一种检测达比加群酯中有机溶剂残留的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种检测达比加群酯中有机溶剂残留的方法，尤其是涉及用气相色谱 同时检测达比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃残留的方法，属于药物分析检测领 域。
【背景技术】
[0002] 达比加群酯（dabigatran etexilate)，商品名为Pradaxa,是由德国勃林格殷格翰 公司开发的具有多种特点的新型抗凝血药物，达比加群酯是达比加群的前体药物，在体内 转化为有活性的达比加群，后者通过直接抑制凝血酶而发挥抗凝血效应。达比加群酯可用 于膝关节和髋关节置换术后深静脉血栓栓塞预防、深静脉血栓栓塞治疗、心房颤动、冠脉事 件的二级预防，具有固定剂量给药以及无需实验室监测等多项优势。
[0003] 药品中的残留溶剂是指在原料药、制剂生产中所使用却没有完全除去的有机溶 剂。如果药品中含有的残留有机溶剂浓度高于安全值，患者服用后会对人体产生危害。人 用药物注册技术要求国际协调会（ICH)的指导原则中，将药品生产中常用的溶剂按照危害 程度分为4类，并规定了每种溶剂的限值。我国2010年版药典也规定了"在生产过程中与 贮藏期间控制质量应检查的项目"中，需要对有害有机溶剂限度进行检查，对乙醇、丙酮、乙 酸乙酯、四氢呋喃限度要求分别为不高于0. 5%，0. 5%，0. 5%，0. 072%。
[0004] 本发明针对达比加群酯中，由合成工艺引入的乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃4 种有机溶剂残留，利用气相色谱法，并选择在合适的色谱条件下同时检测这四种有机溶剂 的含量。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的技术问题是，提供一种检测达比加群酯中有机溶剂残留的方 法，利用气相色谱法简便、快速、准确的同时检测出存在于达比加群酯中的乙醇、丙酮、乙酸 乙酯、四氢呋喃4种有机溶剂残留量。
[0006] 本发明通过下列技术方案解决上述技术问题。
[0007] -种检测达比加群酯中有机溶剂残留的方法，用气相色谱同时检测达比加群酯中 乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃4种有机溶剂残留量，其步骤具体如下。
[0008] 1.色谱条件
[0009] 色谱柱：Agilent DB-1301 (30mX0. 32mmX0. 25 μ m);柱温：程序升温，起始温度 为40°C，保持6min，然后温度以50°C /min速率升温至180°C，保持IOmin ;进样口温度： 200°C ;检测温度：250°C ;载气=N2，流量2ml/min ;进样方式：顶空进样法；平衡时间：30min ; 平衡温度：90°C。
[0010] 2.样品测定，采用外标法，其具体步骤如下。
[0011] (1)系统适用性试验
[0012] 取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液和四者的混合对照品溶液，分别进 样，绘制图谱。
[0013] (2)精密度试验
[0014] 分别取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品贮备液置入同一量瓶，N，N-二甲基 甲酰胺稀释后，连续进样6次，记录各对照品峰面积的相对标准偏差RSD。
[0015] ⑶线性试验
[0016] 分别取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液，等比例稀释后，进样，以乙醇、 丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品的峰面积为纵坐标，以四者浓度为横坐标建立线性回归曲 线。
[0017] (4)回收率试验
[0018] 取达比加群酯适量，精密称量，分别加入乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶 液作为回收率样品溶液，进样，记录色谱图，计算回收率。
[0019] 回收率％=(测得量-样品量）/加入量X 100%
[0020] (5)检测限及定量限试验
[0021] 依次分别用N，N-二甲基甲酰胺稀释乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液， 以信噪比S/N = 3计算检测限，以信噪比S/N = 10计算定量限。
[0022] (6)样品检验
[0023] 取达比加群酯适量，精密称量，加N，N-二甲基甲酰胺溶解制成供试品溶液，乙醇、 丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液和供试品溶液分别进样，记录色谱图，按外标法以峰 面积计算达比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃的含量。
[0024] 本发明的优点在于：
[0025] (1)采用气相色谱法同时检测乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃含量，灵敏度高，重 复性好，精密度高。
[0026] (2)本发明方法适合达比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃残留的检测。
【附图说明】
[0027] 图1乙醇系统适应性试验气相色谱图（1.乙醇；2. N，N-二甲基甲酰胺）
[0028] 图2丙酮系统适应性试验气相色谱图（1.丙酮；2· N, N-二甲基甲酰胺）
[0029] 图3乙酸乙酯系统适应性试验气相色谱图（1.乙酸乙酯；2. N，N-二甲基甲酰胺）
[0030] 图4四氢呋喃系统适应性试验气相色谱图（1.四氢呋喃；2. N，N-二甲基甲酰胺）
[0031] 图5乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃混合系统适应性试验气相色谱图（1.乙醇； 2.丙酮；3.乙酸乙酯；4.四氢呋喃；5. N，N-二甲基甲酰胺）
【具体实施方式】
[0032] 实施例
[0033] 1.仪器与试药
[0034] 仪器：Agilent6890气相色谱仪，检测器FID ;Agilent色谱工作站；试药：所用试 剂均为色谱纯。
[0035] 2.色谱条件
[0036] 色谱柱：Agilent DB-1301 (30mX0. 32mmX0. 25 μ m);柱温：程序升温，起始温度 为40°C，保持6min，然后温度以50°C /min速率升温至180°C，保持IOmin ;进样口温度： 200°C ;检测温度：250°C ;载气=N2，流量2ml/min ;进样方式：顶空进样法；平衡时间：30min ; 平衡温度：90°C。
[0037] 3.溶液配制
[0038] 精密称取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃各50〇11^、50〇11^、50〇11^、7211^，加11^-二 甲基甲酰胺溶解于100mL量瓶，制成浓度为每1ml中分别含乙醇5mg、丙酮5mg、乙酸乙酯 5mg、四氢呋喃0. 72mg溶液，作为乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃的对照品C备液。
[0039] 精密量取上述贮备液IOml置入100mL量瓶，加N，N-二甲基甲酰胺至刻度，摇匀， 制成浓度为每1ml中分别含乙醇0. 5mg、丙酮0. 5mg、乙酸乙酯0. 5mg、四氢呋喃0. 072mg溶 液，作为乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液。
[0040] 取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品贮备液各10ml，混合均匀制成四者的混 合对照品溶液。
[0041] 4.样品测定
[0042] (1)系统适用性试验
[0043] 精密量取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液、混合对照品溶液，各取5ml， 顶空进样。
[0044] 在上述色谱条件下各组分可以得到较好的分离，各组分保留时间及分离度见表1， 系统适用性图谱见附图1~5。
[0045] 表1各组分保留时间及分离度测定结果
[0046]
【主权项】
1. 一种检测达比加群酯中有机溶剂残留的方法，用气相色谱外标法进行检测，其特征 在于，同时检测出达比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃4种有机溶剂残留量，其 中，色谱条件为：色谱柱Agilent DB-1301 (30 mX0.32 mmX0.25 ym )，柱温程序升温， 起始温度40 °C，保持6 min，然后温度以50 °C /min速率升温至180 °C，保持10 min，进样 口温度200 °C，检测温度250 °C，载气N2，流量2 ml/min，采用顶空进样法的进样方式，平 衡时间30 min，平衡温度90 °C ;样品测定的步骤为： 取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液和四者的混合对照品溶液，分别进样，绘 制图谱； 分别取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液，等比例稀释后，进样，以乙醇、丙 酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品的峰面积为纵坐标，以四者浓度为横坐标建立线性回归曲 线. 取达比加群酯适量，精密称量，分别加入乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液作 为回收率样品溶液，进样，记录色谱图，计算回收率； 回收率％=(测得量-样品量）/加入量X 100% 检测限及定量限试验，依次分别用A，二甲基甲酰胺稀释乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢 呋喃对照品溶液，以信噪比S/N=3计算检测限，以信噪比S/N=10计算定量限； 取达比加群酯适量，精密称量，加二甲基甲酰胺溶解制成供试品溶液，乙醇、丙 酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液和供试品溶液分别进样，记录色谱图，按外标法以峰面 积计算达比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃的含量。
2. 根据权利要求1所述的检测达比加群酯中有机溶剂残留的方法，其特征在于，达比 加群酯为样品；配制所述的乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液，取乙醇、丙酮、乙酸 乙酯、四氢呋喃各500 mg、500 mg、500 mg、72 mg,加A展二甲基甲酰胺溶解于100 ml量 瓶，作为对照品贮备液；精密量取上述贮备液10 ml置入100 ml量瓶，加％，二甲基甲酰 胺至刻度，摇匀，制成浓度为每1 ml中分别含乙醇0. 5 mg、丙酮0. 5 mg、乙酸乙酯0. 5 mg、 四氢呋喃〇. 072 mg的溶液，作为乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃对照品溶液。
3. 根据权利要求1所述的检测达比加群酯中有机溶剂残留的方法，其特征在于所述的 乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃的混合对照品溶液的配制，分别取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四 氢呋喃对照品贮备液各10 ml，混合均匀制成四者的混合对照品溶液。
【专利摘要】本发明涉及一种检测达比加群酯中有机溶剂残留的方法，尤其是气相色谱同时检测达比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃残留的方法。其中，采用外标法同时检测达比加群酯中4种有机溶剂残留量，色谱条件为：色谱柱Agilent DB-1301（30 m×0.32 mm×0.25 μm），柱温程序升温，起始温度40 ℃，保持6 min，然后温度以50 ℃/min速率升温至180 ℃，保持10 min，进样口温度200 ℃，检测温度250 ℃，载气N2，流量2 ml/min，采用顶空进样法，平衡时间30 min，平衡温度为90 ℃。本法灵敏度高，重复性好，精确度高；适合达比加群酯中有机溶剂残留的检测。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104678017
【申请号】CN201510078256
【发明人】冯光玲, 丁文娟, 冯爱国, 冀东, 王迎春
【申请人】山东省药学科学院
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2015年2月12日