一次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法
【专利摘要】本发明公开了一种一次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法，具体按照以下步骤实施：确定液相色谱条件：色谱柱为：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱；流动相为：0.05mol/l磷酸二氢钾溶液-甲醇(30∶70，用10％磷酸溶液调节pH值至5.7～5.8)；流速1.0ml/min；柱温30℃；紫外检测器波长215nm；进样量为10μl；标准曲线方程的绘制，标准曲线方程分别为：Y富＝5934X富+1224.2，r2＝0.9999；Y克＝6677.1X克+238.24，r2＝0.9999，采用上述条件并利用高效液相色谱仪测量富马酸二甲酯和克霉唑含量，该方法是一种准确、方便的测定餐具中富马酸二甲酯与克霉唑的分析方法。
【专利说明】—次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法
【技术领域】
[0001]本发明属于餐饮【技术领域】，具体涉及一种一次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法。
【背景技术】
[0002]富马酸二甲酯(Dimethyl Fumarate)，简称为DMF。是美国80年代开发出来的一种新型防霉剂，取名为"霉敌"，具有低毒(LD大白鼠口服为2240mg/kg)高效、广谱抗菌、安全、化学稳定性好、作用时间长、适用的PH值范围宽等特点，能抑制多种霉菌、酵母菌及细菌，特别对肉毒梭菌和黄曲霉菌有很好的抑制作用。富马酸二甲酯因其抗菌活性不受PH值的影响；并兼有杀虫活性，还具有触杀和熏蒸作用，广泛应用于食品、饮料、饲料、中药材、化妆品、鱼、肉、蔬菜、水果等防霉、防腐、防虫、保鲜等领域。然而报道称富马酸二甲酯对皮肤产生过敏性伤害(黏膜刺激)，长期接触会发生皮肤过敏甚至溃烂，经食道吸入可能会对人体肠道、内脏产生腐蚀性损害，特别是对儿童的成长发育造成极大伤害。2012年5月15日，欧盟发布政府公报颁布指令(EU) N0.412/2012 [10]，正式批准将富马酸二甲酯(DMF)加入REACH法规附件XV II (对某些危险物质、混合物、物品在制造，投放市场和使用过程中的限制)物质清单第61项，自2012年6月4日起，全欧盟限制使用富马酸二甲酯(DMF)。欧盟规定市场上流通的产品或产品零件中富马酸二甲酯(DMF)的含量不应超过0.lmg/kg。
[0003]克霉唑(Clotrinazole)临床主要供外用，具广谱抗真菌活性,对表皮癣菌、毛发癣菌、曲菌、着色菌、隐球菌属和念珠菌属均有较好抗菌作用，对申克氏孢子丝菌、皮炎芽生菌、粗球孢子菌属、组织浆胞菌属等也有一定抗菌活性。主要用于治疗皮肤霉菌病，如手足癣、体癣、耳道、阴道霉菌病等。在一次性餐具中使用对消费者的危害，还未见有关报道。
[0004]目前我国是使用一次性餐具的大国，消费者在日常就餐时认为选择一次餐具是安全的，但是有些不法分子为了一次性餐具不长霉，刻意在一次性餐具中非法添加克霉唑、富马酸二甲酯等化学物质，以克制一次性餐具不长霉，但是消费者在不知情的情况下，使用这种一次性餐具，会对人体造成潜在的危害，如一次性筷子在生产、运输和储存过程中因卫生条件不达标或处理不当，会滋生金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等，抵抗力弱的人使用后可能导致腹泻和呕吐。但是目前现有的检测标准GB18006.1-2009，GB19790.1-2005、GB19790.2-2005中，根本就没有检测非法添加克霉唑、富马酸二甲酯这些化学物质项目的要求，造成检测机构在检测一次性餐具时，按现有标准检测结果是合格的，但事实上可能是不合格的一次性餐具还在频频使用当中！
[0005]一次性用品是现今全球社会使用范围最广的消费品，在中国一次性用品的消耗量更是位居世界首位。近年来，随着社会环境保护意识的增强、可持续发展理念的深入，一次性用品问题成为全社会关注的焦点。在餐饮行业中一次性餐具使用量大，因此一次性餐具的质量情况不仅事关消费者的身心健康，而且关系到餐饮行业的社会形象和社会责任，并与国家倡导的“低碳环保”理念等密切相关。有关网络问卷调查显示，在餐馆就餐时，消费者“经常用到”和“偶尔用到”一次性餐具的比例超过80%，而且“经常用到”的比例还略高于“偶尔用到”，“从来不用”的消费者仅占2.83%。调查充分显示，从目前消费者的消费习惯来看，一次性餐具在餐馆仍然被广泛使用。
[0006]目前餐饮行业为了使一次性餐具表面上看起来很干净，误导消费者放心使用，但其实这些所谓干净的一次性餐具是经过用化学物质药水(如克霉唑、富马酸二甲酯等)浸泡过，但是相关企业并没有相关的操作规程来规范操作或者制约清洁工作人员为了偷懒，在清洗一次性餐具时清洗不彻底或者根本就不洗，造成了这些化学物质大量残留，而消费者在不知情的情况下，使用这些所谓干净的一次性餐具，很容易造成化学物质中毒，对身体造成一定的危害，因此很有必要来建立一套完整的检测方法，用于日常的检验检测的需要。
【发明内容】
[0007]本发明的目的是提供一种一次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法，本检测方法操作简单、灵敏度高、检测限低。
[0008]本发明所采用的技术方案是，一种一次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施:
[0009]步骤1、样品前处理:选取餐厅用一次性饭碗，碟子，塑料性饭盒各双份，加1mL甲醇溶液静止15min，然后置于超声波水浴中处理15min ;冷却至室温，用醋酸溶液调节pH值至5.7，转移试样溶液至25mL容量瓶中，用水分次淋洗，使完全转移，并用水定容、混匀，溶液经0.45 μ m有机相滤膜过滤，待利用高效液相色谱仪对样品溶液进行检测；
[0010]步骤2、液相色谱检测，将步骤I中定容的提取液采用高效液相色谱仪检测，液相色谱检测条件:色谱柱为:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱；流动相为:0.05mol/l磷酸二氢钾溶液-甲醇(30: 70，用10%磷酸溶液调节pH值至5.7?5.8);流速1.0ml/min ;柱温300C ;紫外检测器波长215nm ;进样量为10μ I。
[0011]本发明的特点还在于，
[0012]调节流动相中pH值的缓冲液为10%磷酸溶液。
[0013]富马酸二甲酯/克霉唑标准液按照以下方法配制:分别称取富马酸二甲酯标准物质和克霉唑标准物质25mg ;用甲醇充分溶解，并定容至25mL，摇匀，贮存于O?4°C冰箱中。
[0014]有机相滤膜采用尼龙材质，参数为:13mm*0.45μπι。
[0015]本发明的有益效果是:该方法中富马酸二甲酯样品回收率为94.8%?103.9%，最低检测限为0.1μ g/mL，相对标准偏差为0.2%?3.9% ;克霉唑的样品回收率为96.7%?103.5%，最低检测限为0.2μ g/mL，相对标准偏差为0.7%?2.1%。本法操作简便，结果准确，精密度高，具有重要的实际应用价值。
【专利附图】
【附图说明】
[0016]图1是本发明富马酸二甲酯标准品的标准溶液图谱；
[0017]图2是本发明克霉唑标准溶液图谱；
[0018]图3是本发明富马酸二甲酯/克霉唑混标高效液相色谱图；
[0019]图4是本发明富马酸二甲酯标准溶液浓度与响应值的线性关系；
[0020]图5是本发明克霉唑标准溶液浓度与响应值的线性关系。
【具体实施方式】
[0021]下面结合附图和【具体实施方式】对本发明进行详细说明。
[0022]本发明提供一种一次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法，具体按照以下步骤实施:
[0023]步骤1、样品前处理:选取餐厅常规用饭碗，碟子，塑料性饭盒各双份，加1mL甲醇溶液静止15min,然后置于超声波水浴中处理15min ;冷却至室温,用醋酸溶液调节pH值至
5.7，转移试样溶液至25mL容量瓶中，用水分次淋洗，使完全转移，并用水定容、混匀，溶液经0.45 μ m有机相滤膜过滤，待利用高效液相色谱仪对样品溶液进行检测；
[0024]步骤2、液相色谱检测，将步骤I中定容的提取液采用高效液相色谱仪检测，液相色谱检测条件:色谱柱为:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱；流动相为:0.05mol/l磷酸二氢钾溶液-甲醇(30: 70，用10%磷酸溶液调节pH值至5.7?5.8);流速1.0ml/min ;柱温300C ;紫外检测器波长215nm ;进样量为10μ I。
[0025]其中，调节流动相中pH值的缓冲液为10%磷酸溶液。
[0026]富马酸二甲酯/克霉唑标准液按照以下方法配制:分别称取富马酸二甲酯标准物质和克霉唑标准物质25mg ;用甲醇充分溶解，并定容至25mL，摇匀，贮存于O?4°C冰箱中。有机相滤膜采用尼龙材质，参数为:13mm*0.45 μ m。
[0027]实施例1
[0028]一次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法，具体按照以下步骤实施:
[0029]步骤1、样品前处理:选取餐厅用一次性饭碗，碟子，塑料性饭盒各双份，加1mL甲醇溶液静止15min，然后置于超声波水浴中处理15min ;冷却至室温，用醋酸溶液调节pH值至5.7，转移试样溶液至25mL容量瓶中，用水分次淋洗，使完全转移，并用水定容、混匀，溶液经0.45 μ m有机相滤膜过滤，待利用高效液相色谱仪对样品溶液进行检测；
[0030]步骤2、液相色谱检测，将步骤I中定容的提取液采用高效液相色谱仪检测，液相色谱检测条件:色谱柱为:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱；流动相为:0.05mol/l磷酸二氢钾溶液-甲醇(30: 70，用10%磷酸溶液调节pH值至5.7?5.8);流速1.0ml/min ;柱温300C ;紫外检测器波长215nm ;进样量为10μ I。
[0031]1、其标准曲线和线性范围
[0032]配制富马酸二甲酯/克霉唑混合液:分别称取富马酸二甲酯标准物质和克霉唑标准物质约25mg，精密称定。用甲醇充分溶解，并定容至25mL，摇匀，贮存于O?4°C冰箱中；以流动相为溶剂，配制成富马酸二甲酯/克霉唑含量分别为0.5、1.0,2.0,5.0,8.0、16.0、20.0,40.0、100.0 μ g/mL的标准系列，在规定的色谱条件下进行测定，图1_图3分别是富马酸二甲酯标准溶液、克霉唑标准溶液和富马酸二甲酯/克霉唑标准溶液图谱，图4-图5分别是富马酸二甲酯标准溶液、克霉唑标准溶液系列标准溶液的液相色谱响应值与浓度的线性关系。测定结果表明，在该浓度范围内，峰面积与浓度呈线性关系，符合定量要求。
[0033]2、检出限
[0034]以空白瓷碗为样品，分别添加富马酸二甲酯和克霉唑，将含量依次降低的富马酸二甲酯和克霉唑加入到样品中去，对每个浓度样品测定3次，记录每次测得S/N值，结果显示，当信噪比S/N = 3，定容体积为25mL时，本方法富马酸二甲酯的最低检出限为0.1 μ g/mL,克霉唑的最低检出限为0.2 μ g/mL。
[0035]3、准确度及精密度
[0036]选取餐饮中常规餐具瓷饭碗、瓷碟子和塑料制饭盒三类样品，按本方法确定的条件，进行3水平添加回收试验，每个添加水平取2个平行样，回收率与精密度数据见表1。
[0037]表1不同样品中富马酸二甲酯/克霉唑的回收率测定结果
[0038]
【权利要求】
1.一种一次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施: 步骤1、样品前处理:选取餐厅用一次性饭碗，碟子，塑料性饭盒各双份，加1mL甲醇溶液静止15min,然后置于超声波水浴中处理15min ;冷却至室温,用醋酸溶液调节pH值至5.7，转移试样溶液至25mL容量瓶中，用水分次淋洗，使完全转移，并用水定容、混匀，溶液经0.45 μ m有机相滤膜过滤，待利用高效液相色谱仪对样品溶液进行检测； 步骤2、液相色谱检测，将步骤I中定容的提取液采用高效液相色谱仪检测，液相色谱检测条件:色谱柱为:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱；流动相为:0.05mol/l磷酸二氢钾溶液-甲醇(30: 70，用10%磷酸溶液调节pH值至5.7?5.8);流速1.0ml/min ;柱温30°C ;紫外检测器波长215nm ;进样量为1y I。
2.根据权利要求1所述的一次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法，其特征在于，调节流动相中PH值的缓冲液为10%磷酸溶液。
3.根据权利要求1所述的一次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法，其特征在于，所述富马酸二甲酯/克霉唑标准液按照以下方法配制:分别称取富马酸二甲酯标准物质和克霉唑标准物质25mg ;用甲醇充分溶解，并定容至25mL，摇匀，贮存于O?4°C冰箱中。
4.根据权利要求1所述的一次性餐具中残留克霉唑及富马酸二甲酯的检测方法，其特征在于，所述有机相滤膜采用尼龙材质，参数为:13mm*0.45 μ m。
【文档编号】G01N30/02GK104133015SQ201410360274
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年7月28日 优先权日:2014年7月28日
【发明者】吴美香, 谭骁彧, 欧阳黎明 申请人:吴美香, 谭骁彧