一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检测试剂盒的制作方法
【专利摘要】本实用新型公开了一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，包括上盖体、下盖体、硝酸纤维素薄膜以及吸水纸，其中，所述上盖体上设置有圆形窗口，所述硝酸纤维素薄膜与该圆形窗口对应设置，所述硝酸纤维素薄膜设置为圆形，在该硝酸纤维素薄膜的圆形区域内在圆心处设置检测区，沿着圆周方向的区域内平均设置有包被有一定质量人血清白蛋白单克隆抗体的第一质控区、第二质控区和第三质控区；所述下盖体的内侧设置有有分子筛干燥剂，用于保持盒体内部空间干燥。所述吸水纸设置与所述硝酸纤维素薄膜与所述下盖体之间，与硝酸纤维素薄膜紧密贴合。本实用新型的检测试纸条检测结果更加准确，性能更加稳定，特异性更好，敏感度低,成本低，操作方便。
【专利说明】一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检测试剂盒
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种尿微量白蛋白检测装置，尤其是涉及一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检测试剂盒。
【背景技术】
[0002]糖尿病肾病(DN)是糖尿病的严重并发症之一，也是导致糖尿病病人死亡的重要原因。随着糖尿病发病率的增加，DN患者增多，因其发病隐蔽，进展缓慢，如果任其发展，当临床上出现持续性蛋白尿时，肾脏病变已不属早期，肾脏已出现了不可逆的病变，再用药物也无法逆转。因此，早期发现糖尿病肾病有其十分重要的意义。
[0003]2003年11月14日“世界防治糖尿病日”的主题是“糖尿病会损害你的肾脏，立即行动——预防糖尿病肾病”。
[0004]微量白蛋白尿是提不肾脏和心血管疾病危险的标志物。糖尿病病人如出现尿微量白蛋白，表明已出现早期糖尿病肾损害，应加强治疗，以减慢糖尿病肾病的发展。I型糖尿病人自青春期起或病程达5年以后，以及2型糖尿病自诊断日起即应进行微量白蛋白尿的测定。临床研究表明，及早进行尿微量白蛋白的检测，并通过药物干预，可有效减慢肾病进展，延缓或避免透析和肾移植。
[0005]高血压患者的尿白蛋白排泄率明显高于正常人，而且与收缩压及舒张压均正相关，对高血压导致的心血管病患者尿微量白蛋白是很灵敏的预报指标。尿微量白蛋白测定是检测血管疾患的简便方法。
[0006]目前尿微量白蛋白的检测方法中，尿微量白蛋白的方法有酶联免疫法，该方法操作复杂，实验结果波动大，免疫胶体金层析法，结果不够精确，没法确切的反应病程及结果，此外，现在市场上实用的试剂盒容易吸水变潮湿，导致生物活性物质失活变性，导致检测结果不可靠，而且盒体的密封性也不好，亟待进一步改进。
实用新型内容
[0007]本实用新型的目的是提供一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，使其具有结构简单、提高检测准确度，稳定性好，有效期长的优点。
[0008]为解决上述技术问题，本实用新型一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，包括上盖体、下盖体、硝酸纤维素薄膜以及吸水纸，其中，所述上盖体上设置有圆形窗口，所述硝酸纤维素薄膜与该圆形窗口对应设置，所述吸水纸设置与所述硝酸纤维素薄膜与所述下盖体之间，并与硝酸纤维素薄膜紧密贴合；
[0009]所述硝酸纤维素薄膜设置为圆形，在该硝酸纤维素薄膜的圆形区域内在圆心处设置检测区，沿着圆周方向的区域内平均设置有包被有一定质量人血清白蛋白单克隆抗体的第一质控区、第二质控区和第三质控区；
[0010]所述下盖体的内侧设置有有分子筛干燥剂，用于保持盒体内部空间干燥。
[0011]所述检测区、所述第一质控区、第二质控区以及第三质控区中包被的人血清白蛋白单克隆抗体质量相等。
[0012]还包括试剂瓶，所述试剂瓶内装有胶体金标记的人血清白蛋白，该胶体金颗粒的粒径为40nm.
[0013]所述圆形窗口处设置有透明的密封结构。
[0014]还包括滴管，所述滴管用于从试剂瓶中取胶体金标记的尿微量白蛋白。
[0015]所述人血清白蛋白单克隆抗体采用鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体。
[0016]还包括含有三个不同浓度的人血清白蛋白标准液试剂瓶。
[0017]所述上盖体与所述下盖体之间通过密封配合。
[0018]本实用新型一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，检测尿微量白蛋白时，结果更准确，保质期更长，可达到两年，检测结果更稳定，成本低，方便。
【专利附图】
【附图说明】
[0019]图1为本实用新型实用状态示意图。
[0020]图2为本实用新型外观示意图。
[0021]图3为本实用新型的硝酸纤维素薄膜的结构示意图。
[0022]图4为本实用新型的吸水纸示意图。
[0023]图5为本实用新型的下盖体的结构示意图。
【具体实施方式】
[0024]请配合参阅图1所示，一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，包括上盖体1、下盖体6、硝酸纤维素薄膜3以及吸水纸4，其中，上盖体I上设置有圆形窗口 2，硝酸纤维素薄膜3与该圆形窗口 2对应设置，吸水纸4设置与硝酸纤维素薄膜3与下盖体6之间，并与硝酸纤维素薄膜3紧密贴合；硝酸纤维素薄膜3设置为圆形，在该硝酸纤维素薄膜3的圆形区域内在圆心处设置检测区T34，沿着圆周方向的区域内平均设置有包被有一定质量尿微量白蛋白单克隆抗体的第一质控区C131、第二质控区C232和第三质控区C333;下盖体6的内侧设置有分子筛干燥剂5，用于保持盒体内部空间干燥；检测区34、第一质控区31、第二质控区32以及第三质控区33中包被的人血清白蛋白单克隆抗体质量相等。
[0025]本实用新型的检测试剂盒还包括试剂瓶(图中未示出)，试剂瓶内装有胶体金标记的人血清白蛋白，该胶体金颗粒的粒径为40nm.
[0026]该圆形窗口 2处设置有透明的密封结构(图中未示出)，本实用新型还包括滴管7，该滴管7用于从试剂瓶中取胶体金标记的人血清白蛋白。人血清白蛋白单克隆抗体采用鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体。检测试剂盒还包括含有三个不同浓度的尿微量白蛋白标准液的试剂瓶。上盖I体与下盖体6之间通过密封配合。
[0027]本实用新型主要生物活性原料包括鼠抗尿微量白蛋白单克隆抗体:Merck公司产品；Gold Chloride (HAuC14.3H20)和 BSA Fract1n V:EMD Chemical Inc 产品。硝酸纤维微孔滤膜(NC膜):汕头伊能膜业有限公司产品，孔径为8 μ m。标准品:人血清白蛋白(HSA Fract1n V High Purity):Merck 公司产品，准确稀释,标定，-20 备用。
[0028]人血清白蛋白的胶体金标记:取100毫升胶体金，粒径为40nm，使用0.2M碳酸钾调整至PH8.0，在磁力搅拌下，一次性加入人血清白蛋白I毫克，搅拌10分钟后静置10分钟；再加入稳定剂(2%BSA+0.1%PEG20000)，搅拌30分钟；采用12000转离心40分钟，小心吸取上清，沉淀为胶体金-人血清白蛋白结合物，备用。稀释后测定波长521nm处的OD值，将原胶体金标记物使用金标工作液(0.5M硼酸盐(PH9.0)+2%Tween+5%蔗糖+1%BSA+1%水解酪蛋白+0.1%PVA)稀释至300D。将胶体金标记的人血清白蛋白装瓶于4°C储存。
[0029]硝酸纤维素薄膜，分别将配置一定浓度的尿微量白蛋白单克隆抗体的分别点样到检测区，第一质控区、第二质控区以及第三质控区。
[0030]分别配置浓度为30mg/L，100mg/L以及200mg/L的人血清白蛋白溶液，用标准液试剂瓶分装于4°C保存。
[0031]检测方法，检测时，将浓度为30mg/L，100mg/L以及200mg/L的人血清白蛋白溶液分别滴加到第一质控区Cl、第二质控区C2以及第三质控区C3，同时将样本溶液滴加到检测区T，加完后，分别往第一质控区Cl、第二质控区C2、第三质控区C3以及检测区T滴加洗脱液。洗脱完毕后，观察质控区和检测区的颜色。该洗脱液采用PH为5-6的硼酸盐缓冲溶液。
[0032]检测结果，若检测区的颜色比第三质控区浅，证明样本溶液中的尿微量白蛋白的含量大于200mg/L，若检测区的颜色介于第三质控区的颜色和第二质控区的颜色之间，说明样本溶液中的尿微量白蛋白的浓度介于100mg/L与200mg/L之间，若检测区的颜色介于第一质控区与第二质控区之间时，说明样本溶液的尿微量白蛋白的含量为30mg/L与100mg/L之间。若检测区的颜色比第一质控区的颜色深，说明样本溶液中的尿微量白蛋白的浓度小于 30mg/L。
[0033]本实用新型的检测试纸条检测结果更加准确，性能更加稳定，特异性更好，敏感度低，成本低，操作方便。
[0034]人血清白蛋白(HAS)是循环系统中的一种重要的蛋白，对增加循环血容量和维持血浆渗透压起主要作用。另外，它还是体内许多小分子的载体蛋白。尿中出现微量白蛋白是糖尿病、高血压等并发肾病的早期症状，其测定不仅可对肾脏损伤做早期诊断，而且可为治疗时的监控、预后判断提供依据。
[0035]微量白蛋白尿是指在尿中出现微量白蛋白。白蛋白是一种血液中的正常蛋白质，但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。微量白蛋白尿反映肾脏异常渗漏蛋白质。微量尿白蛋白是指白蛋白在尿中非正常的少量存在(> 30mg/天)，它通常被认为高血压并发症、肾功能衰竭、胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)和非胰岛素依赖型糖尿病(NIDM)、心血管并发症的早期标记。在健康人群中，尿白蛋白的排泄量在0-30mg内。尿白蛋白的排泄率不断增加至30-300mg/天可视为糖尿病肾病和其它血管并发症的早期临床标记。美国糖尿病协会推荐胰岛素依赖糖尿病患者每年定期检测尿白蛋白。虽然尿液中白蛋白在病理情况下的分泌可高达1000mg / L，但临床所关心的主要是30?10mg / L以及100?200mg / L的浓度范围。
[0036]以上仅为本实用新型的较佳实施例，当不得以此限定本实用新型实施的技术范围，因此凡参考本实用新型的说明书内容所作的简单等效变化与修饰，皆应仍属本实用新型的保护范围。
【权利要求】
1.一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，其特征在于包括上盖体、下盖体、硝酸纤维素薄膜以及吸水纸，其中，所述上盖体上设置有圆形窗口，所述硝酸纤维素薄膜与该圆形窗口对应设置，所述吸水纸设置与所述硝酸纤维素薄膜与所述下盖体之间，并与硝酸纤维素薄膜紧密贴合； 所述硝酸纤维素薄膜设置为圆形，在该硝酸纤维素薄膜的圆形区域内在圆心处设置检测区，沿着圆周方向的区域内平均设置有包被有一定质量人血清白蛋白单克隆抗体的第一质控区、第二质控区和第三质控区； 所述下盖体的内侧设置有有分子筛干燥剂，用于保持盒体内部空间干燥。
2.根据权利要求1所述的一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，其特征在于，所述检测区、所述第一质控区、第二质控区以及第三质控区中包被的人血清白蛋白单克隆抗体质量相等。
3.根据权利要求1所述的一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，其特征在于还包括试剂瓶，所述试剂瓶内装有胶体金标记的人血清白蛋白，该胶体金颗粒的粒径为40nmo
4.根据权利要求1所述的一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，其特征在于，所述圆形窗口处设置有透明的密封结构。
5.根据权利要求1所述的一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，其特征在于还包括滴管，所述滴管用于从试剂瓶中取胶体金标记的尿微量白蛋白。
6.根据权利要求1所述的一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，其特征在于，所述人血清白蛋白单克隆抗体采用鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体。
7.根据权利要求1所述的一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，其特征在于还包括含有三个不同浓度的人血清白蛋白标准液试剂瓶。
8.根据权利要求1所述的一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检试剂盒，其特征在于，所述上盖体与所述下盖体之间通过密封配合。
【文档编号】G01N33/68GK204008663SQ201420395108
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年7月16日 优先权日:2014年7月16日
【发明者】李娟
申请人:李娟