本发明涉及食品领域。具体地，本发明涉及测定样品中脂肪含量的方法。
背景技术：
脂肪含量是评价奶油、黄油等固态油脂类产品的重要指标，脂肪含量的高低将影响产品的风味口感、保质期等。
然而，目前测定脂肪含量的方法仍有待改进。
技术实现要素：
本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出了一种测定样品中脂肪含量的方法。该方法准确性强，操作简便、快速。
需要说明的是，本发明是基于发明人的下列发现而完成的：
GB5413.3-2010公开了两种测定脂肪含量的方法。第一法是用乙醚和石油醚抽提样品的碱水解液，通过蒸馏或蒸发去除溶剂，测定溶于溶剂中的抽提物的质量。但是，该方法步骤较繁琐，实验过程涉及较多有机溶剂，长期使用，会对人体会造成很大的伤害，而且实验用时较长，检测一个样品需要约5个小时，无法及时指导半成品指标在线监控，从而无法满足生产实际需求。
第二法是利用盖勃氏乳脂计，通过在乳中加入硫酸破坏乳胶质性和覆盖在脂肪球上的蛋白质外膜，离心分离脂肪后测量其体积。但是，该方法是针对液态、低脂肪样品进行检测的，无法准确地对脂肪含量较高的固态样品进行检测。
为此，本发明提出了一种测定样品中脂肪含量的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：(1)将样品与水进行混合，得到第一混合液；(2)将所述第一混合液倒入预先装有硫酸的乳脂计中，再向所述乳脂计中加入异戊醇，将所述乳脂计瓶口向下进行混合，得到第二混合液；(3)将装有所述第二混合液的乳脂计进行静置及第一水浴加热，并将装有所得到的第一加热产物的乳脂计进行离心，得到离心产物；(4)将装有所述离心产物的所述乳脂计进行第二水浴加热并记录读数；以及(5)基于下列公式计算所述样品中脂肪含量：脂肪含量％＝读数×11/m，式中m为所述样品的重量，以克计；读数为步骤(4)中所述读数，其中，步骤(3)和(4)中，所述乳脂计是瓶口向下进行的，所述样品为固态奶油或黄油，所述硫酸的浓度为90～91体积％，优选91体积％。
发明人发现，利用GB5413.3-2010第二法测定奶油或黄油中脂肪含量时，硫酸的浓度为98％，加入硫酸后溶液中形成焦黑色固体，经过深入分析，可能是硫酸浓度过高，会使蛋白过度碳化，形成的焦黑色固体干扰后续操作，读数困难，从而无法进行后续检测导致结果偏低或实验失败。进而，发明人经过大量实验发现，当硫酸的浓度为90～91体积％，能够准确地测定出脂肪含量，优选91体积％。若浓度过低，无法充分破坏乳胶质性和覆盖在脂肪球上的蛋白质外膜除去，不能使所有蛋白质都溶解，水相和脂肪相之间分离不好，从而导致检测结果偏低，无法准确测定脂肪含量。若浓度过高，会使蛋白过度碳化，形成的焦黑色固体干扰后续操作，读数困难，从而无法进行后续检测导致结果偏低或实验失败。由此，根据本发明实施例的测定样品中脂肪含量的方法准确性强，操作简便、快速。
根据本发明的实施例，上述测定样品中脂肪含量的方法还可以具有下列附加技术特征：
根据本发明的实施例，所述样品的质量为0.2～0.5g，优选0.3g。发明人经过大量实验得到最优添加量，由于奶油或黄油中脂肪含量过高，若添加量过多，将导致脂肪层过多，无法读数；若添加量过低，存在脂肪层最低端未达到刻度线，无法读数或检测结果偏低，误差大等问题。由此，根据本发明实施例的测定样品中脂肪含量的方法准确性强，操作简便、快速。
根据本发明的实施例，所述第一水浴加热和第二水浴加热分别独立地在65～70℃下进行5min。发明人经过大量实验得到最优水域温度，在此条件下使脂肪相与水相分离作用加速，便于脂肪完全迅速的分离。温度过高或过低都不利于脂肪的分离。具体地，水浴过程中，水面高度应高于乳脂计中液体的高度，第二水浴加热后，立即读取脂肪层的体积。由此，根据本发明实施例的测定样品中脂肪含量的方法准确性强，操作简便、快速。
根据本发明的实施例，步骤(1)中，所述水的体积为10mL，所述水的温度为60～70℃。发明人经过大量实验得到上述最优条件，若添加量过多，将超过刻度的量程，无法读数。具体地，将第一混合液分次沿着乳脂计的管壁慢慢加入预先装有硫酸的乳脂计中，使第一混合液与硫酸不混合。由此，根据本发明实施例的测定样品中脂肪含量的方法准确性强，操作简便、快速。
根据本发明的实施例，所述静置的时间为3～5min。静置的目的是使脂肪层浮到上层，与硫酸蛋白层分离，便于后续的读数。由此，根据本发明实施例的测定样品中脂肪含量的方法准确性强，操作简便、快速。
根据本发明的实施例，所述离心是在1100r/min的转速下进行5min。发明人经过大量实验得到上述最优离心条件，在此条件下能够有效地分离出溶于异戊醇的脂肪，且脂肪层界面清晰，便于后续读数。由此，根据本发明实施例的测定样品中脂肪含量的方法准确性强，操作简便、快速。
根据本发明的实施例，所述异戊醇的体积为1mL。发明人经过大量实验得到上述最优添加量。在此条件能够充分提取出样品中的脂肪，若添加量过少，将导致检测结果偏低。具体地，加入异戊醇后，塞上橡皮塞，使瓶口向下，同时用布裹以防冲出，用力振摇使其呈均匀棕色液体。由此，根据本发明实施例的测定样品中脂肪含量的方法准确性强，操作简便、快速。
根据本发明的实施例，所述硫酸的体积为10mL。发明人经过大量实验得到上述最优添加量，若添加量过少，无法充分破坏乳胶质性和覆盖在脂肪球上的蛋白质外膜除去，从而导致检测结果偏低；若添加量过高，将超过乳脂计的刻度量程，无法读数。
在本发明的上下文中，所有在此公开了的数字均为近似值。每一个数字的数值有可能会出现1％的差异。
另外，本发明提出了另一种测定样品中脂肪含量的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：1)准确称取0.3g固态奶油或黄油于10ml小烧杯中，加入10mL 65±5℃的蒸馏水混合，得到第一混合液；2)将所述第一混合液分次加入预先装有10mL硫酸的乳脂计中，使所述第一混合液不与所述硫酸混合，然后向所述乳脂计中加入1mL异戊醇，用橡皮塞塞住所述乳脂计的瓶口，使所述瓶口向下，同时用布包裹所述瓶口，振摇所述乳脂计，从而得到棕色的第二混合液；3)将所述乳脂计静置3～5min，然后将所述乳脂计置于65℃～70℃水浴锅中水浴5min，取出所述乳脂计后，置于乳脂离心机中以1100r/min的转速离心5min，再将所述乳脂计置于65℃～70℃水浴锅中，水浴锅的水面高于所述乳脂计中的脂肪层，5min后取出，记录读数；4)基于下列公式计算所述固态奶油或黄油中脂肪含量：脂肪含量％＝读数×11/m，式中m：所述固态奶油或黄油的重量(g)；读数：步骤3)中所述乳脂计读数。由此，根据本发明实施例的测定样品中脂肪含量的方法准确性强，操作简便、快速。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
需要说明的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。进一步地，在本发明的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。
下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
在该实施例中，按照下列方法测定奶油中脂肪含量：
1、试剂及仪器
硫酸：91mL浓硫酸(98％)缓慢溶于9mL煮沸并冷却的蒸馏水中，混匀、冷却，备用。
异戊醇；
乳脂离心机；
盖勃氏乳脂计：最小刻度值为0.1％；
10mL小烧杯；
天平：感量为0.1mg。
2、操作步骤
(1)准确称取0.3g固态奶油于10ml小烧杯中，加入10mL 65±5℃的蒸馏水混合，得到第一混合液；
(2)分数次沿着管壁小心加入预先装有10mL硫酸的乳脂计中，使第一混合液不与硫酸混合，然后加1mL异戊醇，塞上橡皮塞，使瓶口向下，同时用布裹以防冲出，用力振摇使其呈均匀棕色液体，得到第二混合液；
(3)将乳脂计静置3～5min(瓶口向下)，然后置于65℃～70℃水浴锅中水浴5min，取出乳脂计后，置于乳脂离心机中以1100r/min的转速离心5min，再置65℃～70℃水浴锅中，注意水浴锅的水面应高于乳脂计脂肪层，5min后取出，立即记录读数；
(4)基于下列公式计算固态奶油中脂肪含量：
脂肪含量％＝读数×11/m，
式中m：称取固态奶油的克数(g)；
读数：乳脂计读数。
实施例2准确性分析
比较利用实施例1方法及GB5413.3-2010第一法对奶油中脂肪含量进行检测，结果表1所示。可以看出，使用GB5413.3-2010第一法与实施例1方法的检测结果最大偏差为0.16％，最小偏差0.04％，均符合GB5413.3-2010规定的在重复性条件下脂肪含量≥15％，两次独立测定结果之差≤0.3g/100g的偏差要求，从而表明本发明的方法检测结果准确。
表1 实施例1和国标方法的检测结果
实施例3重复性检测
按照实施例1的方法测定奶油的含量，其中，每个样品设置两组平行组，结果如表2所示。
表2 重复性检测
通过以上数据分析，使用本发明方法对同一奶油样品中脂肪含量进行检测，检测结果在GB5413.3-2010第一法中规定的的范围内，即重复性条件下脂肪含量≥15％，两次独立测定结果之差≤0.3g/100g的偏差要求，从而表明本发明的方法重复性好。
对比例1
按照实施例1的方法测定奶油中脂肪含量，区别在于，硫酸浓度为85体积％。
表3 硫酸浓度优化检测结果
结果如表3所示，可以看出，对比例1的检测结果均偏低于实施例1的检测结果，最大差值为1.50，最小差值为0.10，从而表明如果硫酸浓度偏低，无法充分破坏乳胶质性和覆盖在脂肪球上的蛋白质外膜除去，不能使所有蛋白质都溶解，水相和脂肪相之间分离不好，从而导致检测结果偏低，无法准确测定脂肪含量。
对比例2
按照实施例1的方法测定奶油中脂肪含量，区别在于，硫酸浓度为95体积％。
表4 硫酸浓度优化检测结果
结果如表4所示，可以看出，对比例2中，共检测10组样品，其中5组样品由于碳化较严重，无法读数，导致实验失败，剩余5组样品，实验过程中也出现了不同程度的轻微碳化，乳脂计中有黑色结块，从实验结果也可以看出，与实施例1对比，结果均偏低，且差值均大于1％，所以，硫酸浓度过高，会使蛋白过度碳化，形成的焦黑色固体干扰后续操作，读数困难，从而无法进行后续检测导致结果偏低或实验失败。
对比例3
按照实施例1的方法测定奶油中脂肪含量，区别在于，固态奶油的称样量为0.1g。
表5 样品称样量优化对比检测结果
结果如表5所示，可以看出，对比例3中，共检测10组样品，其中只有1组样品检测结果符合GB5413.3-2010第一法中要求，即脂肪含量≥15％，两次独立测定结果之差≤0.3g/100g，2组样品由于脂肪层太少无法读数，其余7组结果均超出国标要求，均偏低于国标检测结果，说明样品添加量在0.1g时，存在脂肪层最低端未达到刻度线，无法读数或检测结果偏低，误差大等问题。
对比例4
按照实施例1的方法测定奶油中脂肪含量，区别在于，固态奶油的称样量为0.6g。
表6 样品称样量优化对比检测结果
结果如表6所示，可以看出，对比例4中，共检测10组样品，其中只有1组样品检测结果符合GB5413.3-2010第一法中要求，即脂肪含量≥15％，两次独立测定结果之差≤0.3g/100g，7组样品由于脂肪层太多无法读数，2组结果均超出国标要求。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。