一种小茴香产地的鉴别方法与流程

本发明属于药材检测技术领域，具体涉及一种小茴香产地的鉴别方法。

背景技术：

小茴香始载于《唐本草》，又名土茴香、谷香，为伞形科植物茴香foeniculumvulgaremill.的干燥成熟果实，是常用的调味香料，也是我国的传统中药。其性温，味辛，归肝、肾、脾、胃经。具有散寒止痛、理气和胃的功效，常用于寒疝腹痛、睾丸偏坠、痛经、少腹冷痛、脘腹胀痛、食少吐泻。挥发油是小茴香的主要化学成分之一，也是其发挥临床疗效的重要物质基础。近现代科学研究表明，小茴香挥发油多是小分子物质，能够被机体快速吸收，具有抗炎、抑菌、镇痛、促渗和调节胃肠道机能等作用。

药材质量与其所在生态环境密切相关，适宜的产地是生产优质药材的重要因素。因此，有必要对小茴香的产地进行准确鉴别。文献《魏泉增,胡旭阳.不同产地小茴香香气成分差异分析[j].中国调味品,2018(5).》通过不同产地小茴香香气成分的差异对小茴香的产地进行鉴别，但是其不能鉴别产地相近的小茴香，需进一步的改进。

技术实现要素：

针对上述问题，本发明的目的在于提供一种小茴香的产地鉴别方法，步骤如下：

(1)取待检小茴香样品，提取挥发油，分别测定各挥发油中草蒿脑、茴香脑、(r)-(+)-柠檬烯、防老剂2246、l(-)-葑酮和松油烯的含量；

(2)将草蒿脑、茴香脑、(r)-(+)-柠檬烯、防老剂2246、l(-)-葑酮和松油烯的含量带入公式pc1＝0.03×(r)-(+)-柠檬烯-0.90×草蒿脑-0.21×茴香脑-0.09×防老剂2246-0.27×l(-)-葑酮-0.25×松油烯；pc2＝0.07×草蒿脑-0.66×(r)-(+)-柠檬烯-0.50×茴香脑-0.52×防老剂2246+0.16×l(-)-葑酮+0.12×松油烯，然后根据pc1以及pc2的数值判定即可。

进一步地，步骤(1)中，所述挥发油是采用水蒸气蒸馏法提取。

进一步地，所述小茴香的产地分别为山西应县、山西朔州、广东省、四川省、辽宁大连、广西玉林、甘肃酒泉、甘肃民勤、内蒙古托县、内蒙古临河。

进一步地，所述小茴香的产地为山西应县时，pc1＝-60～-80，pc2＝-5～5；所述小茴香的产地为山西朔州时，pc1＝-60～-80，pc2＝-10～-5。

进一步地，所述小茴香的产地为广东省时，pc1＝20～40，pc2＝-10～-5；所述小茴香的产地为四川省时，pc1＝20～25，pc2＝-25～-15。

进一步地，所述小茴香的产地为辽宁大连时，pc1＝30～40，pc2＝-20～-10；所述小茴香的产地为广西玉林时，pc1＝5～10，pc2＝5～10。

进一步地，所述小茴香的产地为甘肃酒泉时，pc1＝0～10，pc2＝10～20；所述小茴香的产地为甘肃民勤时，pc1＝5～10，pc2＝5～10。

进一步地，所述小茴香的产地为内蒙古托县时，pc1＝15～25，pc2＝10～20；所述小茴香的产地为内蒙古临河时，pc1＝15～25，pc2＝6～14。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1为不同产地小茴香挥发油特征成分分布规律。

图2为特征成分主成分碎石图。

图3为不同产地小茴香主成分识别图。

具体实施方式

实施例1、小茴香不同产地的鉴别方法

选取10批次不同产地(山西应县、山西朔州、甘肃酒泉、甘肃民勤、广西玉林、内蒙古托县、内蒙古临河、广东省产、四川省产、辽宁大连)的小茴香饮片，提取挥发油，分别测定各挥发油中草蒿脑、茴香脑、(r)-(+)-柠檬烯、防老剂2246、l(-)-葑酮和松油烯的含量，考察不同产地小茴香挥发油的成分差异。结果见图1。

挥发提取方法为水蒸气蒸馏法提取：分别各取不同产地小茴香300g，置于水蒸气蒸馏装置，加10倍量水，浸泡30min，煮沸提取8h，分别收集挥发油。

挥发油测定方法为gc-ms分析：

(1)双内标储备液的制备用移液器移取20μl肉豆蔻酸甲酯置10ml量瓶中，加入滤过后的无水乙醚定容至10ml，摇匀，配制肉豆蔻酸甲酯内标储备液的质量浓度为1.74mg/ml。精密称取20mg二十二烷置10ml量瓶中，加入滤过后的无水乙醚定容至10ml，摇匀，配制二十二烷内标储备液的质量浓度为2mg/ml。

(2)供试品溶液的制备用移液器移取200μl不同产地小茴香挥发油，加入适量的无水硫酸钠除去水分，滤过至进样瓶0.5ml刻度线，用移液器加入内标储备液和对照品储备液各100μl，用无水乙醚定容至1.5ml，得到挥发油样品溶液，摇匀备用，分别编号1～10。

(3)gc-ms分析条件hp-5毛细管色谱柱(30m×0.25mm，0.1μm，弱极性)，载气为氦气，进样口温度250℃，进样量1.5μl，分流比20∶1，柱温130℃，程序升温为初始温度50℃，保持3min，以5℃/min的速率升温至140℃，以10℃/min的速率升温至280℃，保持2min。ei离子源，离子源温度230℃，接口温度250℃，四极杆温度150℃，扫描质量范围m/z33～1000，溶剂延迟3min。

从图1可以看出，山西产小茴香6种主要成分含量最高，聚为一类，广东、四川和辽宁产茴香聚为一类，其余各省份聚为一类。

进一步考察主要特征成分作为质控指标对产地分布识别的主成分作用。主成分碎石图见图2。由图2可知，前2个主成分方差累积贡献率已达91.33％，可作为识别产地分布规律的主成分。

其中，pc1＝0.03×柠檬烯-0.90×草蒿脑-0.21×茴香脑-0.09×防老剂2246-0.27×葑酮-0.25×松油烯

pc2＝0.07×草蒿脑-0.66×柠檬烯-0.50×茴香脑-0.52×防老剂2246+0.16×葑酮+0.12×松油烯

pc1、pc2分别对不同产地茴香进行识别，结果见图3。由图3可知，产地识别结果与图1结果一致。

文献《不同产地小茴香香气成分差异分析》公开了不同产地小茴香的鉴别方法，该文采用spme-gc-ms分析，结合pca分析，结果表明以γ-松油烯和柠檬烯作为潜在特征标记物，用于区分出5个不同产地的小茴香。本发明所采用的潜在特征标记物为草蒿脑、茴香脑、(r)-(+)-柠檬烯、防老剂2246、l(-)-葑酮和松油烯，与此文献报道差异较大。同样在实际应用层面，本发明所得方法可成功鉴别10种不同产地小茴香的质量差异，相较于文献报道，更具有实用性。

技术特征：

技术总结
本发明提供了一种小茴香产地的鉴别方法，它步骤如下：(1)取待检小茴香样品，提取挥发油，分别测定各挥发油中草蒿脑、茴香脑、(R)‑(+)‑柠檬烯、防老剂2246、L(‑)‑葑酮和松油烯的含量；(2)将草蒿脑、茴香脑、(R)‑(+)‑柠檬烯、防老剂2246、L(‑)‑葑酮和松油烯的含量带入公式PC1＝0.03×(R)‑(+)‑柠檬烯‑0.90×草蒿脑‑0.21×茴香脑‑0.09×防老剂2246‑0.27×L(‑)‑葑酮‑0.25×松油烯；PC2＝0.07×草蒿脑‑0.66×(R)‑(+)‑柠檬烯‑0.50×茴香脑‑0.52×防老剂2246+0.16×L(‑)‑葑酮+0.12×松油烯，然后根据PC1以及PC2的数值判定即可。通过本发明的鉴别方法成功鉴别10种不同产地小茴香的质量差异。

技术研发人员：邹俊波;张小飞;史亚军;郭东艳;崔春利;王媚;王晶;程江雪;赵重博;邰佳
受保护的技术使用者：陕西中医药大学
技术研发日：2018.11.09
技术公布日：2019.02.15