一种光甘草定含量的测定方法
【专利摘要】本发明公开了一种光甘草定含量的测定方法，包括（1）设定高效液相色谱条件；（2）制备对照品溶液；（3）制备供试品溶液；（4）利用高效液相色谱法，且通过梯度洗脱的方式进行含量测定。本发明所述的方法具有专一性，能够准确的测定光甘草定的含量，而采用梯度洗脱进行分析，具有很好的分离效果，能够有效缩短分析时间，因此，具有所测成分分离度、线性关系、重现性、精密度、稳定性、回收率均较好的优势，能够准确，简便，快捷的得到光甘草定的含量。
【专利说明】一种光甘草定含量的测定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种光甘草定含量的测定方法，属于含量检测方法【技术领域】。
【背景技术】
[0002]甘草为豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、胀果甘草 G.1nf IataBat.或光果甘草G.glabraL.的干燥根及根茎，具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药的功能。光果甘草中还含有特有的黄酮类成分光甘草定，它具有较强的抗炎，抗氧化和抗菌作用，应用前景广阔。
[0003]光甘草定能深入皮肤内部并保持高活性，美白并高效抗氧化。有效抑制黑色素生成过程中多种酶的活性，特别是抑制酪胺酸酵素活性。同时还具有防止皮肤粗糙和抗炎、抗菌的功效。光甘草定是目前疗效好、功能全面的美白成分。光甘草经过多年来的使用，作用明显，安全性好。是目前国际上高档美白化妆品的主要功效成分。
[0004]在专利号为201110230297.7的专利《香草醛-硫酸比色法测定光甘草定含量的方法》一文中采用香草醛-硫酸显色后，利用比色法来测定光甘草定的含量，但是香草醛-硫酸是一种通用显色剂，针对光甘草定不具有专一性，可见用来测定待测物种一类化合物的含量，比如说甘草中总黄酮的含量，其包括但不仅仅是光甘草定的含量。
[0005]而在《高效液相色谱法测定光果甘草中光甘草定的含量》等相关文献报导中，采用等度洗脱的方式，但光甘草定分离度不佳。
【发明内容】
[0006]为了克服现有技术问题，本发明的目的在于提供一种简便、快捷、重复性好的光甘草定含量的测定方法。
[0007]为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为:
一种光甘草定含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤:
(O设定高效液相色谱条件:温度为室温，相对湿度为25~40%，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以浓度为1%冰醋酸溶液为流动相B，洗脱方式为梯度洗脱，流速为0.8~1.2ml/min，柱温为25~40°C，检测波长为278~282nm ；
(2)制备对照品溶液:将光甘草定对照品用有机溶剂溶解，形成对照品溶液，且所述的对照品溶液中，光甘草定对照品的浓度为0.1 "0.5mg/ml ；
(3)制备供试品溶液:将光甘草定粗提物用有机溶剂利用超声溶解5~20min，然后，冷却至室温，得到供试品溶液，且所述的供试品溶液中光甘草定粗提物的浓度为0.2^2mg/ml ；
(4)含量测定:分别取对照品溶液和供试品溶液各20μ 1，注入液相色谱仪，进行高效液相色谱仪的操作，并记录色谱图，然后，利用色谱图计算光甘草定粗提物中光甘草定的含量。
[0008]进一步，步骤(1)中，所述的室温的温度优选为20°C，相对湿度优选为35%，洗脱时的流速优选为lml/min,柱温优选为30°C,检测波长优选为280nm。
[0009]此外，步骤(1)中，所述的梯度洗脱中流动相A和流动相B在不同的时间段的浓度关系如下表所示:
【权利要求】
1.一种光甘草定含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤: (O设定高效液相色谱条件:温度为室温，相对湿度为25~40%，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以浓度为1%冰醋酸溶液为流动相B，洗脱方式为梯度洗脱，流速为0.8~1.2ml/min，柱温为25~40°C，检测波长为278~282nm ； (2)制备对照品溶液:将光甘草定对照品用有机溶剂溶解，形成对照品溶液，且所述的对照品溶液中，光甘草定对照品的浓度为0.1 ~0.5mg/ml ； (3)制备供试品溶液:将光甘草定粗提物用有机溶剂利用超声溶解5~20min，然后，冷却至室温，得到供试品溶液，且所述的供试品溶液中光甘草定粗提物的浓度为0.2~2mg/ml ； (4)含量测定:分别取对照品溶液和供试品溶液各20μ 1，注入液相色谱仪，进行高效液相色谱仪的操作，并记录色谱图，然后，利用色谱图计算光甘草定粗提物中光甘草定的含量。
2.根据权利要求1所述的一种光甘草定含量的测定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的室温的温度为20°C，相对湿度为35%，洗脱时的流速为lml/min，柱温为30°C，检测波长为 280nm。
3.根据权利要求1所述的一种光甘草定含量的测定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的梯度洗脱中流动相A和流动相B在不同的时间段的浓度关系如下表所示:
4.根据权利要求1或3所述的一种光甘草定含量的测定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的梯度洗脱中流动相A和流动相B在不同的时间段的浓度关系如下表所示:
5.根据权利要求1所述的一种光甘草定含量的测定方法，其特征在于，步骤(2)和步骤(3)中所述的有机溶剂为浓度为30-60%的甲醇。
6.根据权利要求5所述的一种光甘草定含量的测定方法，其特征在于，步骤(2)和步骤(3)中所述的有机溶剂为浓度为40%的甲醇。
7.根据权利要求1所述的一种光甘草定含量的测定方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的对照品溶液中，光甘草定对照品的浓度为0.2mg/mlo
8.根据权利要求1所述的一种光甘草定含量的测定方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的供试品溶液中光甘草定粗提物的浓度为lmg/ml。
9.根据权利要求1所述的一种光甘草定含量的测定方法，其特征在于，步骤(3)中，超声溶解的时间为15min。
【文档编号】G01N30/74GK104076110SQ201410346494
【公开日】2014年10月1日 申请日期:2014年7月21日 优先权日:2014年7月21日
【发明者】易铭, 钟慧, 杨永安, 汤文建 申请人:江苏天晟药业有限公司