一种同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于检测技术领域，具体涉及一种同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙 酰基滇乌头碱的方法。
【背景技术】
[0002] 黄草乌Komarov)为云南地方习用的乌头类伤科药物， 因其毒性剧烈，大多经过炮制后入药，其炮制饮片（制黄草乌）为虎力散、云南红药、百宝丹 等云南著名和特色中成药制剂中的重要处方药。黄草乌生药材的化学成分研究表明，滇乌 碱（yunaconitine)等二廠生物碱是其主要成分。滇乌碱具有明显的镇痛抗炎、解热和免 疫调节等作用，但其毒性较强，治疗窗狭窄。近期研究表明黄草乌在炮制过程中，其滇乌碱 成分能够部分转化为8-去乙酰基滇乌头碱，后者仍具有较强的镇痛活性，且其毒性显著降 低。因此，建立同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱两种生物碱成分含量 的检测方法，对于黄草乌炮制过程的科学监测和制黄草乌饮片的质量控制研究具有重要意 义。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱 的方法。
[0004] 本发明的目的是这样实现的，包括对照品溶液制备、供试品溶液制备、检测步骤， 具体包括： A、 对照品溶液制备：分别精密称取滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱，加0. 1%的盐酸甲醇 配制成滇乌碱浓度16. 11 mg/mL、8-去乙酰基滇乌头碱浓度为30. 13 mg/mL的混合溶液，得 到对照品溶液； B、 供试品溶液制备：取制黄草乌粉末2. 00 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨水2 mL润湿，加乙醚20 mL，超声处理提取，循环提取2~4次，合并提取液，蒸干，残渣加0. 1%的 盐酸甲醇溶解并定容到10 mL容量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液，0.45 μπι微孔滤膜滤过，得 到供试品溶液； C、 检测：将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪进行检测。
[0005] 本发明建立了同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱两种生物碱成 分含量的检测方法，对于黄草乌炮制过程的科学检测和制黄草乌饮片的质量控制研究具有 重要意义。
【附图说明】
[0006] 图1为对照品溶液的高效液相色谱图：滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱的保留时间 分别为 32. 78 min 和 15. 41min ; 图2为制黄草乌样品溶液的高效液相色谱图：滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱的保留时 间分别为 32. 73min 和 15. 47min。
【具体实施方式】
[0007] 下面结合实施例和附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以 限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
[0008] 本发明所述的同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱的方法，包括 对照品溶液制备、供试品溶液制备、检测步骤，具体包括： A、 对照品溶液制备：分别精密称取滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱，加0. 1%的盐酸甲醇 配制成滇乌碱浓度16. 11 mg/mL、8-去乙酰基滇乌头碱浓度为30. 13 mg/mL的混合溶液，得 到对照品溶液； B、 供试品溶液制备：取制黄草乌粉末2. 00 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨水2 mL润湿，加乙醚20 mL，超声处理提取，循环提取2~4次，合并提取液，蒸干，残渣加0. 1%的 盐酸甲醇溶解并定容到10 mL容量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液，0.45 μπι微孔滤膜滤过，得 到供试品溶液； C、 检测：将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪进行检测。
[0009] B步骤中所述的制黄草乌粉末的粒度为50目。
[0010] B步骤中所述的超声处理的功率为200 W，频率为40 KHz，超声处理的时间为5 min〇
[0011] C步骤中所述的高效液相色谱仪进行检测的色谱条件为：色谱柱=Agilent Zorbax Extend_C18柱（4. 6X250 mm，5 μπι);流动相：三乙胺水溶液-乙腈，梯度洗脱； 流速：1. 0 mL · min-1;检测波长：260 nm ;柱温：30°C ;进样量10 μ L。
[0012] 所述的三乙胺水溶液浓度为0. 2%，并用磷酸调pH值为3. 1。
[0013] 所述的梯度洗脱条件为：
【主权项】
1. 一种同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱的方法，其特征在于包括 对照品溶液制备、供试品溶液制备、检测步骤，具体包括： A、 对照品溶液制备：分别精密称取滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱，加0. 1%的盐酸甲醇 配制成滇乌碱浓度16. 11 mg/mL、8-去乙酰基滇乌头碱浓度为30. 13 mg/mL的混合溶液，得 到对照品溶液； B、 供试品溶液制备：取制黄草乌粉末2. 00 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨水2 mL润湿，加乙醚20 mL，超声处理提取，循环提取2~4次，合并提取液，蒸干，残渣加0. 1%的 盐酸甲醇溶解并定容到10 mL容量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液，0.45 μπι微孔滤膜滤过，得 到供试品溶液； C、 检测：将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪进行检测。
2. 根据权利要求1所述的同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱的方法， 其特征在于B步骤中所述的制黄草乌粉末的粒度为50目。
3. 根据权利要求1所述的同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱的方法， 其特征在于B步骤中所述的超声处理的功率为200 W，频率为40 KHz，超声处理的时间为5 min〇
4. 根据权利要求1所述的同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱的方法， 其特征在于C步骤中所述的高效液相色谱仪进行检测的色谱条件为：色谱柱=Agilent Zorbax Extend_C18柱（4. 6X250 mm，5 μπι);流动相：三乙胺水溶液-乙腈，梯度洗脱； 流速：1. 0 mL · min-1;检测波长：260 nm ;柱温：30°C ;进样量10 μ L。
5. 根据权利要求4所述的同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱的方 法，其特征在于所述的三乙胺水溶液浓度为0. 2%，并用磷酸调pH值为3. 1。
6. 根据权利要求4所述的同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱的方法， 其特征在于所述的梯度洗脱条件为：
【专利摘要】本发明公开一种同时测定制黄草乌中滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱的方法，包括：对照品溶液制备，称取滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱，加盐酸甲醇配制成滇乌碱、8-去乙酰基滇乌头碱的混合溶液，得到对照品溶液；供试品溶液制备，取制黄草乌粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨水，加乙醚，超声处理提取，循环提取后合并提取液，蒸干，残渣加入盐酸甲醇溶解并定容到容量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液，微孔滤膜滤过，得到供试品溶液；将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪进行检测。本发明建立了以制黄草乌中滇乌碱及其转化产物8-去乙酰基滇乌头碱为指标的检测方法，对于黄草乌炮制过程的科学检测和制黄草乌饮片的质量控制研究具有重要意义。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104678020
【申请号】CN201510101815
【发明人】马晓霞, 周志宏, 杨竹雅, 杨树德, 钱子刚
【申请人】云南中医学院, 云南云河药业股份有限公司
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2015年3月9日