一种基于固相法快速血型鉴定的检测板及鉴定方法与流程

本发明涉及一种基于固相法快速血型鉴定的检测板及鉴定方法。

背景技术：

现代战争较传统战争更具有突发性、不确定性和惨烈性。由于新式高杀伤性武器的不断研发和普遍应用,致使急需输血进行救治的危重伤员的数量急剧增加。同时,为了保证各种血液制品输注有效和战时的用血安全,必须严格遵守输血前血型鉴定、交叉配血等各种检测的标准操作规程要求，这在野战条件下或突发事件时是很难保障的，如果血型鉴定和交叉配血不准确就可能导致伤员误输异型血而发生严重输血反应，甚至会危机生命。我军如何在未来战争中实施有力的输血救治是军事斗争卫勤保障的重要内容。通过对国内外历次战争资料分析，结合我军组织的多次卫勤保障机动实战演习和汶川地震等自然灾害救援中得到启示：目前临床常用的血型鉴定方法有试管凝集法和微柱凝胶法，所需的检测试剂要求低温冰箱保存，实验操作需要离心机，都需要电力供应，而后者鉴定时间较长，还需要专用的仪器和试剂，且价格较高，两者均不适合突发事件情况下野外使用。

技术实现要素：

本发明所要解决的技术问题是提供一种适于在战时快速鉴定血型的基于固相法快速血型鉴定的检测板及鉴定方法。

本发明所采用的技术方案是：

一种基于固相法快速血型鉴定的检测板，其包括板体、设置在板体中部的样本槽、设置在样本槽一侧的抗体槽以及设置在样本槽另一侧的金标槽，在抗体槽内有单抗，在金标槽内设置有金标红细胞膜抗原，在所述样本槽与抗体槽之间设置有上吸水纸，在样本槽与金标槽之间设置有滤血膜，在滤血膜下方设置有下吸水纸。

所述单抗为抗-a、抗-b、抗-d，所述抗体槽为三个，在三个抗体槽内分别设置有抗-a、抗-b、抗-d，三个所述抗体槽分别通过上吸水纸与样本槽连通；

所述金标红细胞膜抗原为金标a膜ag、金标b膜ag、金标c膜ag，所述金标槽为三个，在三个金标槽内分别设置有金标a膜ag、金标b膜ag、金标c膜ag，三个所述金标槽分别通过下吸水纸与样本槽相连通。

在所述抗体槽与金标槽内均设置有爆珠，所述单抗与金标红细胞膜抗原均设置在爆珠内。

所述上吸水纸一端设置在抗体槽内，另一端设置在样本槽内部或越过样本槽。

所述下吸水纸一端设置在金标槽内，另一端设置在样本槽内部或越过样本槽。

所述上吸水纸设置于滤血膜上方。

上述检测板的方法，其包括如下步骤：

步骤一：将抗体槽与金标槽内的爆珠挤破，使爆珠内的试剂流出；

步骤二：在样本槽内加入全血样本，在上吸水纸的作用下全血向抗体槽移动，红细胞与单抗反应，进行正定型；在滤血膜的作用下滤除红细胞后的血浆在下吸水纸的作用下向金标槽移动，血浆与金标红细胞膜抗原反应，进行反定型；

步骤三：观察步骤二中的反应结果，根据正反定型凝集结果判定血型。

本发明的积极效果为：本发明采用特异性单克隆抗-a、抗-b、抗-d抗体做为abo血型正定型试剂，采用标记特异性红细胞膜a、b、o血型抗原（金标抗原）做为反定型免疫胶体金试剂，正反定型试剂均设置在板体上，操作简单快捷，携带方便，准确性高，适合流动采血点和应急输血时的血型定型同时正反定型剂放置在爆珠内，当使用时只需将爆珠挤破即可，试剂在爆珠内能够常温、长期保存，解决在野战条件下断水、断电、设备试剂无法及时供应的情况下如何有效地为失血伤员输血的实际问题，军事意义重大。

附图说明

图1为本发明结构示意图；

图2为本发明剖视图。

具体实施方式

如附图1、2所示，本发明的检测板包括板体1、位于板体1中部的样本槽5、设置在样本槽5一侧的抗体槽2以及设置在样本槽5另一侧的金标槽3，在抗体槽2内有单抗，在金标槽3内设置有金标红细胞膜抗原，在所述样本槽5与抗体槽2之间设置有上吸水纸7，在样本槽5与金标槽3之间设置有滤血膜8，在滤血膜8下方设置有下吸水纸9。在本实施例中，抗体槽2位于样本槽5的左侧，样本槽5内的血样在上吸水纸7的作用下，全血向抗体槽2内移动，全血内的红细胞与单抗反应进行正定型。金标槽3位于样本槽5的右侧，样本槽5内的全血经过滤血膜8的过滤，血浆在下吸水纸9的作用下向金标槽3移动，血浆与金标红细胞膜抗原反应进行反定型。

所述单抗为抗-a、抗-b、抗-d，所述抗体槽2为三个，在三个抗体槽2内分别设置有抗-a、抗-b、抗-d，三个所述抗体槽2分别通过上吸水纸7与样本槽5连通。所述金标红细胞膜抗原为金标a膜ag、金标b膜ag、金标c膜ag，所述金标槽3为三个，在三个金标槽3内分别设置有金标a膜ag、金标b膜ag、金标c膜ag，三个所述金标槽3分别通过下吸水纸9与样本槽5相连通。

在所述抗体槽2与金标槽3内均设置有爆珠4，所述单抗与金标红细胞膜抗原均设置在爆珠4内。

所述上吸水纸7一端设置在抗体槽2内，另一端设置在样本槽5内部或越过样本槽5，所述下吸水纸9一端设置在金标槽3内，另一端设置在样本槽5内部或越过样本槽5。

当上吸水纸7或滤血膜8中的一个越过样本槽5时，上吸水纸7与滤血膜重叠的部分，上吸水纸7设置于滤血膜8上方。

在样本槽5与抗体槽2和金标槽3之间可以设置凹槽6，上吸水纸7与滤血膜8均设置在凹槽6。

上述检测板的使用方法包括如下步骤：

步骤一：将抗体槽2与金标槽3内的爆珠4挤破，使爆珠4内的试剂流出；

步骤二：在样本槽5内加入全血样本，在上吸水纸7的作用下全血向抗体槽2移动，红细胞与单抗反应，进行正定型；在滤血膜8的作用下滤除红细胞后的血浆在下吸水纸9的作用下向金标槽3移动，血浆与金标红细胞膜抗原反应，进行反定型；

步骤三：观察步骤二中的反应结果，根据正反定型凝集结果判定血型。

本发明将高效价的特异性单克隆抗体包裹到微球中，确保abo正定型试验结果的特异性和稳定性良好，反定型采用免疫胶体金试剂将胶体金粒子标记到提取的具有完整血型抗原的红细胞膜上，解决了常规反定型标准红细胞易溶血、保存期短的问题，并利于血型正反定型同步进行，实现标准化操作，将正反定型试剂预包被在微球中，实际应用时只需在加样槽内加入被检者的全血，通过快速吸附和滤血膜的作用，红细胞进入正定型侧与单抗血清反应，经过滤血膜8滤去红细胞的血浆进入反定型侧与金标膜抗原反应，根据凝集结果判定血型。本发明具有以下优点:①试剂保存方便，传统的试剂需要2-8℃保存，该试剂可常温保存;②便于携带，污染小，克服了液相试剂容易泼溅的缺点，操作现场能够保持清洁;③操作简单快捷，无需借助仪器，实验不需要动力及设备保障，结果直观，易于判读，非专业人员就可实施，2min之内即可判读结果;④稳定性好，效期长;⑤固相载体上易于粘贴条形码，可以避免出错;⑥检测卡可拆分，易于携带和保存，随取随用，方便使用。因此，在缺水断电的野外应急血液保障时运用此方法可大大提高血型鉴定准确性。

技术特征：

技术总结
本发明涉及一种基于固相法快速血型鉴定的检测板及鉴定方法，检测板包括板体、设置在板体中部的样本槽、设置在样本槽一侧的抗体槽以及设置在样本槽另一侧的金标槽，在抗体槽内有单抗，在金标槽内设置有金标红细胞膜抗原，在所述样本槽与抗体槽之间设置有上吸水纸，在样本槽与金标槽之间设置有滤血膜，在滤血膜下方设置有下吸水纸；本发明采用特异性单克隆抗‑A、抗‑B、抗‑D抗体做为ABO血型正定型试剂，采用标记特异性红细胞膜A、B、O血型抗原（金标抗原）做为反定型免疫胶体金试剂，正反定型试剂均设置在板体上，操作简单快捷，携带方便，准确性高，适合流动采血点和应急输血时的血型定型试剂同时正反定型试剂放置在爆珠内。

技术研发人员：马印图;陈晓飞
受保护的技术使用者：中国人民解放军白求恩国际和平医院
技术研发日：2017.12.21
技术公布日：2018.04.13