一种神经氨酸酶检测试剂盒的制作方法

文档序号:11052065阅读:786来源:国知局
一种神经氨酸酶检测试剂盒的制造方法与工艺

本实用新型涉及一种试剂盒,具体涉及一种神经氨酸酶检测试剂盒,属于生物技术领域。



背景技术:

神经氨酸酶又称唾液酸酶是分布于流感病毒被膜上的一种糖蛋白,它具有抗原性,可以催化唾液酸水解,协助成熟流感病毒脱离宿主细胞感染新的细胞,在流感病毒的生活周期中扮演了重要的角色。在甲型流感病毒中,神经氨酸酶的抗原性会发生变异,这成为划分甲型流感病毒亚型的依据,在目前已知的甲型流感病毒中共有9种不同的神经氨酸酶抗原型,神经氨酸酶检测试剂盒(Neuraminidase Assay Kit)是一种用荧光法快速高灵敏检测神经氨酸酶活性的试剂盒,现有的检测试剂盒只具有包装试剂的功能,并不能为检测实验带来帮助,但现有的很难克服上述问题。



技术实现要素:

本实用新型要解决的技术问题是克服的现有的现有的检测试剂盒只具有包装试剂的功能的问题,提供一种神经氨酸酶检测试剂盒。

为了解决上述技术问题,本实用新型提供了如下的技术方案:

本实用新型提供了一种神经氨酸酶检测试剂盒,包括试剂盒、盒盖、96孔荧光酶标板、第一试管、第二试管、第三试管、第四试管、铰链、锁簧和锁孔,所述试剂盒的顶部设置有所述盒盖,所述盒盖与所述试剂盒通过所述铰链连接,所述试剂盒的底部设置有所述96孔荧光酶标板,所述96孔荧光酶标板的一侧设置有所述第一试管,所述第一试管的一侧设置有所述第二试管,所述第二试管的一侧设置有所述第三试管,所述第三试管的一侧设置有所述第四试管,所述盒盖的表面设置有所述锁簧,所述试剂盒的表面设置有所述锁孔。

作为本实用新型的一种优选技术方案,所述第一试管内装有神经氨酸酶检测缓冲液,所述第二试管内装有神经氨酸酶,所述第三试管内装有神经氨酸酶荧光底物,所述第四试管内装有Milli-Q水。

作为本实用新型的一种优选技术方案,所述96孔荧光酶标板表面有96个同样规格均匀大小的小孔。

本实用新型所达到的有益效果是:该装置是一种神经氨酸酶检测试剂盒,本试剂盒可以检测来源于不同物种的神经氨酸酶的酶活力,包括禽流感病毒的神经氨酸酶的酶活力。试剂盒中提供了纯化的神经氨酸酶作为阳性对照,便于检测体系的建立。试剂盒中提供了可以被神经氨酸酶催化产生荧光的底物,该底物被神经氨酸酶催化后可以产生较强的荧光,从而实现了对神经氨酸酶的快速高灵敏检测。所产生的荧光物质的最大激发波长为322nm,最大发射波长为450nm。激发波长在310-335nm,发射波长在430-470nm有良好的检测效果。用96孔板检测时,一个包装的本试剂盒可以检测100个样品或标准品,整个装置设计合理,使用方便,提供了一种神经氨酸酶检测试剂盒。

附图说明

附图用来提供对本实用新型的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与本实用新型的实施例一起用于解释本实用新型,并不构成对本实用新型的限制。在附图中:

图1是本实用新型的结构示意图;

图中:1、试剂盒;2、盒盖;3、96孔荧光酶标板;4、第一试管;5、第二试管;6、第三试管;7、第四试管;8、铰链;9、锁簧;10、锁孔。

具体实施方式

以下结合附图对本实用新型的优选实施例进行说明,应当理解,此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本实用新型,并不用于限定本实用新型。

实施例1

如图1所示,本实用新型提供一种神经氨酸酶检测试剂盒,包括试剂盒1、盒盖2、96孔荧光酶标板3、第一试管4、第二试管5、第三试管6、第四试管7、铰链8、锁簧9和锁孔10,试剂盒1的顶部设置有盒盖2,盒盖2与试剂盒1通过铰链8连接,试剂盒1的底部设置有96孔荧光酶标板3,96孔荧光酶标板3的一侧设置有第一试管4,第一试管4的一侧设置有第二试管5,第二试管5的一侧设置有第三试管6,第三试管6的一侧设置有第四试管7,盒盖2的表面设置有锁簧9,试剂盒1的表面设置有锁孔10。

第一试管4内装有神经氨酸酶检测缓冲液,第二试管5内装有神经氨酸酶,第三试管6内装有神经氨酸酶荧光底物,第四试管7内装有Milli-Q水,便于盛集本实验所需的各种试剂。

96孔荧光酶标板3表面有96个同样规格均匀大小的小孔,用96孔板检测时,一个包装的本试剂盒可以检测100个样品或标准品。

该装置是一种神经氨酸酶检测试剂盒,当需要用该装置时,1.阳性和阴性对照检测的准备:

a.在96孔荧光酶标板内每孔加入70微升神经氨酸酶检测缓冲液。

b.每孔再分别加入10或0微升神经氨酸酶。

c.每孔再加入10微升溶解神经氨酸酶的溶液。例如神经氨酸酶在RIPA溶液中,则加10微升RIPA溶液。

d.每孔再加入0或10微升Milli-Q水使每孔总体积为90微升。

2.样品检测的准备:

a.在96孔荧光酶标板内每孔加入70微升神经氨酸酶检测缓冲液。

b.每孔再加入10微升神经氨酸酶样品。

c.每孔再加入10微升Milli-Q水使每孔总体积为90微升。

3.检测:

a.振动混匀约1分钟。

b.每孔加入10微升神经氨酸酶荧光底物。

c.再振动混匀约1分钟。

d.37℃孵育30分钟后进行荧光测定。激发波长为322nm,发射波长为450nm。

4.计算:

根据检测出来的荧光强度可以计算出样品间神经氨酸酶的相对活力。

如果受仪器所限,不能设置前述波长,激发波长在310-335nm,发射波长在430-470nm也有良好的检测效果。孵育时间可根据样品中的酶活力适当调整。在酶活力低或样品量少时,可以延长孵育时间(例如延长时间至1、2或4小时),以提高检测灵敏度。但当酶活力很高时,孵育时间过长会使反应达到平台期,此时宜缩短孵育时间。首次测定时,建议在孵育10、20、30、60、120分钟后分别测定一次荧光强度,以确定比较理想的孵育时间。

最后应说明的是:以上所述仅为本实用新型的优选实施例而已,并不用于限制本实用新型,尽管参照前述实施例对本实用新型进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本实用新型的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本实用新型的保护范围之内。

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