快速粗测总糖含量的方法
【专利摘要】一种快速粗测总糖含量的方法，其方法步骤为：取含量37%的盐酸，加水稀释制取盐酸溶液，盐酸与水比例为1:3，加入0.5g～1g待测样品，将其混合液加热煮沸5～10分钟，快速冷却到室温，然后使用NaOH调节PH值4.4～6.2之间，定容到250ml，再使用斐林试剂法检测计算出溶液中还原糖含量，以计算出的还原糖含量再乘以稀释倍数即得总糖含量，本发明的有益效果是控制单样品检测时间在30分钟，较原始方法可节省检测时间1.5-2H小时，大大提高工作效率，不使用水浴设备，工作时间短，节省空间、能源及设备损耗，可以在短时间内为发酵过程提供中间样品总糖数据支持，有效控制补糖条件，节约成本，提高发酵转化率。
【专利说明】快速粗测总糖含量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于检测【技术领域】，更具体地说是一种发酵过程中快速粗测总糖含量的 方法。
【背景技术】
[0002] 糖类包括多糖、双糖和单糖，其中单糖和某些双糖具有游离的羰基，具有还原性， 成为还原糖，多糖和蔗糖无还原性。还原糖利用糖的还原性，与斐林试剂中的CuS04中的二 价铜离子还原为一价铜，生成Cu20红色沉淀，蓝色的斐林试剂溶液因失去部分二价铜离子 而脱色，脱色的程度与溶液中还原性糖含量成正比关系，在590nm的波长下比色测定吸光 度，根据吸光度的减少值查标准曲线得到还原糖的质量，即可计算出所测样品中还原糖的 含量。在发酵行业需要用到大量的糖源，对其中总糖含量的检测是必不可少的，总糖包括具 有还原性的还原糖与无还原性的多糖和蔗糖，而且部分菌种发酵是可以利用多糖的，这也 就需要对发酵原物料及发酵中间样品进行总糖的含量检测。目前，多数采用的总糖含量的 检测方法需要历时至少2. 5?3小时才可以出结果，耗时耗能，无法满足中间样品总糖检测 的要求。
【发明内容】
[0003] 为了解决上述问题，本发明提供了一种可以快速检测总糖含量，单样品检测时间 大幅度缩短的快速粗测总糖含量的方法，其具体方案为：所述的快速粗测总糖含量的方法 其步骤为： 取含量37%的盐酸，加水稀释制取盐酸溶液，盐酸与水比例为1:3,加入0. 5g?Ig待测 样品，加入35ml蒸馏水，将其混合液加热煮沸5?10分钟，快速冷却到室温，然后使用氢氧 化钠调节PH值4. 4?6. 2之间，定容到250ml，再使用斐林试剂法检测计算出溶液中还原糖 含量，以计算出的还原糖含量再乘以稀释倍数即得总糖含量； 计算公式： 还原糖含量=(查标准曲线所得到还原糖质量mgX (提取液总体积/测定时取用体积） /样品质量X 100%) 总糖含量=(查标准曲线所得到水解后还原糖质量mgX稀释倍数)/样品质量X 100%)。
[0004] 本发明的有益效果是控制单样品检测时间在30分钟，较原始方法可节省检测时 间1. 5?2H小时，大大提高工作效率，不使用水浴设备，工作时间短，节省空间、能源及设备 损耗，可以在短时间内为发酵过程提供中间样品总糖数据支持，有效控制补糖条件，节约成 本，提高发酵转化率。
【具体实施方式】
[0005] 为了便于公众更好地掌握本发明的实施方法，本发明具体的实施方法步骤为： 取含量37%的盐酸，加水稀释制取盐酸溶液，盐酸与水比例为1:3,加入Ig待测样品，力口 入35ml蒸馏水，加热煮沸5分钟后，快速冷却到室温，然后使用氢氧化钠调节PH在4. 4? 6. 2之间，定容到250ml，再使用斐林试剂法检测计算出溶液中还原糖含量，以计算出的还 原糖含量再乘以稀释倍数即得总糖含量； 计算公式： 还原糖含量=(查标准曲线所得到还原糖质量mgX (提取液总体积/测定时取用体积） /样品质量X 100%) 总糖含量=(查标准曲线所得到水解后还原糖质量mgX稀释倍数)/样品质量X 100%)。
[0006] 本发明的有益效果是控制单样品检测时间在30分钟，较原始方法可节省检测时 间1. 5?2H小时，大大提高工作效率，不使用水浴设备，工作时间短，节省空间、能源及设备 损耗，可以在短时间内为发酵过程提供中间样品总糖数据支持，有效控制补糖条件，节约成 本，提高发酵转化率。
[0007] 附：葡萄糖标准曲线的制作 取7支试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：
【权利要求】
1.快速粗测总糖含量的方法，其方法步骤为： 取含量37%的盐酸，加水稀释制取盐酸溶液，盐酸与水比例为1:3,加入0. 5g?lg待测 样品，加入35ml蒸馏水，将其混合液加热煮沸5?10分钟，快速冷却到室温，然后使用NaOH 调节PH值4. 4?6. 2之间，定容到250ml，再使用斐林试剂法检测计算出溶液中还原糖含 量，以计算出的还原糖含量再乘以稀释倍数即得总糖含量； 计算公式： 还原糖含量=(查标准曲线所得到还原糖质量mgX (提取液总体积/测定时取用体积） /样品质量X 100%); 总糖含量=(查标准曲线所得到水解后还原糖质量mgX稀释倍数)/样品质量X 100%)。
【文档编号】G01N21/79GK104237226SQ201410439357
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年9月1日 优先权日:2014年9月1日
【发明者】赵杰, 徐静, 陈浩然 申请人:梁山正大菱花生物科技有限公司