一种测定盐酸多巴胺的方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及盐酸多己胺的测定方法，特别是巧光桃红巧光巧灭法测定盐酸多己胺 的方法。
【背景技术】
[000引多己胺（Dopamine,DA)是一种最重要的儿茶酪胺，在中枢神经系统及肾脏系统 中起着关键的作用。体内的多己胺分泌失调将导致屯、脏病、精神分裂症和帕金森氏症等疾 病。盐酸多己胺水溶性好、可增强屯、肌收缩力，增加排血量，并大量用于屯、肌梗塞、创伤、内 毒素败血症、屯、脏手术、肾功能衰竭、充血性屯、力衰竭等引起的休克综合征。因此，建立一种 灵敏、快速、简单的多己胺检测方法，对生物分析、生理学、临床医学W及相关药物的质量控 制研究具有十分重要的意义。目前，测定多己胺的方法有电化学法、色谱法、化学发光法等。 而巧光法具有分析灵敏度高、方法简便、仪器价廉等优点，常应用于药物分析检测。巧光桃 红（RA)是一种性能优异的强巧光物质，常作为巧光试剂用于定量分析，但目前应用巧光桃 红测定盐酸多己胺的方法尚未见报道。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种巧光桃红巧光巧灭法测定盐酸多己胺的方法。
[0004] 具体步骤为； 在 7 支 10血比色管中分别加入 0. 00、0. 05、0. 1、0. 2、0. 5、0. 9、1. 3血 7. 0X10- 4~ 9. 0X10"4mol/L的盐酸多己胺值A)溶液，再在每支比色管中都分别加入0.5~3.0血 P化2. 0~13. 0的氯化钟-氨氧化钢缓冲溶液和0. 2~0. 9血1. 0X10"5mol/L的巧光桃 红（RA)溶液；W不加盐酸多己胺的溶液为试剂空白，二次蒸馈水定容至刻度，摇匀，静置20 分钟后，于巧光光度计上，设置激发波长为536nm，发射波长为551nm，激发和发射狭缝均为 2. 5nm，电压为600V，用1cm巧光比色皿，分别测定含盐酸多己胺溶液的巧光强度值F和试剂 空白的巧光强度值F。，计算巧光强度差值AF=F"-F;其巧光强度差值AF与盐酸多己胺浓 度0在4.03~105 4111〇1/1范围内成线性关系，线性回归方程为；么尸=2.532〔+19.04((：为 盐酸多己胺的浓度，单位为ymol/L),相关系数0.9992，检出限为1.26^111〇1/1;另取盐酸 多己胺注射液1支，全部转移至100血容量瓶中，用二次蒸馈水定容至刻度，取0. 1~0. 3血 溶液同法测定巧光强度值，计算出盐酸多己胺注射液中盐酸多己胺的含量。
[0005] 本发明测定方法灵敏度高、线性范围宽、操作简便。
【附图说明】
[0006] 图1为本发明实施例空白与1.05X1(T4mol/L盐酸多己胺的巧光光谱图。
[0007] 图中标记a;pH13. 0KCl-NaOH- 0. 7ymol/LRA的激发光谱；b;pH13. 0 KCl-NaOH- 0. 7ymol/LRA的发射光谱；c;pH13.0KCl-NaOH- 0. 7ymol/L RA-1. 05Xl〇-4mol/LDA的发射光谱。
【具体实施方式】[000引 实施例； 在 7支 10血比色管中分别加入0. 00、0. 05、0. 1、0. 2、0. 5、0. 9、1. 3mL8. 068Xl0-4mol/L的盐酸多己胺溶液，再在每支比色管中都分别加入2. 5mLp化3. 0的氯化钟-氨氧化钢缓 冲溶液和0. 7血1. 0X10- 5mol/L的巧光桃红溶液，W不加盐酸多己胺的溶液为试剂空白， 二次蒸馈水定容至刻度，摇匀，静置20分钟。于巧光分光光度计上（CaryEclipse型，美国 Varian公司），设置激发波长为536nm，发射波长为551nm，激发和发射狭缝均为2. 5nm，电压 为600V，用1cm巧光比色皿，分别测定含盐酸多己胺溶液的巧光强度值F和试剂空白的巧 光强度值F。，计算巧光强度差值AF=Fa-F;其巧光强度差值AF与盐酸多己胺浓度C在 4.03~105ymol/L范围内成线性关系，线性回归方程为；AF=2.532C+19.04(C为盐酸多 己胺的浓度，单位为ymol/L),相关系数0.9992,检出限为1.26ymol/L。另取两个厂家 (广东白云山明兴制药有限公司和上海禾丰制药厂，规格：盐酸多己胺含量20mg/2mL)生产 的盐酸多己胺注射液各一支，分别全部转移至lOOmL容量瓶中，用二次蒸馈水定容至刻度， 各取0.2mL溶液同法测定巧光强度值，计算出盐酸多己胺注射液中盐酸多己胺的含量，同 时做了加标回收实验，结果见表1。
[0009] 表1;盐酸多己胺注射液测定结果（n=5)
【主权项】
1. 一种测定盐酸多巴胺的方法，其特征在于具体步骤为： 在 7 支 IOmL 比色管中分别加入 0? 00、0? 05、0. 1、0. 2、0. 5、0. 9、1. 3mL 7. OXKT4~ 9. 0 X l(T4m〇l/L的盐酸多巴胺溶液，再在每支比色管中都分别加入0. 5~3. OmL pH12. 0~ 13. 0的氯化钾-氢氧化钠缓冲溶液和0. 2~0. 9mL I. 0 X KT 5m〇l/L的荧光桃红溶液；以 不加盐酸多巴胺的溶液为试剂空白，二次蒸馏水定容至刻度，摇匀，静置20分钟后，于荧光 光度计上，设置激发波长为536nm，发射波长为551nm，激发和发射狭缝均为2. 5nm，电压为 600V，用Icm荧光比色皿，分别测定含盐酸多巴胺溶液的荧光强度值F和试剂空白的荧光强 度值F tl，计算荧光强度差值AF= Ftl-F ;其荧光强度差值A F与盐酸多巴胺浓度C在4. 03~ 105 y mol/L范围内成线性关系，线性回归方程为：AF=2. 532C+19. 04, C为盐酸多巴胺的浓 度，单位为ymol/L，相关系数0.9992，检出限为1.26 11111〇1/1;另取盐酸多巴胺注射液1 支，全部转移至IOOmL容量瓶中，用二次蒸馏水定容至刻度，取0. 1~0. 3mL溶液同法测定 荧光强度值，计算出盐酸多巴胺注射液中盐酸多巴胺的含量。
【专利摘要】本发明公开了一种测定盐酸多巴胺的方法。于7支10mL比色管中分别加入0.00、0.05、0.1、0.2、0.5、0.9、1.3mL 7.0×10－4～9.0×10－4mol/L的盐酸多巴胺溶液，再在每支管中加入0.5～3.0mL pH12.0～13.0的氯化钾-氢氧化钠缓冲液和0.2～0.9mL 1.0×10－5mol/L的荧光桃红溶液；以不加盐酸多巴胺的溶液为试剂空白，用二次蒸馏水定容至刻度，静置20分钟后，于荧光光度计上，以536nm为激发波长，551nm为发射波长，用1cm荧光比色皿，分别测定含盐酸多巴胺溶液的荧光值F和试剂空白的荧光值F0，计算差值ΔF= F0-F；另取盐酸多巴胺注射液1支转入100mL容量瓶中并定容，同法测定荧光值，计算出注射液中盐酸多巴胺的含量。本发明灵敏度高、线性范围宽、操作简便。
【IPC分类】G01N21-64
【公开号】CN104880442
【申请号】CN201510259375
【发明人】唐宁莉, 张容珲, 陈永宁, 单展, 陈明石
【申请人】桂林理工大学
【公开日】2015年9月2日
【申请日】2015年5月21日