一种双层固相萃取小柱的装填方法及固相萃取小柱的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及分析化学技术领域，特别涉及一种双层固相萃取小柱的装填方法及固相萃取小柱。
【背景技术】
[0002]固相萃取(Solid Phase Extract1n,简称SPE)技术是一种基于色谱分离的样品前处理方法。固相萃取包括固相(具有一定官能团的固体吸附剂)和液相(样品及溶剂)。液体样品在正压、负压或重力的作用下通过装有固体吸附剂的固体萃取装置(固相萃取柱、固相萃取膜、固相萃取吸嘴、固相萃取芯片等)。由于固定吸附剂具有不同的官能团，能将特定的化合物吸附并保留在SPE柱上，从而实现目标物与杂志的分离。固相萃取可分为两种模式:一种是目标化合物吸附模式固相萃取；另一种则是杂质吸附模式固相萃取。
[0003]作为一项样品前处理技术，固相萃取已经得到广泛的应用。在一些行业中，固相萃取逐渐取代传统的液液萃取，成为重要的样品前处理手段之一。固相萃取之所以能将目标化合物从样品基质中分离出来，主要是靠固相吸附剂上的官能团与目标化合物的官能团之间的作用力将目标化合物保留在固相吸附剂上，而没有被保留的样品基质则通过固相流出。这种作用力主要分为非极性作用力、极性作用力、离子作用力、共价作用力以及多种作用力。
[0004]一些基质较为复杂的样品，通过一种填料进行固相萃取后，依然有较多的杂质干扰目标化合物的分析，这时可以考虑将两种萃取填料集合起来使用的方法，根据杂质和样品的性质，可以将填料进行混合填装。
[0005]混合固相萃取主要是将两种或两种以上吸附性填料均匀后填入固相萃取柱，达到在不损失目标化合物的前提下，利用混合固相萃取柱不同官能团的特性，通过该调节萃取过程中的pH值分别清除样品及不同性质干扰物的目的。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是针对现有操作方法的不足，提供一种双层固相萃取小柱的装填方法，该双层固相萃取小柱的装填方法既可以保证固相萃取样品的连续性又能够实现样品处理重复性佳的生产要求。
[0007]为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案:一种双层固相萃取小柱的装填方法，首先称取正相固定填料装于装有筛板的固相萃取管内，填料震动均匀后在上端以筛板固定，接着称取吸水性填料，填料震动均匀后同样在上端以筛板固定，从而形成双层固相萃取柱。
[0008]作为本发明所述双层固相萃取小柱的装填方法的一种优选方案，其中:其装填步骤如下:
(1)称取一定量的正相吸附性填料或正相键合填料；
(2)装填到具有筛板的固相萃取柱管内； (3)震动均匀，保证柱床平行；
(4)安装筛板固定；
(5)称取一定量的吸水性填料；
(6)装填到具有正相填料的固相萃取柱管内；
(7)震动均匀，保证柱床平行；
(8)安装筛板固定。
[0009]作为本发明所述双层固相萃取小柱的装填方法的一种优选方案，其中:所述(I)中正相填料为硅胶、氧化铝、硅藻土、硅胶键合氨基或二醇基中的一种。
[0010]作为本发明所述双层固相萃取小柱的装填方法的一种优选方案，其中:所述(5)中吸水性填料为氧化钙、氢氧化钠、无水硫酸镁、固体氯化钙和固体氯化镁中的一种。
[0011]作为本发明所述双层固相萃取小柱的装填方法的一种优选方案，其中:所述正相填料粒径在60-80Mm之间。
[0012]作为本发明所述双层固相萃取小柱的装填方法的一种优选方案，其中:所述吸水性填料粒径在200-300目之间。
[0013]本发明另一个目的是提供一种双层固相萃取小柱。
[0014]一种双层固相萃取小柱，包括外壳、筛板和填料，其特征在于:下层填料为正相键合或吸附填料，上层填料为吸水性填料。
[0015]本发明提供了一种双层固相萃取小柱的装填方法，与现有技术相比，本发明采用干法装柱填装双层固相萃取小柱，此方法便利有机样品中水分杂质去除同时实现样品过柱分离；丰富了固相萃取小柱的应用范围，吸附杂质种类增多；方法简便，易于装填且利用此方法制备的双层固相萃取小柱经试验证明萃取效率更高，过滤产物中杂质更少。
【具体实施方式】
[0016]下面结合具体的实施例对本发明所述方法及固相萃取小柱进行详细说明。
[0017]下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的成分或具有相同或类似功能的组分。下面的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
[0018]实施例1
糖皮质激素类药物双层固相萃取小柱的制备方法 (I)糖皮质激素类药物双层固相萃取小柱的制备:
称取I克硅胶填料填充于体积为6ml且底端装有聚丙烯筛板的聚丙烯柱管内，震动均匀且保证柱床平行在填料上端以筛板固定，再称取0.5g无水氯化钙装填于柱管内，摇匀后同样以筛板固定。
[0019](2)萃取糖皮质激素的固相萃取小柱，应用与糖皮质激素类药物的分离、富集和纯化:
称取5g试样处理，转移处理后的样液至固相萃取柱的顶部，以每秒一滴的流速过柱。合并收集洗脱液，过滤处理分析,滤液供液相色谱-质谱法测定糖皮质激素的含量,其相对回收率为84.3%。
[0020]对比例，仅采用硅胶为填料的单层固相萃取柱进行试验: 称取5g试样处理，转移处理后的样液至固相萃取柱的顶部，以每秒一滴的流速过柱。合并收集洗脱液，过滤处理分析,滤液供液相色谱-质谱法测定糖皮质激素的含量,其相对回收率为61.8%。
[0021]实施例2
玉米赤霉醇类药物双层固相萃取小柱的制备方法
(I)玉米赤霉醇类药物双层固相萃取小柱的制备:
称取0.5克键合氨基硅胶填料填充于体积为6ml且底端装有聚丙烯筛板的聚丙烯柱管内，震动均匀且保证柱床平行在填料上端以筛板固定，再称取0.5g无水硫酸钠装填于柱管内，摇匀后同样以筛板固定。
[0022](2)玉米赤霉醇类药物固相萃取小柱的应用与玉米赤霉醇类药物的分离、富集和纯化:称取5g试样处理，转移处理后的样液至固相萃取柱的顶部，以每秒一滴的流速过柱。合并收集洗脱液，过滤处理分析,滤液供液相色谱-质谱法测定玉米赤霉醇类药物的含量，其相对回收率为86.7%。
[0023]对比例，仅采用键合氨基硅胶为填料的单层固相萃取柱进行试验:
称取5g试样处理，转移处理后的样液至固相萃取柱的顶部，以每秒一滴的流速过柱。合并收集洗脱液，过滤处理分析,滤液供液相色谱-质谱法测定玉米赤霉醇类药物的含量，其相对回收率为63.2%。
[0024]实施例3
氨基甲酸酯双层固相萃取小柱的制备方法
(I)氨基甲酸酯双层固相萃取小柱的制备:
称取I克中性氧化铝填料填充于体积为6ml且底端装有聚丙烯筛板的聚丙烯柱管内，震动均匀且保证柱床平行在填料上端以筛板固定，再称取0.5g氯化钙装填于柱管内，摇匀后同样以筛板固定。
[0025](2)氨基甲酸酯固相萃取小柱的应用与玉米赤霉醇类药物的分离、富集和纯化:称取5g试样处理，转移处理后的样液至固相萃取柱的顶部，以每秒一滴的流速过柱。合并收集洗脱液，过滤处理分析，滤液供气象色谱发测定氨基甲酸酯含量，其相对回收率为89.3%。
[0026]对比例，仅采用中性氧化铝为填料的单层固相萃取柱进行试验:
称取5g试样处理，转移处理后的样液至固相萃取柱的顶部，以每秒一滴的流速过柱。合并收集洗脱液，过滤处理分析，滤液供气相色谱法法测定氨基甲酸酯的含量，其相对回收率为67.6%ο
【主权项】
1.一种双层固相萃取小柱的装填方法，具体方法为:首先称取一定量的正相吸附性填料或正相键合填料，装填到具有筛板的固相萃取柱管内，震动均匀至柱床平行后在填料上端以筛板固定，此为小柱的下层；接着称取一定量的吸水性填料继续装填到固相萃取柱管内，震动均匀柱床平行后在吸水性物质上端以筛板固，此为小柱的上层。
2.根据权利要求1所述的双层固相萃取小柱的装填方法，其特征在于: 其装填步骤如下: (1)称取一定量的正相吸附性填料或正相键合填料； (2)装填到具有筛板的固相萃取柱管内； (3)震动均匀，保证柱床平行； (4)安装筛板固定； (5)称取一定量的吸水性填料； (6)装填到具有正相填料的固相萃取柱管内； (7)震动均匀，保证柱床平行； (8)安装筛板固定。
3.根据权利要求2所述的双层固相萃取小柱的装填方法，其特征在于，所述的步骤(I)中正相填料为硅胶、氧化铝、硅藻土、硅胶键合氨基或二醇基中的一种。
4.根据权利要求2所述的双层固相萃取小柱的装填方法，其特征在于，所述的步骤(5)中吸水性填料为氧化钙、氢氧化钠、无水硫酸镁、固体氯化钙和固体氯化镁中的一种。
5.根据权利要求3所述的双层固相萃取小柱的装填方法，其特征在于:所述正相填料粒径在60-80Mm之间。
6.根据权利要求4所述的双层固相萃取小柱的装填方法，其特征在于:所述吸水性填料粒径在200-300目之间。
【专利摘要】本发明公开了一种双层固相萃取小柱的装填方法及固相萃取小柱。该装填方法为：首先称取一定量的正相吸附性填料或正相键合填料，装填到具有筛板的固相萃取柱管内，震动均匀至柱床平行后在填料上端以筛板固定，此为小柱的下层；接着称取一定量的吸水性填料继续装填到固相萃取柱管内，震动均匀柱床平行后在吸水性物质上端以筛板固，此为小柱的上层。本发明采用干法装柱填装双层固相萃取小柱，此方法便利有机样品中水分杂质去除同时实现样品过柱分离；丰富了固相萃取小柱的应用范围，吸附杂质种类增多；方法简便，易于装填且利用此方法制备的双层固相萃取小柱经试验证明萃取效率更高，过滤产物中杂质更少。
【IPC分类】G01N30-56
【公开号】CN104678033
【申请号】CN201310618775
【发明人】周利娟, 郁万中, 韩海峰
【申请人】江苏汉邦科技有限公司
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2013年11月29日