样本分析装置及样本分析方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种通过测定由尿或体液等样本与试剂混合而成的测定试样来分析样本的样本分析装置和样本分析方法。
【背景技术】
[0002]对采自生物体的血液或尿等样本所含有的成分进行分析的样本分析在临床检查领域应用广泛，近年来，能自动分析样本的样本分析装置获得应用。
[0003]专利文献I公开了一种用流式细胞技术分析细胞的细胞分析装置。此专利文献I中记述的细胞分析装置将含有核酸被染色的细胞的测定试样放入流动室，激光照射该流动室，在流经流动室的测定试样上形成测定试样流动方向的直径(宽)3~8 ym的射束点，用此时焚光信号的脉冲面积(积分值)区分出核大小为10~15 μπι的异常细胞和核大小为5~7 μπι的正常细胞。
[0004]专利文献
专利文献1:特开(日本专利公开)2009-103687号公报。
【发明内容】
[0005]发明要解决的技术问题
尿和体液中不仅有白细胞、上皮细胞、异型细胞等较大细胞，有时还含有细菌等小细胞。例如，白细胞直径大约10~15μπι，其核直径约为ΙΟμπι。与此相对，细菌直径仅约0.4-2 μ mo即细菌比白细胞的核还要小很多。
[0006]专利文献I所记述的细胞分析装置适用于分析含有大型细胞的样本，但不适合分析诸如尿或体液那种既含有大型细胞也含有小型细胞的、所含有的细胞大小差异大的样本。
[0007]本发明正是有鉴于此，其目的在于提供一种能分析含有从大细胞到小细胞的、细胞大小差异大的尿或体液等样本的样本分析装置和样本分析方法。
[0008]解决技术问题所采用的技术本发明第一形态涉及的样本分析装置具有:混合样本和核酸染色试剂制备测定试样的试样制备部件、用光照射所述测定试样所含有的细胞，接收细胞所发出的荧光，输出荧光信号的光学检测部件、从所述光学检测部件输出的荧光信号获取细胞荧光脉冲面积和荧光强度的信号处理部件、以及能够根据荧光脉冲面积检测所述测定试样所含有的白细胞，根据荧光强度检测所述测定试样所含有的细菌的信息处理部件。
[0009]由此，能够根据荧光脉冲面积正确检测出白细胞这一大型细胞，根据荧光强度正确检测出细菌这种小型细胞。
[0010]在上述发明中还可以如下设计:所述信息处理部件能够根据荧光脉冲面积进一步检测所述测定试样中所含有的上皮细胞。以此，还能够根据荧光脉冲面积正确检测出上皮细胞这一大型细胞。
[0011]在上述形态下还可以如下设计:所述信息处理部件能够根据荧光脉冲面积进一步检测出所述测定试样中所含有的与白细胞和上皮细胞不同的异型细胞。由此，根据荧光脉冲面积也能够正确检测出异型细胞这种大型细胞。
[0012]在上述形态下还可以如下设计:所述信息处理部件能够根据荧光强度进一步检测所述测定试样中所含有的真菌。由此，还能够根据荧光强度正确地检测真菌这一小型细胞。
[0013]在上述形态下还可以如下设计:所述信息处理部件能够根据荧光强度进一步检测所述测定试样中所含有的精子。由此，还能够根据荧光强度正确地检测精子这一小型细胞。
[0014]在上述形态下还可以如下设计:所述信息处理部件能够根据荧光强度进一步检测出所述测定试样中所含有的毛滴虫。由此，还能够根据荧光强度正确地检测毛滴虫这一小型细胞。
[0015]在上述形态下还可以如下设计:所述光学检测部件包括形成测定试样的试样流的流动室、以及向所述流动室照射光并形成射束点的光源，所述试样流流动方向的射束点直径为3 μ m以上8 μ m以下。由此，射束点直径小于大型细胞、大于小型细胞，根据荧光脉冲面积就能正确检测大型细胞，根据荧光强度就能正确检测小型细胞。
[0016]在上述形态下还可以如下设计:所述光学检测部件接收细胞所发出的散射光，输出散射光信号，所述信息处理部件能够根据基于散射光信号的细胞的参数和所述荧光脉冲面积检测所述测定试样中所含有的白细胞。由此，不仅使用荧光脉冲面积，还使用基于散射光信号的细胞的参数，能够更准确地检测白细胞。
[0017]在上述形态下还可以如下设计:所述信息处理部件能够根据基于散射光信号的细胞的参数和所述荧光强度检测所述测定试样中所含有的细菌。由此，不仅使用荧光强度，还使用基于散射光信号的细胞的参数，能够更准确地检测细菌。
[0018]在上述形态下还可以如下设计:所述光学检测部件能够用第一检测灵敏度和灵敏度高于第一检测灵敏度的第二检测灵敏度输出荧光信号，所述信息处理部件能够根据以第一检测灵敏度输出的荧光信号的荧光脉冲面积检测白细胞，根据以第二检测灵敏度输出的荧光信号的荧光强度检测细菌。由此，根据细胞大小使用适当灵敏度的荧光信号，能够更准确地检测白细胞和细菌。
[0019]本发明另一形态的样本分析装置具有:混合样本和核酸染色试剂制备测定试样的试样制备部件、具有光源和流动室，在所述光源光照下的所述流动室内形成所述测定试样的试样流，以此从所述测定试样所含有的细胞获取反映细胞大小或核直径的参数以及细胞的荧光脉冲面积和荧光强度的测定部件、根据荧光脉冲面积识别具有在所述一定值以上的所述参数的细胞的种类，根据荧光强度识别具有不到一定值的所述参数的细胞的种类的信息处理部件。
[0020]由此，能够根据反映细胞大小或核直径的参数值适当使用荧光脉冲面积和荧光强度，得以正确检测各种大小或各种核直径的细胞。
[0021]在上述形态下还可以如下设计:所述信息处理部件将具有一定值以上的所述参数且具有在一定范围内的荧光脉冲面积的细胞识别为白细胞、上皮细胞或异型细胞，将具有不到一定值的所述参数且具有在一定范围内的荧光强度的细胞识别为细菌、真菌、精子或毛滴虫。由此，能够用荧光脉冲面积正确检测出白细胞、上皮细胞或异型细胞这种大型细胞，用荧光强度正确检测细菌、真菌、精子或毛滴虫这种小型细胞。
[0022]在上述形态下还可以如下设计:所述测定部件包括:接收所述试样流中所含有的细胞的散射光，输出散射光信号的散射光受光部件、接收荧光并输出荧光信号的荧光受光部件，所述信息处理部件将所述散射光信号作为所述反映细胞大小或核直径的参数使用。
[0023]本发明的另一形态提供一种样本分析装置，包括:混合样本和核酸染色试剂，制备测定试样的试样制备部件；用光照射所述测定试样中所含有的细胞，接收细胞所发出的荧光，输出荧光信号的光学检测部件；从所述光学检测部件输出的荧光信号获取细胞荧光脉冲面积和荧光强度的信号处理部件；处理器；及储存有计算机程序以便使所述处理器进行以下处理的存储部件:根据荧光脉冲面积检测所述测定试样中所含有的白细胞；根据荧光强度检测所述测定试样中所含有的细菌。
[0024]优选地，所述样本是尿。
[0025]本发明其他形态涉及一种样本分析方法，其具有以下步骤:混合样本和核酸染色试剂，制备测定试样的步骤；让所制备的测定试样流过流动室，用光照射所述流动室中的测定试样的试样流的步骤；输出与测定试样中的细胞在光照下发出的荧光相应的荧光信号的步骤；从荧光信号中获取细胞的荧光脉冲面积和荧光强度的步骤；根据荧光脉冲面积检测所述测定试样中所含有的白细胞的步骤；根据荧光强度检测所述测定试样中所含有的细菌的步骤。
[0026]本发明的另一形态提供一种样本分析方法，包括以下步骤:混合样本和核酸染色试剂，制备测定试样的步骤；用光照射制备的所述测定试样的步骤；根据所述测定试样中的细胞在光照下发出的光，获取反映细胞大小或核直径的参数以及细胞的荧光脉冲面积和荧光强度的步骤；根据荧光脉冲面积识别具有一定值以上的所述参数的细胞种类的步骤；根据荧光强度识别具有不到一定值的所述参数的细胞种类的步骤。
[0027]发明的有益效果采用本发明，能够正确分析含有从大型细胞到小型细胞的、大小差距大的细胞的尿或体液等样本。
【附图说明】
[0028]图1为实施方式涉及的尿样本分析装置的整体结构斜视图；
图2为试样制备部件和光学检测部件简要功能的结构图；
图3为光学检测部件的结构图；
图4为实施方式涉及的尿样本分析装置的结构框图；
图5为信息处理部件的结构框图；
图6为实施方式涉及的尿样本分析装置的样本测定处理步骤的流程图；
图7为测定试样制备处理步骤的流程图；
图8为有核成分测定处理步骤的流程图；
图9A为说明光学信号强度的示意图；
图9B为说明光学信号脉冲幅度的示意图；
图9C为说明光学信号脉冲面积的示意图；
图10为测定数据分析处理步骤的流程图；
图11为说明尿中有核成分大小与核酸量关系的示意图；
图12A为说明从大型有形成分获得的荧光信号脉冲面积的示意图； 图12B为说明从小型有形成分获得的荧光信号脉冲面积的示意图；
图13为前向散射光强度和前向散射光脉冲幅度所规定的特征参数空间中有核成分的出现区域的示意图；
图14为前向散射光强度和第一高灵敏度荧光强度所规定的特征参数空间中有核成分出现区域的示意图；
图15为前向散射光脉冲幅度和低灵敏度荧光脉冲面积所规定的特征参数空间中有核成分出现区域的示意图；
图16A为白细胞检测结果一例的散点图；
图16B为上皮细胞检测结果一例的散点图；
图16C为异型细胞检测结果一例的散点图；
图17为前向散射光强度和第一高灵敏度荧光强度所规定的特征参数空间中有核成