本发明涉及一种新型血清igg抗a效价测定测试方法。
背景技术:
血清igg抗a效价测定的检测,是指用2-me破坏igm类抗体,然后倍比稀释血清进而测定患者血清中的igg抗a效价,用于预测孕妇发生abo血型系统新生儿溶血病的可能性大小。孕妇血清igg抗a抗人球蛋白介质凝集效价大于/等于盐水介质效价两管(即4倍)时,才可以认为抗人球蛋白介质凝集效价即为igg抗a的效价。
技术实现要素:
本发明的目的是提供一种新型血清igg抗a效价测定测试方法,简单、有效。
为了实现以上目的,本发明采用的技术方案为:一种新型血清igg抗a效价测定测试方法,包括以下步骤:
1).取受检者血清0.1ml和0.2m的2-me0.1ml加入试管中混匀,用封口膜封住管口,室温放置30分钟;用于灭活igm;
2).排列试管:在试管架的第2至第7孔共排列6支试管,在每支试管各生理盐水50ul;
3).将灭活完成的试管中再加入1.4ml的生理盐水,使得血清的稀释度是1:16,然后把该管放入试管架第1孔;
4).从第1孔的第1管取出50ul稀释血清加入第2管混匀,使得血清的稀释度达到1:32,然后从第2管取出50ul加入第3管混匀,使得血清的稀释度达到1:64,再从第3管取出50ul加入第4管混匀,使得血清的稀释度达到1:128,以此倍比稀释到第7管,使得血清的稀释度达到1:1024;
5).在第2至第7管中各加入a型红细胞悬液50ul,混匀后37度水浴温育30分钟;
6).把温育后的试管以3400r/min离心15秒,观察凝集情况,并记录凝集度为弱阳性的效价;
7).在第一个不凝集管中加入1ml生理盐水,以3400r/min离心3分钟,然后扣干残留液体;洗涤1-2次;
8).在洗涤完成的试管中各加入50ul生理盐水混匀,在第一个洗涤管中加入50ul抗人球蛋白试剂,以3400r/min离心15秒钟,观察凝集情况,如果不凝集,则报告结果:<1:64,实验结束;如果凝集,根据凝集强弱,在后面管中加入50ul抗人球蛋白试剂,再次离心观察。
进一步的,步骤1)中,取受检者血清0.1ml和0.2m的2-me0.1ml加入试管中混匀,用封口膜封住管口,37度温浴30分钟。
进一步的,所述的步骤7)中,洗涤2次。
本发明的技术效果在于:采用上述新型血清igg抗a效价测定测试方法,简单、有效。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明试剂组成:
2-5%的a型红细胞悬液(10ml);
抗人球蛋白试剂;
0.2m的2-me(2巯基乙醇)。
检测步骤:
1).取受检者血清0.1ml和0.2m的2-me0.1ml加入试管中混匀,用封口膜封住管口,室温放置30分钟;用于灭活igm;
2).排列试管:在试管架的第2至第7孔共排列6支试管,在每支试管各生理盐水50ul;
3).将灭活完成的试管中再加入1.4ml的生理盐水,使得血清的稀释度是1:16,然后把该管放入试管架第1孔;
4).从第1孔的第1管取出50ul稀释血清加入第2管混匀,使得血清的稀释度达到1:32,然后从第2管取出50ul加入第3管混匀,使得血清的稀释度达到1:64,再从第3管取出50ul加入第4管混匀,使得血清的稀释度达到1:128,以此倍比稀释到第7管,使得血清的稀释度达到1:1024;
5).在第2至第7管中各加入a型红细胞悬液50ul,混匀后37度水浴温育30分钟;
6).把温育后的试管以3400r/min离心15秒,观察凝集情况,并记录凝集度为弱阳性的效价;
7).在第一个不凝集管中加入1ml生理盐水,以3400r/min离心3分钟,然后扣干残留液体;洗涤1-2次;
8).在洗涤完成的试管中各加入50ul生理盐水混匀,在第一个洗涤管中加入50ul抗人球蛋白试剂,以3400r/min离心15秒钟,观察凝集情况,如果不凝集,则报告结果:<1:64,实验结束;如果凝集,根据凝集强弱,在后面管中加入50ul抗人球蛋白试剂,再次离心观察。
以第一次出现弱凝集的试管的稀释倍数即为igg抗a的效价。
进一步的,步骤1)中,取受检者血清0.1ml和0.2m的2-me0.1ml加入试管中混匀,用封口膜封住管口,37度温浴30分钟。
进一步的,所述的步骤7)中,洗涤2次。
采用上述新型血清igg抗a效价测定测试方法,简单、有效。
对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。