一种对三聚磷酸盐中不同形态磷酸盐的检测的制作方法

本发明属于食品添加剂检验领域。具体涉及三聚磷酸盐中不同形态磷酸盐含量的测定方法。
背景技术：
：三聚磷酸盐是世界各国应用最广泛的食品品质改良剂，主要用于保持食品的水分、调节pH值、乳化、螯合金属离子、增加离子强度等。其是肉类工业中必不可少的基料，不仅可以提高肉的保水性，减少蒸煮损失，还可以提高嫩度，改善色泽，增加营养。但是多聚磷酸盐会促进血液凝结，其降解产物磷酸盐也可能增大心脑血管疾病发生的可能性。因此对多聚磷酸盐含量测定的研究意义重大。随着我国食品工业的不断发展，对磷酸盐产品质量要求越来越高，国外对我国出口的磷酸盐产品质量要求也日趋严格。采用简易离子交换柱色谱法分离不同形态磷酸盐，然后用钼蓝分光光度比色法测定，器材简单、易操作、准确度较高，但是存在试剂用量大、环境污染大、方法繁琐费时、灵敏度不高等问题，且不能一次进样同时完成分离与测定。本实验采用离子色谱法测定食品添加剂三聚磷酸盐中不同形态磷酸盐的含量，与离子交换柱-分光光度法比较，测定结果无差异显著性，且具有分析时间短、检测限低、线性范围宽、灵敏度高、选择性好、污染少等优点。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题在于,提供一种一种离子色谱法对三聚磷酸盐中不同形态磷酸盐的检测，包括如下步骤：溶液的配制：NaOH淋洗液：称取130gNaOH于100ml超纯水中，配成饱和NaOH溶液，摇匀放在塑料瓶中放置至澄清。吸取中间澄清部分用超纯水配制100mmol/L的NaOH溶液。该溶液经0.45μm滤膜过滤，超声波脱气20～30min备用。标准储备溶液：分别精确称量配制1g/L的Na3PO4、Na4P2O7、Na5P3O10、Na3P3O9标准储备溶液。样品溶液：称取0.1000gNa5P3O10样品于水中溶解，定容于100ml容量瓶中摇匀，移取该溶液1.00ml定容至100ml，经0.45μm滤膜过滤备用。色谱条件用100mmol/L的NaOH溶液作为淋洗液进行梯度淋洗，流速为1.0ml/min，抑制电流为100mA，压力为800～900psi，进样量25μl。附图说明图1为混合标准溶液色谱图。图2为Na5P3O10样品溶液色谱图。具体实施方式下面将详细说明本发明的具体实施方式：1.仪器与试剂：仪器：DX-500型离子色谱仪美国Dionex公司；AS11型阴离子分离柱；AG11型阴离子保护柱；阴离子微膜抑制器；ED40电化学检测器；GP40四元低压混合梯度泵；自动进样器；AB201-E电子天平；微量移液器；KQ-100DB型数控超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司；Watersproplus超纯水仪。试剂：NaOH(GR)汕头市光华化学厂；磷酸钠(Na3PO4，AR)广州化学试剂厂；焦磷酸钠(Na4P2O7，AR)上海彭镇营房化工厂；三聚磷酸钠标准品(Na5P3O10)、三偏磷酸钠标准品(Na3P3O9)Sigma公司；Na5P3O10样品购自广西南宁。2.方法与结果溶液配制NaOH淋洗液：称取130gNaOH于100ml超纯水中，配成饱和NaOH溶液，摇匀放在塑料瓶中放置至澄清。吸取中间澄清部分用超纯水配制100mmol/L的NaOH溶液。该溶液经0.45μm滤膜过滤，超声波脱气20～30min备用。标准储备溶液：分别精确称量配制1g/L的Na3PO4、Na4P2O7、Na5P3O10、Na3P3O9标准储备溶液。样品溶液：称取0.1000gNa5P3O10样品于水中溶解，定容于100ml容量瓶中摇匀，移取该溶液1.00ml定容至100ml，经0.45μm滤膜过滤备用。分离条件梯度淋洗主要用于与固定相亲和力相差较大的多种组分的分离，通过梯度淋洗可调整各组分的保留时间从而达到最佳分离效果。PO43-、P2O74-、P3O105-、P3O93-离子的电荷数和离子半径相差较大，故与树脂的亲和力相差较大，等浓度淋洗难以达到高分离度。NaOH浓度小时P3O105-、P3O93-保留时间太长；NaOH浓度大时PO43-保留时间太短，与水中杂质峰重叠。分别量取1.00mlNa3PO4、Na4P2O7、Na5P3O10、Na3P3O9标准储备液，定容至100ml，将稀释后的溶液各自进样检测，根据各磷酸盐的保留时间确定淋洗液梯度洗脱的比例。梯度洗脱程序为：开始0.5min保持100mmol/LNaOH溶液与超纯水以体积比1:4混合，随后不断增大100mmol/LNaOH溶液的体积百分比，到12min时，100mmol/LNaOH溶液与超纯水的体积比为16:9。配制10mg/L等质量浓度的混合标准溶液进样检测，如图1所示，10min内PO43-、P2O74-、P3O105-、P3O93-分离较好。各磷酸盐的线性范围、检测限精确移取各磷酸盐标准储备溶液配制成各组分不同质量浓度的系列混合标准溶液，在选定的淋洗条件下进样检测，以峰面积A为纵坐标，质量浓度C(mg/L)为横坐标绘制标准曲线，线性回归方程见表2。配制0.5mg/L等质量浓度的混合标准溶液进样检测，根据噪声峰高(S/N=3)与样品浓度的关系计算各磷酸盐的检测限。结果如表1所示，线性相关系数及检测限较好。表1组分线性方程相关系数线性范围（mg/L）检测限（mg/L）正磷酸盐A=0.01059C+0.007260.99860.01~200.010焦磷酸盐A=0.0241C+0.004750.99730.15~200.033三聚磷酸盐A=0.05287C-0.011170.99960.50~150.063三偏磷酸盐A=0.03889C-0.006020.99940.04~150.022精密度实验在选定的色谱条件下，以10mg/L等质量浓度的混合标准溶液连续进样5次检测，根据保留时间和峰面积计算各磷酸盐组分的相对标准偏差，由表2可知，所测组分保留时间的相对标准偏差为0.38%～0.79%，峰面积的相对标准偏差为2.21%～6.96%，说明本方法对多聚磷酸盐的分离测定具有较高的灵敏度和较好的重现性。样品分离测定将Na5P3O10样品用超纯水溶解，溶液经过膜、脱气后进样检测，由图2可知，该方法能够较好地分离测定正磷酸盐、焦磷酸盐、三聚磷酸盐及三偏磷酸盐。往样品溶液中加入Na5P3O10标准溶液测定回收率，结果见表3。表2组分保留时间RSD（%）峰面积RSD(%)正磷酸盐0.382.21焦磷酸盐0.114.48三聚磷酸盐0.736.69三偏磷酸盐0.796.83表3组分含量（mg/L）加入量（mg/L）回收率（%）正磷酸盐0.0681.0106.89焦磷酸盐0.6422.597.45三聚磷酸盐9.1675.099.16三偏磷酸盐0.1201.0102.83当前第1页1 2 3