一种清真牛羊肉生物毒素检测方法与流程

文档序号:11131463阅读:961来源:国知局

本发明属于食品检测技术领域,涉及一种食品检测方法,具体是一种清真牛羊肉生物毒素检测方法。



背景技术:

生物毒素是由动物、植物、微生物等在一定条件下产生的对其他生物物种有毒害并不可复制的化学物质,是一类重要的天然污染物。生物毒素又称天然毒素,种类繁多,分布广泛.已知化学结构的生物毒素有数千种,依据来源把生物毒素分为细菌毒素、真菌毒素、藻毒素、动物毒素、植物毒素等。生物毒素能够引起人和动物的急性中毒、致癌、致畸或致突变。

中国是牛羊肉生产大国,随着城乡居民的肉类消费结构的变化,牛羊肉消费量不断提高,牛羊肉消费在肉类消费结构中所占的比重总体也在提高,上市供应的牛羊肉生物毒素控制环节薄弱,牛羊肉的生物毒素污染比较普遍。

要从根本上解决这类食品安全问题,就必须对牛羊肉的生物毒素进行检测,而目前传统的生物毒素检测方法主要包括高效液相色谱、质谱和免疫学检测法等,大多需要依赖抗体,检测设备昂贵、操作繁琐且非常耗时,很难满足对现代食品安全检测技术快速、灵敏、便捷的要求,目前,急需建立了一种快速、准确、灵敏、便捷的新型检测方法用于生物毒素检测。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种清真牛羊肉生物毒素检测方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现:

一种清真牛羊肉生物毒素检测方法,该检测方法包括下述步骤:

制备待测溶液:取20g牛羊肉绞碎形成肉糜液,加入纯化水5ml混合搅拌,1000rpm离心10min;取上清液于无菌离心管中,1000rpm离心10min,弃上清液;沉淀用540μL无菌蛋白胨水悬浮,制得待测溶液;

制备检测溶液:将摩尔比为1:5-1:20的罗丹明B与水合肼混合,持续在80℃的条件下加热回流8-10小时,待到红色消失,蒸发溶剂,得到N-氨基-罗丹明酰胺,然后将与罗丹明B等摩尔的苯甲醛溶于乙醇,在100℃的条件下加热反应10分钟,反应后冷却至室温,得到检测溶液;

向检测溶液中加入待测溶液,以二重蒸馏水补足到3mL,显色15分钟后测定,对反应体系进行荧光扫描测定生物毒素。

本发明的有益效果:本发明通过检测溶液与牛羊肉中生物毒素在较短的时间内反应,从而达到快速检测的目的,提高了检测的准确性,将检测时间大幅缩短,满足对牛羊肉的快速检测。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例,都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种清真牛羊肉生物毒素检测方法,该检测方法包括下述步骤:

首先,制备待测溶液:取20g牛羊肉绞碎形成肉糜液,加入纯化水5ml混合搅拌,1000rpm离心10min;取上清液于无菌离心管中,1000rpm离心10min,弃上清液;沉淀用540μL无菌蛋白胨水悬浮,制得待测溶液;

其次,制备检测溶液:将摩尔比为1:5的罗丹明B与水合肼混合,持续在80℃的条件下加热回流10小时,待到红色消失,蒸发溶剂,得到N-氨基-罗丹明酰胺,然后将与罗丹明B等摩尔的苯甲醛溶于乙醇,在100℃的条件下加热反应10分钟,反应后冷却至室温,得到检测溶液;

最后,向2ml(0.5μmol)检测溶液中加入20mL、40mL的待测溶液,以二重蒸馏水补足到3mL,显色15分钟后测定,对系列反应体系进行荧光扫描测定,得出在激发光波长365nm,发射波长在590nm处相应最强。

实施例2

一种清真牛羊肉生物毒素检测方法,该检测方法包括下述步骤:

首先,制备待测溶液:取15g牛羊肉绞碎形成肉糜液,加入纯化水6ml混合搅拌,1500rpm离心10min;取上清液于无菌离心管中,1000rpm离心10min,弃上清液;沉淀用540μL无菌蛋白胨水悬浮,制得待测溶液;

其次,制备检测溶液:将摩尔比为1:20的罗丹明B与水合肼混合,持续在80℃的条件下加热回流8小时,待到红色消失,蒸发溶剂,得到N-氨基-罗丹明酰胺,然后将与罗丹明B等摩尔的苯甲醛溶于乙醇,在100℃的条件下加热反应10分钟,反应后冷却至室温,得到检测溶液;

最后,向2ml(0.5μmol)检测溶液中加入80mL、160mL的待测溶液,以二重蒸馏水补足到3mL,显色15分钟后测定,对系列反应体系进行荧光扫描测定,得出在激发光波长365nm,发射波长在590nm处相应最强。

实施例3

一种清真牛羊肉生物毒素检测方法,该检测方法包括下述步骤:

首先,制备待测溶液:取15g牛羊肉绞碎形成肉糜液,加入纯化水5ml混合搅拌,1000rpm离心10min;取上清液于无菌离心管中,1000rpm离心10min,弃上清液;沉淀用520μL无菌蛋白胨水悬浮,制得待测溶液;

其次,制备检测溶液:将摩尔比为1:10的罗丹明B与水合肼混合,持续在80℃的条件下加热回流9小时,待到红色消失,蒸发溶剂,得到N-氨基-罗丹明酰胺,然后将与罗丹明B等摩尔的苯甲醛溶于乙醇,在100℃的条件下加热反应10分钟,反应后冷却至室温,得到检测溶液;

最后,向2ml检测溶液中加入320mL、640mL的待测溶液,以二重蒸馏水补足到3mL,显色19分钟后测定,对系列反应体系进行荧光扫描测定,得出在激发光波长365nm,发射波长在590nm处相应最强。

以上内容仅仅是对本发明所作的举例和说明,所属本技术领域的技术人员对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代,只要不偏离发明或者超越本权利要求书所定义的范围,均应属于本发明的保护范围。

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