，使用琼脂糖凝胶DNA回收纯化试剂盒进行纯化，将目的基因克隆到质粒pGMT (TIANGEN ；编号:VT202，按说明书操作)，经转化大肠杆菌DH5a感受态细胞，将转化液涂布含100 μ g/ml氨苄青霉素的LB平板上，通过引物LC01490和HC02198对菌落进行PCR，筛选得到阳性克隆，送测序经鉴定。
[0055]1X01490:5' -GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3'；
[0056]HC02198:5/ -TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3'。
[0057]经鉴定，采集得到如下种类的雌性麻蝇，如表I所示:
[0058]表1
[0059]
【权利要求】
1.一种鉴定雌性麻蝇种类的方法，其特征在于包括如下步骤:通过子宫骨片鉴定雌性麻蝇种类。
2.根据权利要求1所述的鉴定雌性麻蝇种类的方法，其特征在于包括如下步骤:将采集到的雌性麻蝇标本进行解剖，得到待确定种类的子宫骨片；将待确定种类的子宫骨片与已明确种类的雌性麻蝇的子宫骨片进行比对，即可确定所采集到的雌性麻蝇标本的种类。
3.根据权利要求1或2所述的鉴定雌性麻蝇种类的方法，其特征在于:所述的雌性麻蝇种类包括雌性野亚麻蝇、雌性白头亚麻蝇、雌性多突亚麻蝇、雌性绯角亚麻蝇、雌性酱亚麻蝇和雌性短角亚麻蝇。
4.据权利要求3所述的鉴定雌性麻蝇种类的方法，其特征在于: 当所述的雌性麻蝇为雌性野亚麻蝇时，子宫骨片如图1所示； 当所述的雌性麻蝇为雌性白头亚麻蝇时，子宫骨片如图2所示； 当所述的雌性麻蝇为雌性多突亚麻蝇时，子宫骨片如图3所示； 当所述的雌性麻蝇为雌性绯角亚麻蝇时，子宫骨片如图4所示； 当所述的雌性麻蝇为雌性酱亚麻蝇时，子宫骨片如图5所示； 当所述的雌性麻蝇为雌性短角亚麻蝇时，子宫骨片如图6所示。
5.根据权利要求4所述的鉴定雌性麻蝇种类的方法，其特征在于: 所述的雌性野亚麻蝇的子宫骨片形似不规则的花瓶的平面，上窄下宽，从窄的一端至宽的一端，两侧的弧线先往内延伸，形成颈的结构；再往外延伸，最后往内收，形成肚的结构； 所述的雌性白头亚麻蝇的子宫骨片分化为左右两部，形状为“一”字下面接“八”字；“八”字的一撇一捺形如短袜； 所述的雌性多突亚麻蝇的子宫骨片形如倒置的元宝的平面图； 所述的雌性绯角亚麻蝇的子宫骨片形如倒置的、少了中间凸起的元宝的平面图； 所述的雌性酱亚麻蝇的子宫骨片形如伸出脑袋但不见四肢的龟的俯视图； 所述的雌性短角亚麻蝇的子宫骨片形如人的肩部以上部分的后视图。
6.权利要求1?5任一项所述的鉴定雌性麻蝇种类的方法的应用，其特征在于:所述的方法在法医鉴定领域和/或检验检疫领域中进行应用。
7.利用子宫骨片鉴定雌性多突亚麻蝇的方法，其特征在于包括如下步骤: (1)解剖待检标本，获得子宫骨片； (2)将待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性多突亚麻蝇的子宫骨片比较； (3)待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性多突亚麻蝇的子宫骨片形状基本相同，即表示待检标本为雌性多突亚麻蝇；待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性多突亚麻蝇的子宫骨片形状不同，即表示待检标本不是雌性多突亚麻蝇。
8.利用子宫骨片鉴定雌性绯角亚麻蝇的方法，其特征在于包括如下步骤: (1)解剖待检标本，获得子宫骨片； (2)将待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性绯角亚麻蝇的子宫骨片比较； (3)待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性绯角亚麻蝇的子宫骨片形状基本相同，即表示待检标本为雌性绯角亚麻蝇；待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性绯角亚麻蝇的子宫骨片形状不同，即表示待检标本不是雌性绯角亚麻蝇。
9.利用子宫骨片鉴定雌性酱亚麻蝇的方法，其特征在于包括如下步骤: (1)解剖待检标本，获得子宫骨片； (2)将待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性酱亚麻蝇的子宫骨片比较； (3)待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性酱亚麻蝇的子宫骨片形状基本相同，即表示待检标本为雌性酱亚麻蝇；待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性酱亚麻蝇的子宫骨片形状不同，即表示待检标本不是雌性酱亚麻蝇。
10.利用子宫骨片鉴定雌性短角亚麻蝇的方法，其特征在于包括如下步骤: (1)解剖待检标本，获得子宫骨片； (2)将待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性短角亚麻蝇的子宫骨片比较； (3)待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性短角亚麻蝇的子宫骨片形状基本相同，即表示待检标本为雌性短角亚麻蝇；待检标本的子宫骨片与权利要求4中所述的雌性短角亚麻蝇的子宫骨片形状不同，即表示待检标本不是雌性短角亚麻蝇。
【文档编号】G01N33/48GK104133056SQ201410331578
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年7月4日 优先权日:2014年7月4日
【发明者】岳巧云, 汪小东, 邱德义, 陈健, 魏晓雅, 胡佳, 刘德星 申请人:岳巧云