红曲红色素光稳定性的测定方法
【专利摘要】本发明涉及一种红曲红色素光稳定性的测定方法，属于食品添加剂及其检测方法领域。所述的红曲红色素光稳定性的测定方法，包括以下步骤：先将市售的粉状红曲色素或膏状红曲色素进行分离，得到红色、桔红色和黄色色素，将所得到的色素分别溶于蒸馏水中配成一定浓度的色素液，并以蒸馏水为空白，用紫外可见分光光度计测定其初始吸光度。取一定量的色素液置于Φ12cm的平皿中，将平皿置于4OW紫外灯下距离15cm照射，每个20min取出，测吸光度。本发明具有准确度高、重复性高、操作简便等特点。
【专利说明】红曲红色素光稳定性的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种红曲红色素光稳定性的测定方法，属于食品添加剂及其检测方法 领域。
【背景技术】
[0002] 红曲色素的光稳定性不高，这是众所周知的，对于其光稳定性的测定方法大致有 以下几种：一是采用太阳光照的方法，配置一定浓度的色素液置于透明玻璃容器中，然后放 在太阳光下照射，隔一定时间测定色素液的色价，用照射后的色价除以照射前的色价即为 色素的保存率。更准确的测定是将太阳光能量换算成langeys(5001angleys相当于夏日太 阳光照射一天的能量）来衡量照射强度。二是用紫外灯照射的方法，将盛有一定浓度色素 液的容器（试管或烧杯等）放置于距离紫外灯（40W，30w)下一定距离（15cm，25cm)处照 射，每隔一定时间测定液体色价，计算色价保存率。三是将分离到的水溶性红曲红色素在水 溶液中调吸光度为〇. 5 (500nm)，置于Pyrextube中，于自然光下放置，测定500nm下吸光度 的变化。以上所有测定方法中均涉及到五方面的因素：照射光源，照射距离，色素液照射面 积，照射前色素液的吸光度和照射时间。照射光源中太阳光和自然光都不是稳定可靠的光 源，其光照能量随气候变化而不同，唯有紫外光在特定功率下光能较稳定，因而紫外灯照射 法测定红曲色素光稳定性较为可靠。有机物对紫外光的吸收与距离的关系很大。太近不 能区分出不同红曲色素间光稳定性的差别，太远测定时间又太长，不便于操作，根据文献报 道，距离15-25cm比较适宜。玻璃可吸收90%以上的紫外光，所以以上文献所用透明容器是 玻璃制造的话，用紫外灯照射测定的方法失去意义。在紫外灯下，同一色素液置于试管中和 置于烧杯中测定光稳定性，二者结果肯定差别很大。对于一定量色素液，紫外照射面积的大 小对测定结果肯定有很大的影响，这实质上是一个色素液的厚度问题。另外，根据有机光化 学知识，有机染料的光褪色主要原因是氧化反应，其机理是有机染料受光照射转化为激发 三重态。此激发三重态的能量转移给氧，使氧成为激发单重态，单重态氧作为氧化剂，与基 态染料分子作用，经过烯型氢化过氧化物、对氧六圆或过氧化物中间体而褪色。当有机染料 处于激发三重态时，测定特征波长吸光度，有机物分子的吸光度会因光照而升高，随后因能 量转移而下降。因而要准确测定红曲色素光稳定性应选择合适的色素液初始光照浓度。
[0003] 因为，研究一种准确度高、重复性高、操作简便的红曲红色素光稳定性的测定方法 很有必要。
【发明内容】
[0004] 本发明旨在提供一种准确度高、重复性高、操作简便的红曲红色素光稳定性的测 定方法。
[0005] 所述的红曲红色素光稳定性的测定方法，包括以下步骤： 先将市售的粉状红曲色素或膏状红曲色素进行分离，得到红色、桔红色和黄色色素，将 所得到的色素分别溶于蒸馏水中配成一定浓度的色素液，并以蒸馏水为空白，用紫外可见 分光光度计测定其初始吸光度。取一定量的色素液置于〇 12cm的平皿中，将平皿置于40W紫外灯下距离15cm照射，每个20min取出，测吸光度，色素保存率=(照射后的吸光度/照 射前的吸光度）X100%。
[0006]优选的，本发明所述的红曲色素的分离方法为将市售的粉状红曲色素或膏状红曲 色素先用氯仿：甲醇=50 :50提取，再过氯仿浸泡过的硅胶柱，先用氯仿：甲酵=90 :10洗，除 去极性小的游离色素，再用氯仿：甲酵=50 :50洗，分离得到色素再用硅胶板薄层层析，层析 剂为氯仿：甲醇：水=65 :25 :4。
[0007] 更优选的，本发明所述的紫外可见分光光度计的测定波长为红色、桔红色和黄色 色素液分别为490nm、374nm、367nm。
[0008]进一步优选的，本发明所述的色素液浓度为0.01%，初始吸光度为1.089,色素液 的用量为在平皿中厚度为4. 5mm。
[0009]通常市售红曲红色素粉中含有相当量的桔红色色素和黄色色素（据测定，二者含 量分别为6%和4%左右），这些色素与红色素产自由基能力不同，它们含量的多少会影响红 曲红色素中主要成分红色素光稳定性的弱定，因而应首先将三种色素分离，再测定红色素 的光稳定性。
[0010] 本发明所述的测定方法具有准确度高、重复性高、操作简便等特点。经测定，红曲 红色素中红、桔红和黄三种色素分别在水的光稳定性结果，紫外光照lh后，红色素保存率 为35 %，桔红色为0,黄色素为94%，可见黄色素是红曲色素中对光最稳定成分，桔红色对 光最不稳定。
【具体实施方式】
[0011] 实施例一： 将市售的粉状红曲色素或膏状红曲色素先用氯仿：甲醇=50 :50提取，再过氯仿浸泡过 的硅胶柱，先用氯仿：甲酵=90 :10洗，除去极性小的游离色素，再用氯仿：甲酵=50 :50洗， 分离得到色素再用硅胶板薄层层析，层析剂为氯仿：甲醇：水=65 :25 :4。然后得分离得到 的红色、桔红色和黄色色素，将所得到的色素分别溶于蒸馏水中配成一定〇. 01%的色素液， 并以蒸馈水为空白，用紫外可见分光光度计分别在490nm、374nm、367nm下测定红色、桔红 色和黄色色素液的初始吸光度。然后取一定量的色素液置于012cm的平皿中，色素液在平 皿中的厚度为4. 5mm，将平皿置于40W紫外灯下距离15cm照射，每个20min取出，测度吸光 度，色素保存率=(照射后的吸光度/照射前的吸光度）X100%。测定结果如表-1所示。
[0012] 表-1红曲红色素中三种色素的光稳定性
【权利要求】
1. 红曲红色素光稳定性的测定方法，包括以下步骤： 先将市售的粉状红曲色素或膏状红曲色素进行分离，得到红色、桔红色和黄色色素，将 所得到的色素分别溶于蒸馏水中配成一定浓度的色素液，并以蒸馏水为空白，用紫外可见 分光光度计测定其初始吸光度； 取一定量的色素液置于〇 12cm的平皿中，将平皿置于40W紫外灯下距离15cm照射，每 个20min取出，测吸光度，色素保存率=(照射后的吸光度/照射前的吸光度）X 100%。
2. 如权利要求1所述的红曲红色素光稳定性的测定方法，其特征在于所述的红曲色 素的分离方法为将市售的粉状红曲色素或膏状红曲色素先用氯仿：甲醇=50 :50提取，再过 氯仿浸泡过的硅胶柱，先用氯仿：甲酵=90 :10洗，除去极性小的游离色素，再用氯仿：甲酵 =50 :50洗，分离得到色素再用硅胶板薄层层析，层析剂为氯仿：甲醇：水=65 :25 :4。
3. 如权利要求1所述的红曲红色素光稳定性的测定方法，其特征在于所述的紫外可见 分光光度计的测定波长为红色、桔红色和黄色色素液分别为490nm、374nm、367nm。
4. 如权利要求1所述的红曲红色素光稳定性的测定方法，其特征在于所述的色素液浓 度为0. 01%，初始吸光度为1. 089,色素液的用量为在平皿中厚度为4. 5mm。
【文档编号】G01N21/33GK104330375SQ201410565033
【公开日】2015年2月4日 申请日期:2014年10月22日 优先权日:2014年10月22日
【发明者】李勇, 刘文斌 申请人:西安莹朴生物科技股份有限公司