检查体染色装置和检查体染色方法与流程

本发明涉及检查体染色装置和检查体染色方法。

背景技术：

以往，公知有一种根据每个样本而自封装有试剂的试剂组件依次向样本供给染色所需的试剂的装置(例如，参照专利文献1。)。

该装置在样本上划定空间并通过自空间上方散布试剂而向样本供给试剂。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：美国特许第8354058号说明书

技术实现要素：

发明要解决的问题

然而，在专利文献1的装置中，由于通过在划定于样本上的较大的空间的上部压溃封入有试剂的袋而将试剂挤出到空间内从而散布试剂，因此，存在有为了向样本均匀地散布试剂、并使试剂充分地渗透样本而必须供给大量的试剂的问题。

本发明即是鉴于上述的情况而做成的，其目的在于提供能够向检查体均匀地供给较少的试剂并进行染色的检查体染色装置和检查体染色方法。

用于解决问题的方案

为了达成上述目的，本发明提供以下的方法。

本发明的一方式提供一种检查体染色装置，该检查体染色装置包括：间隙形成构件，其以在装载有检查体的载玻片的所述检查体的搭载面的上方空开产生毛细现象的间隙的方式配置于该搭载面的上方；以及药液供给部，其向该间隙形成构件与所述搭载面之间的间隙供给用于对所述检查体进行染色的药液。

根据本方式，在与将检查体装载于搭载面的载玻片的搭载面相对地配置间隙形成构件时，在间隙形成构件与搭载面之间形成间隙。

由于所形成的间隙具有产生毛细现象的程度的厚度尺寸，因此，在利用药液供给部的工作向间隙供给用于对检查体进行染色的药液时，药液在毛细现象的作用下在间隙内扩展，并均匀地被供给到搭载于搭载面的检查体。即，即使供给到间隙内的药液的总量较少，由于药液在毛细现象的作用下较薄、较宽且快速地扩展，因此，能够节约药液、且能够以较少的药液迅速地渗透检查体。

在上述方式中，可以的是，该检查体染色装置包括：清洗流体供给部件，其向所述间隙形成构件与所述搭载面之间的间隙供给清洗用流体；以及清洗流体排出部件，其将利用该清洗流体供给部件供给的清洗用流体自所述间隙排出。

通过这样设定，能够利用清洗流体供给部件供给作为使对检查体进行固定的石蜡溶解的溶剂的二甲苯等清洗用流体，利用清洗流体排出部件将使石蜡溶解后的清洗用流体排出。另外，检查体的染色使用多种药剂，通过在供给一种药剂并对检查体发挥作用之后，利用清洗流体供给部件供给酒精、空气等清洗用流体从而清洗检查体，利用清洗流体排出部件将清洗后的清洗用流体排出，从而能够接着向间隙供给另一药剂。

另外，在上述方式中，可以的是，该检查体染色装置包括加热部件，该加热部件对装载于所述载玻片的所述检查体进行加温。

通过这样设定，能够利用加热部件的工作对装载于载玻片的检查体进行加温从而促进染色处理。另外，在使石蜡溶解的清洗处理中，也能够通过对检查体进行加温使石蜡容易溶解从而促进清洗处理。

另外，在上述方式中，可以的是，在所述间隙形成构件设有收容所述药液的一个以上的贮藏器和对各该贮藏器内的所述药液进行加压的加压部件，所述贮藏器包括放出口，该放出口在所述药液被加压后将内部的所述药液放出到所述间隙。

通过这样设定，在使加压部件工作而对贮藏器内的药液进行加压时，药液自放出口被挤出，并被供给到搭载面与盖体之间的间隙。由此，能够简单地向间隙供给药液。

另外，在上述方式中，可以的是，该检查体染色装置还包括减压部件，该减压部件对所述间隙进行减压。

通过这样设定，通过在利用减压部件的工作使间隙成为减压状态之后供给药液，能够更迅速地使药液在间隙内扩展。

另外，本发明的另一方式提供一种检查体染色方法，在该检查体染色方法中，以在与装载有检查体的载玻片的所述检查体的搭载面与间隙形成构件之间空开产生毛细现象的间隙的方式配置该间隙形成构件，向该间隙形成构件与所述搭载面之间的间隙供给用于对所述检查体进行染色的药液。

发明的效果

采用本发明，起到能够向检查体均匀地供给较少的试剂并对检查体进行染色的效果。

附图说明

图1是表示本发明的一实施方式的检查体染色装置的分解立体图。

图2是表示图1的检查体染色装置的立体图。

图3是表示图1的检查体染色装置的装置主体的背面的图。

图4是图1的检查体染色装置的纵剖视图。

图5是说明自图4的检查体染色装置的一个药剂容器部供给药剂后的状态的纵剖视图。

图6是说明从图5的状态利用清洗用流体清洗了间隙后的状态的纵剖视图。

图7是说明自图4的检查体染色装置的另一药剂容器部供给药剂后的状态的纵剖视图。

图8是表示图1的检查体染色装置的变形例的分解立体图。

具体实施方式

以下，参照附图说明本发明的一实施方式的检查体染色装置1和检查体染色方法。

如图1和图2所示，本实施方式的检查体染色装置1包括：基座部3，其载置装载有检查体a的载玻片2；以及装置主体4，其载置于在该基座部3所载置的载玻片2的上表面(搭载面)2a。

基座部3包括托盘部5、固定于该托盘部5内的加热器保持构件6、固定于该加热器保持构件6的上表面的加热器(加热部件)7以及固定于该加热器7的上表面并使加热器7的热量扩散的散热板8。

装置主体4包括与载玻片2的上表面2a接触的板(间隙形成构件)9和固定于该板9的上表面的药液供给部10。

支承于加热器保持构件6的上表面的加热器7为薄板状的板加热器，加热器7所产生的热量利用散热板8向上方扩散。散热板8具有以密合状态配置载玻片2的背面的平坦的上表面。利用散热板8扩散的来自加热器7的热量能够隔着载玻片2对装载于载玻片2的上表面2a的检查体a进行加温。

如图3所示，装置主体4的板9在其背面包括与载玻片2的上表面2a接触的接触部11和相对于该接触部11凹陷的凹部12。接触部11设于沿着板9的两个长边和一个短边延伸的边缘部，并配置于包围凹部12的除一个短边以外的三边的位置。

凹部12相对于接触部11凹陷100μm至200μm。由此，在将板9载置于载玻片2的上表面2a时，配置为接触部11与载玻片2的上表面2a接触、凹部12相对于载玻片2的上表面2a空开100μm至200μm的大致均匀的间隔的间隙。

在凹部12开口有多个后述的药液供给部10的药剂(药液)x的放出口13。另外，在凹部12还设有向间隙供给清洗用流体的清洗液等放出口14。

如图4所示，在板9的与凹部12相反侧的面，在与放出口13相对应的位置设有储存药剂x的多个药剂容器部(贮藏器)15和供清洗液等放出口14与配管20连接的连接部16。各药剂容器部15形成为具有一定的横截面形状的圆筒状。

在以设有药剂容器部15的一侧的面朝向上方、设有凹部12的面朝向下方的方式配置板9时，如图4所示，药剂容器部15成为在上方具有开口部17、在底面开口有放出口13的容器。在各药剂容器部15收容有染色所需的药剂x，例如一次抗体、二次抗体、对dab附加了连接酶(リンカ)的试剂、苏木精等。

如图4所示，药液供给部10包括：圆筒状的活塞保持部18，其固定在板9的与各药剂容器部15一致的位置；以及活塞构件(加压部件)19，其以能够沿轴向移动的方式插入于各活塞保持部18。活塞保持部18的内径与药剂容器部15的内径大致一致，相对于活塞构件19的外径形成得略大。

被各活塞保持部18支承的活塞构件19的下端插入于与活塞保持部18一致的药剂容器部15内。由此，在相对于活塞保持部18按下活塞构件19时，将药剂容器部15作为缸体，收容在药剂容器部15内的药剂x被活塞构件19加压，并自设于板9的放出口13被放出到凹部12内。

各放出口13、14形成得充分小，在未按下活塞构件19的状态下，药剂x在表面张力的作用下以收容状态被保持在药剂容器部15内，而不会自放出口13漏出。另外，为了进一步可靠地防止泄漏，还可以在放出口13设置利用加压而开放的阀。

作为清洗用流体，能够列举用于使石蜡溶解的二甲苯、用于使抗原活化的edta或柠檬酸盐、pbs、酒精以及空气。这些清洗用流体能够通过切换未图示的阀或泵而经由同一配管20分别向清洗液等放出口14供给。

由经由配管20供给清洗用流体的阀、泵构成清洗流体供给部件(省略图示)，由经由配管20供给空气的阀、泵构成清洗流体排出部件(省略图示)。

参照附图说明使用了这样构成的本实施方式的检查体染色装置1的检查体染色方法。

在使用本实施方式的检查体染色装置1对检查体a进行免疫染色时，将在搭载面2a装载有由石蜡包埋起来的检查体a的载玻片2装载于散热板8的上表面，然后，在载玻片2上装载装置主体4。

该状态下，在经由配管20将二甲苯自清洗液等放出口14放出时，二甲苯被供给到载玻片2的上表面2a与板9的凹部12之间的间隙，并浸润检查体。载玻片2的上表面2a与板9的凹部12之间的间隙空开了100μm至200μm的极薄的间隔，因此，被供给到间隙的二甲苯在毛细现象的作用下在间隙内迅速且无遗漏地扩展并浸润检查体a。因而，不需要大量的二甲苯。

该状态下，使加热器7工作，利用来自加热器7的热量将检查体a加温到60℃。由此，由于促进了石蜡的溶解，因此，在经过规定时间之后，代替二甲苯而自清洗液等放出口14放出pbs，清洗检查体a。然后，自清洗液等放出口14放出空气，吹扫pbs。被吹扫的二甲苯、pbs等不与板9和载玻片2的上表面2a接触而自开放的部分被放出到外部，并在收容于下方的托盘部5之后被排出到外部。

接着，通过将edta或柠檬酸盐自清洗液等放出口14放出、且利用加热器7加温到90℃，从而进行活化。然后，自清洗液等放出口14放出pbs，清洗检查体a。然后，自清洗液等放出口14放出空气，吹扫pbs。

接着，在利用加热器7将检查体a加热到了37℃的状态下，如图5所示，按压收容有一次抗体的药剂容器部15的活塞构件19。由此，收容于与被按压的活塞构件19相对应的药剂容器部15的一次抗体被加压，并自放出口13被放出到凹部12内。该情况下，被放出的一次抗体在空开了100μm至200μm的极薄的间隔的载玻片2的上表面2a与板9的凹部12之间的间隙中，也在毛细现象的作用下迅速且无遗漏地扩展，并被供给到检查体a。

即，即使被供给到间隙的一次抗体为较少的量，在毛细现象的作用下，也能够迅速且无遗漏地扩展，因此，具有能够节约高价的药剂x的使用量的优点。另外，与在较宽广的空间散布的情况相比，具有能够更可靠地将药剂x供给到检查体a的优点。

在经过规定时间(例如20分钟)之后，如图6所示，经由配管20自清洗液等放出口14向间隙供给pbs和空气，从而清洗检查体a。

接着，如图7所示，按下收容有二次抗体的另一药剂容器部15的活塞构件19，并利用加热器7加温到37℃。该情况下，收容于与被按下的活塞构件19相对应的药剂容器部15的二次抗体被加压，并自放出口13被放出到凹部12内。被放出的二次抗体在毛细现象的作用下迅速且无遗漏地在间隙内扩展并被供给到检查体a。

然后，在经过规定时间(例如20分钟)之后，自清洗液等放出口14向间隙供给pbs和空气，从而清洗检查体a。

接着，按压收容有对dab附加了连接酶的试剂的药剂容器部15的活塞构件19，并利用加热器7加温到37℃。

在经过10分钟左右的时间之后，自清洗液等放出口14向间隙供给pbs和空气，从而清洗检查体a。

然后，按下收容有苏木精的药剂容器部15的活塞构件19，并利用加热器7加温到37℃。

在经过30秒左右的时间之后，自清洗液等放出口14向间隙供给pbs和空气，从而清洗检查体a。

然后，在自清洗液等放出口14放出空气并吹扫了检查体a上的试剂之后，重复自清洗液等放出口14供给酒精和利用空气进行吹扫。

最后，自清洗液等放出口14导入二甲苯，并浸渍三分钟，从而完成染色。

根据本实施方式的检查体染色装置1和检查体染色方法，在检查体a附近形成空开100μm至200μm的间隔而成的间隙，由于通过向该间隙供给药剂x从而在毛细现象的作用下使药剂x在间隙内扩展，因此，起到能够利用少量的药剂x更可靠地使药剂x对检查体a发挥作用的效果。

另外，本实施方式的检查体染色装置1并不限定于上述结构，例如，如图8所示，还可以设为包括收容装载有检查体a的载玻片2的容器主体(间隙形成构件)21和封闭该容器主体21的上部开口22的盖体23的结构。

在图8所示的例子中，在容器主体21连接有用于供给或排出清洗用流体或空气的配管20，容器主体21的边缘部的高度可以构成为，在装载有盖体23时，在盖体23的背面与载玻片2的上表面2a之间形成有100μm至200μm的间隔的间隙。

另外，设于盖体23的药液供给部25可以构成为，在由柔软的材质形成的袋状的药剂容器部24内收容有药剂x并以压扁药剂容器部24的方式对药剂容器部24进行了加压时，自在盖体23的下表面开口的放出口将药剂x放出。盖体23可以由透明的材质构成。

另外，本实施方式的检查体染色装置1还可以包括减压部件(省略图示)，该减压部件对载玻片2的上表面2a与板9或载玻片2的上表面2a与盖体23之间的间隙进行减压。

通过这样设定，由于在利用减压部件的工作而将间隙设为减压状态之后供给药剂x，因此，能够使药剂x更迅速地在间隙内扩展。

附图标记说明

1、检查体染色装置；2、载玻片；2a、上表面(搭载面)；7、加热器(加热部件)；9、板(间隙形成构件)；10、25、药液供给部；13、放出口；15、24、药剂容器部(贮藏器)；19、活塞构件(加压部件)；21、容器主体(间隙形成构件)；a、检查体；x、药剂(药液)。