一种测定血浆中香紫苏醇浓度的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种测定血浆中香紫苏醇浓度的方法，属于生物检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 香紫苏醇（sclareol)又名硬尾醇，是从香紫苏、烟草和其他鼠尾草属唇形科植物 中分离提取的一种半日花焼类二聰二叔醇化合物。体内、外研究证实，其具有抗炎、抗菌、杀 菌作用，对于人白血病细胞、人结肠癌细胞、人乳腺癌细胞等恶性肿瘤细胞均有不同程度的 杀伤作用，是一种具有良好开发前景的新药源化合物。其结构式如下：
【主权项】
1. 一种测定血浆中香紫苏醇浓度的方法，其特征是步骤为： (1) 血浆样品预处理：取血浆样品，加入内标硝基安定，加入甲醇沉淀蛋白，离心取上清 液； (2) 色谱：将步骤（1)预处理后的血浆样品进行液相色谱分离：色谱条件中色谱柱： Phenomenex kinetex XB-C18柱；流动相：甲醇：水体积比为80 :20,流动相中还含有IOmM 醋酸铵；流速：200~300 μ L/min ;柱温：30~35°C ;进样量：10 μ L ; (3) 质谱：离子源：电喷雾离子化ESI离子源，方式扫描：选择反应检测扫描（SRM)， 喷雾电压：3500~4000V，鞘气：20~50psi，辅助气：10~20arb，毛细管温度：350°C，离子源温 度：30(TC ;检测离子：香紫苏醇选择性反应检测离子[M+H]+ m/z 309. 0 - m/z 230. 9CE: IleV;内标硝基安定选择性反应检测离子[M+H]+ m/z 282. 3 - m/z 236. 2CE: 23eV; (4) 计算：采用内标法，以香紫苏醇和内标硝基安定的峰面积比值代入标准曲线方程， 计算香紫苏醇的血药浓度。
2. 如权利要求1所述测定血浆中香紫苏醇浓度的方法，其特征是：步骤（1)具体为：取 血浆样品100 μ L，加入500ng/mL内标硝基安定溶液10 μ L，再加入甲醇290 μ L，涡旋混匀 5~10min，13000rpm离心10~15min，离心后取上清液。
3. 如权利要求1所述测定血浆中香紫苏醇浓度的方法，其特征是：步骤（2)中色谱柱长 度为100mm,内径为2. Imm,填料粒径为2. 6 μ m。
4. 如权利要求2所述测定血浆中香紫苏醇浓度的方法，其特征是：步骤（1)所述血浆样 品为含香紫苏醇的血浆。
【专利摘要】本发明涉及一种测定血浆中香紫苏醇浓度的方法，属于生物检测技术领域。以硝基安定为内标，采用蛋白沉淀法，通过血浆样品预处理、色谱、质谱和内标法计算得到定血浆中香紫苏醇浓度。本发明方法快速、准确、灵敏度高、操作简便，为香紫苏醇在动物体内的药物代谢动力学研究奠定了方法学基础。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104569215
【申请号】CN201510044234
【发明人】黄凯, 张娜, 贺晴
【申请人】无锡市人民医院
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2015年1月28日