紧凑型多介质色谱的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明的领域是连续的多色谱材料在实现多分析物的紧凑分析中的用途。
【背景技术】
[0002] 美国专利第4, 956, 302号和其再颁RE39, 664E公开了 一种侧向流动色谱绑定检测 装置。然而，其中公开的装置并未允许具有交叉反应性的两个或多个分析物的单独检测和 /或测量。
[0003] 美国专利第4, 960, 691号公开了一种通过利用色谱介质和能够运送试剂和/或样 品的溶剂来确定配体或受体的色谱测试条。然而，在其中公开的在单个测试条内的色谱介 质无法允许具有交叉反应性的不同分析物的色谱分离，因而仅其中的单个测试条无法单独 测量和/或检测具有交叉反应性的单独分析物。
[0004] 前面提到的技术并没有利用传统色谱法的力量。它们没有在紧凑型装置中在重点 照护检验（a point of care)或非实验室环境（non-laboratory setting)下分离高度相似 的分子。需要一种能够实现用于重点照护检验的高相关性的多分析物分离的紧凑型装置。
【发明内容】
[0005] 本发明一方面涉及一种紧凑型色谱装置，包括：
[0006] a)具有第一末端和第二末端的外壳，包括：
[0007] (i)长度为Lt，宽度为Wt，以及厚度为Tt的顶部；
[0008] (ii)长度为Lb，宽度为Wb，以及厚度为Tt的与所述顶部相对并与顶部的间隔距离 为Tp的底部；
[0009] 其中，所述顶部或底部具有透明区域；
[0010] (iii)第一间隔物；以及
[0011] (iv)与所述第一间隔物平行并与第一间隔物的间隔距离为ds的第二间隔物，所 述第一和第二间隔物位于所述顶部和底部之间，并且各自的长度为Lp，宽度为Lp，厚度为 Tp ;
[0012] b)槽，其位于所述两个间隔物之间并接近所述外壳的第一末端；
[0013] C)两种或多种色谱介质，其按照有序串联地排列，位于所述间隔物和外壳的顶部 和底部之间，并位于所述槽之后；
[0014] d)非必须地一个或多于一个的筛板（frit)，其作为多孔间隔物，位于所述串联排 列的色谱介质之前和/或之间，以及
[0015] e)吸液芯（wick)，其作为用于接收液体的多孔接收器，位于两种或多种色谱介质 之后。
[0016] 所述顶部可进一步包括通气孔。所述两种或多种色谱介质可选自亲和性材料和离 子交换材料。所述装置可进一步包括固定在至少一种色谱介质之上的色彩形成底物。
[0017] 在本发明的一个实施方式中，所述两种或多种色谱介质的至少一种选自颗粒物和 多孔非颗粒物。
[0018] 在本发明的另一个实施方式中，所述两种或多种色谱介质和筛板是干燥的形式。
[0019] 在本发明的另一个实施方式中，所述两种或多种色谱介质和/或一个或多于一个 的筛板含有酸、碱、盐、缓冲液、酶底物、配体或蛋白质。
[0020] 在本发明的另一个实施方式中，所述两种或多种色谱介质的至少一种具有对 糖基化组分的亲和性。例如，所述两种或多种色谱介质的至少一种含有凝集素、硼酸盐 (boronate)或抗体。
[0021] 在本发明的另一个实施方式中，所述装置可包括：至少三种色谱介质，其中第一、 第二和第三色谱介质为：
[0022] (i)分别为硼酸盐、阴离子交换材料和阳离子交换材料；或者
[0023] (ii)分别为凝集素、硼酸盐和离子交换材料。
[0024] 在本发明的另一个实施方式中，所述装置包括两种色谱介质，其中一种是阴离子 交换材料，另一种是阳离子交换材料。
[0025] 在本发明的另一个实施方式中，所述两种或多种色谱介质按照这样的次序排列： 所述第一介质适合捕获第一分析物以避免与第二分析物的干扰，所述第二介质适合捕获第 二分析物以避免与第三分析物的干扰，所述第三介质适合在没有干扰下捕获第三分析物。
[0026] 另一方面，本发明涉及分析样品中一种或多种分析物的方法，包括：
[0027] a)以预测量体积的缓冲液稀释含有一种或多种分析物的样品以获得稀释样品；
[0028] b)将一部分稀释样品加入前面提到的色谱装置；
[0029] c)通过毛细管作用允许所述稀释样品经过色谱介质以在两种或多种色谱介质中 分离分析物；
[0030] d)在所述装置中光学地测量分离的分析物；
[0031] e)通过与标准对比，确定装置内特定位置的所述两种或多种色谱介质上保持的分 离的分析物的存在和/或量。
[0032] 在本发明的一个实施方式中，所述方法进一步包括在光学测量步骤之前允许进行 色彩反应的步骤。
[0033] 在本发明的另一个实施方式中，所述一种或多种分析物包含酶。
[0034] 在本发明的另一个实施方式中，所述方法包括前面提到的步骤（a)、（d)、（e)，但具 有如下不同的步骤（b)和（c):
[0035] (b)将一部分稀释样品加入包含至少三种色谱介质的色谱装置；以及
[0036] (c)通过毛细管作用允许所述稀释样品经过色谱介质以在三种色谱介质中分离分 析物；其中所述样品为：
[0037] (i)血液样品，且分析物为HbAlc、HbF和其他血红蛋白变体；
[0038] (ii)从酒精中毒的受试者（alcoholicsubject)获得的血液样品，且分析物为酒 精中毒的血红蛋白加合物、HbAlc和其他血红蛋白变体；
[0039] 或者
[0040] (iii)从患有半乳糖血症的患者获得的血液样品，且分析物为半乳糖血症的血红 蛋白、HbAlc和其他血红蛋白变体。
[0041] 在本发明的另一个实施方式中，所述三种色谱介质按照这样的次序排列：
[0042] (i)所述第一介质适合捕获HbAlc以避免与HbF的干扰，所述第二介质适合捕获 HbF以避免与其他血红蛋白变体的干扰，所述第三介质适合在没有干扰下捕获其他血红蛋 白变体；
[0043] (ii)所述第一介质适合捕获酒精中毒的血红蛋白加合物以避免与HbAlc的干扰， 所述第二介质适合捕获HbAlc以避免与其他血红蛋白变体的干扰，所述第三介质适合在没 有干扰下捕获其他血红蛋白变体；或者
[0044] (iii)所述第一介质适合捕获半乳糖血症的血红蛋白以避免与HbAlc的干扰，所 述第二介质适合捕获HbAlc以避免与其他血红蛋白变体的干扰，所述第三介质适合在没有 干扰下捕获其他血红蛋白变体。
[0045] 在本发明的另一个实施方式中，所述样品为血液样品，且分析物为HbAlc和HbAQ， 且所述装置具有按这样的次序排列的两种色谱介质：第一介质适合捕获HbAlc以避免与 HbA。的干扰，第二介质适合在没有干扰下捕获HbA。。
[0046] 这些及其他方面将通过以下与附图相关联的优选实施方式的描述变得显而易见， 尽管可能会在不脱离本公开新颖性概念的实质和范围内会有改变和修饰。
[0047] 附图显示了本发明的一个或多个实施方式，并且和文字描述一起用于解释本发明 的原理。可能的情况下，无论何处，在图的各处使用的相同的参考编号指代实施方式的相同 或相似的元素。
【附图说明】
[0048] 图1A是根据本发明的一个实施方式的色谱装置示意图；
[0049] 图1B是图1A中所示装置的顶视图；
[0050] 图1C是图1A中所示装置的侧视图；
[0051] 图1D是图1A中所示装置的横截面图；
[0052] 图2A是显示在包含硼酸盐和SP色谱介质的装置上血红蛋白的色谱分离的结果 图；
[0053] 图2B是显示HbAlc测量结果的线性图；
[0054] 图3是显示在SP色谱介质中对血红蛋白迀移的用酸或碱处理的第二筛板的效果 的柱状图；
[0055] 图4是显示使用三种色谱介质的血红蛋白分离的结果图；
[0056] 图5是显示使用非颗粒物色谱介质的血红蛋白分离的结果图。
【具体实施方式】
[0057] 在本发明的上下文中，以及在每个术语使用的具体语境中，本说明书中使用的术 语一般具有其在本领域中普通的涵义。以下，或在本说明书的其他位置讨论用于描述本发 明而使用的某些术语，从而向实施者提供关于本发明的
【发明内容】
的额外指导。为了方便起 见，某些术语可能被突出显示，例如使用斜体和/或引号。突出显示并不影响术语的范围和 意义；在相同的上下文中，无论是否被突出显示，术语的范围和意义是相同的。最好能够通 过一种以上的方式来解说同样的事情。作为结果，可以使用替代性的语言和同义词以用于 此处讨论的任意一个或多个术语，无论是否在此处推敲或讨论术语，也不施加任何特殊意 义。提供用于某些术语的同义词。一个或多个同义词的描述并不排除使用其他的同义词。 在本说明书（包括在此处讨论的任意术语的实施例）任意位置的使用的实施例仅为示例性 的，并且决不限制本发明或任意示例的术语的范围和意义。同样，本发明也不被此说明书中 给出的不同实施方式所限制。