凝胶干胶装置及凝胶干胶方法

文档序号:8556745阅读:1275来源:国知局
凝胶干胶装置及凝胶干胶方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物化学技术领域,具体涉及一种凝胶干胶装置及凝胶干胶方法。
【背景技术】
[0002]在分子克隆、蛋白表达与鉴定的操作过程中,常常需要借助琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶对DNA或蛋白进行电泳,以便对其分子量进行准确判定,进而进行后期的DNA切胶回收或蛋白印迹等实验操作。电泳后的凝胶是一种十分重要和珍贵的实验资料,有必要进行长期保存,以备后期使用。
[0003]但是,若使凝胶暴露在普通室温条件下,会有细菌或真菌滋生。也有将重要的蛋白凝胶保存在普通的纯水、蛋白电泳缓冲液或蛋白凝胶脱色液中的情况,这样仅能对蛋白胶进行短时间保存。保存在缓冲液中的凝胶在后期参考或比较时,一般观胶操作繁琐且容易使蛋白胶碎裂。市面上也有来自国外的凝胶干胶处理装置,此干胶装置价格昂贵、操作繁琐,需要购买配套的干胶缓冲液,而且不能保证最终的干胶质量,容易出现裂胶现象。因此,通常会在DNA或蛋白进行琼脂糖凝胶或聚丙烯胺凝胶电泳后拍照,作为废物丢弃凝胶。

【发明内容】

[0004]本发明的目的之一在于提供一种凝胶干胶装置,另一目的在于提供一种凝胶干胶方法,本发明的凝胶干胶方法借助凝胶干胶装置可有效防止干制的凝胶干裂。
[0005]本发明为了实现上述目的采用如下技术方案:
[0006]本发明提供一种凝胶干胶装置,此凝胶干胶装置包括一块盖板与一块底板,所述盖板借助两个直角凹形卡槽固定在所述底板上;其中所述盖板中央有开口。
[0007]进一步的,所述盖板的所述开口尺寸为9cmX7cm或14cmX9cm。
[0008]进一步的,所述盖板、所述底板以及所述凹形卡槽均为塑料制品或有机玻璃制品,并且制作所述凹形卡槽的塑料材质为PE、HDPE, PA或PP。
[0009]本发明还提供借助所述凝胶干胶装置的干胶方法,此干胶方法包括如下步骤:(I)配制琼脂糖凝胶干胶缓冲液:取I体积的甘油与9体积的TAE,将两者混合,然后在上述混合液中加入10%叠氮钠使混合液终浓度为0.1% ;(2)两张多孔聚乙烯膜以及电泳后待保存的琼脂糖凝胶均由所述步骤(I)制得的凝胶缓冲液完全浸湿,其中,所述多孔聚乙烯膜的尺寸均大于所述盖板开口的尺寸;(3)经所述步骤(2)操作的所述两张多孔聚乙烯膜分别完全覆盖经所述步骤(2)操作的所述凝胶的上表面与下表面;(4)将经所述步骤(3)操作的凝胶由上述凝胶干胶装置固定,并自然阴干。
[0010]进一步的,上述述步骤(2)中,使所述两张多孔聚乙烯膜以及所述琼脂糖凝胶完全浸湿的操作方法为:将所述两张多孔聚乙烯膜以及所述琼脂糖凝胶放入所述步骤(I)制得的琼脂糖凝胶干胶缓冲液中静置I?30min。
[0011]进一步的,上述步骤(3)的操作包括如下步骤:将经所述步骤(2)操作的一张所述多孔聚乙烯膜放置在所述底板上,铺平并撵出气泡;在所述一张多孔聚乙烯膜中央放置经所述步骤(2)操作的所述琼脂糖凝胶,再在所述凝胶上放置另外一张经所述步骤(2)操作的所述多孔聚乙烯膜;然后将所述琼脂糖凝胶周围的气泡撵出;接着将所述盖板盖在被所述两张所述多孔聚乙烯膜覆盖的所述琼脂糖凝胶上,其中,所述琼脂糖凝胶位于所述盖板的所述开口内,并且所述琼脂糖凝胶的长边与所述盖板的所述开口的长边保持平行;然后借助所述两个直角凹形卡槽将夹固所述琼脂糖凝胶的所述底板和所述盖板固定。
[0012]进一步的,上述步骤(4)中所述自然阴干的实施方法为将经所述凝胶干胶装置固定的所述琼脂糖凝胶放在空气湿度为20?50%,温度为O?37°C的条件下。
[0013]本发明还提供另一种干胶方法,此方法包括如下步骤:(I)配制聚丙烯酰胺凝胶干胶缓冲液:取5体积甲醇、4体积超纯水以及I体积乙酸,然后将其混合,即得预制的聚丙烯酰胺凝胶缓冲液;取I体积甘油与9体积上述预制聚丙烯酰胺凝胶缓冲液,然后混合;在上述混合液中加入10%叠氮钠使混合液终浓度为0.1% ;(2)两张多孔聚乙烯膜以及电泳后待保存的聚丙烯酰胺凝胶均由所述步骤(I)制得的聚丙烯酰胺凝胶缓冲液完全浸湿,其中,所述多孔聚乙烯膜的尺寸均大于所述盖板开口的尺寸;(3)经所述步骤(2)操作的所述两张多孔聚乙烯膜分别完全覆盖经所述步骤(2)操作的所述聚丙烯酰胺凝胶的上表面与下表面;(4)将经所述步骤(3)操作的凝胶由上述凝胶干胶装置固定,并自然阴干。
[0014]进一步的,另一种干胶方法中所述步骤(3)的操作包括如下步骤:将经所述步骤
(2)操作的一张所述多孔聚乙烯膜放置在所述底板上,铺平并撵出气泡;在所述一张多孔聚乙烯膜中央放置经所述步骤(2)操作的所述聚丙烯酰胺凝胶,再在所述凝胶上放置另外一张经所述步骤(2)操作的所述多孔聚乙烯膜;然后将所述聚丙烯酰胺凝胶周围的气泡撵出;接着将所述盖板盖在被所述两张所述多孔聚乙烯膜覆盖的所述聚丙烯酰胺凝胶上,其中,所述聚丙烯酰胺凝胶位于所述盖板的所述开口内,并且所述聚丙烯酰胺凝胶的长边与所述盖板的所述开口的长边保持平行;然后借助所述两个直角凹形卡槽将夹固所述聚丙烯酰胺凝胶的所述底板和所述盖板固定。
[0015]进一步的,另一种干胶方法中所述步骤⑷中所述自然阴干的实施方法为将经所述凝胶干胶装置固定的所述聚丙烯酰胺凝胶放在空气湿度为20?50%,温度为O?37°C的条件下。
[0016]本发明的有益效果在于:本发明的凝胶干胶装置制作简单、成本低廉,配合干胶凝胶缓冲液使用,可用于琼脂糖凝胶或聚丙烯胺凝胶的干胶处理;借助本发明的凝胶干胶装置的干胶方法操作简便,有效地解决了目前凝胶干胶制备困难的问题。
【附图说明】
[0017]图1所示为本发明凝胶干胶装置的结构示意图。
[0018]图2所示为本发明另一凝胶干胶装置的结构示意图。
【具体实施方式】
[0019]下文将结合具体实施例详细描述本发明。应当注意的是,下述实施例中描述的技术特征或者技术特征的组合不应当被认为是孤立的,它们可以被相互组合从而达到更好的技术效果。
[0020]首先描述本发明提供的凝胶干胶装置的具体实施例。
[0021]实施例1
[0022]如图1所示,本发明提供的凝胶干胶装置包括第一盖板10与底板30,这两块板的尺寸可相同,并且可以是20cmX20cmX3mm,并且这两块板可由两个直角凹形卡槽40固定。具体而言,第一盖板10具有位于其中央的开口 11,此开口的尺寸为9cmX7cm。该凝胶干胶装置可用于一块尺寸为5cmX8cm的蛋白凝胶或DNA凝胶的干胶。
[0023]进一步地说,第一盖板10与底板30可由有机玻璃板、塑料材料制成,并且所述直角凹形卡槽40由诸如PE、HDPE、PA或PP之类的塑料材质制成。
[0024]实施例2
[0025]如图2所示,本发明提供的凝胶干胶装置包括第二盖板20与底板30,这两块板均为20cmX20cmX3mm的透明有机玻璃板,并且这两块板可由两个直角凹形卡槽40固定。具体而言,第二盖板20具有位于其中央的开口 21,此开口的尺寸为14cmX9cm。该凝胶干胶装置可用于两块尺寸均为5cmX8cm的蛋白凝胶或DNA凝胶的干胶。
[0026]进一步地说,第二盖板20与底板30可由机玻璃板、塑料材料制成。
[0027]下面将详细描述借助上述凝胶干胶装置的干胶方法的具体实施例。
[0028]实施例1
[0029]一、首先配制丙烯酰胺凝胶干胶缓冲液:
[0030]1.试剂:
[0031]甲醇(分析纯)、乙酸(分析纯)、甘油(分析纯),超纯水;
[0032]10%的叠氮钠配制:称取1g NaN3(分析纯)放入烧杯中,加超纯水溶解后,转移至10mL容量瓶中,超纯水定容至100mL,转移至10mL蓝盖瓶中,室温保存。使用时用相应溶液稀释至0.1 %即可。
[0033]2.操作方法
[0034](I)按甲醇:超纯水:乙酸=5:4:1的体积比进行混合,即得预制的聚丙烯酰胺凝胶缓冲液;
[0035](2)按甘油(分析纯):预制聚丙烯酰胺凝胶缓冲液=I:9的体积比进行混合;
[0036](3)加入10%叠氮钠至上述混合溶液中,使混合液终浓度为0.1%,即得聚丙烯酰胺凝胶干胶缓冲液。
[0037]二、干胶操作
[0038](I)将两张多孔聚乙烯膜(亲水玻璃纸)以及电泳后待保存的聚丙烯酰胺凝胶(目的凝胶)放入步骤一中配制的聚丙烯酰胺凝胶干胶缓冲液中静置,使其充分浸泡;
[0039](2)将经步骤(I)操作的一张亲水玻璃纸放置在底板30上,铺平,避免气泡产生;
[0040](3)将经步骤(2)操作的亲水玻璃纸中央放置经步骤(I)操作的目的凝胶,再在所述目的凝胶上防止另外一张经步骤(I)操作的亲水玻璃纸;
[0041](4)用玻璃棒将经步骤(3)操作后的目的凝胶周围的气泡撵出;
[0042](5)根据目的凝胶尺寸选择对应的盖板(一块凝胶选择第一盖板10,两块凝胶选择第二盖板20),并将选好的盖板盖在经步骤(4)操作后的两张亲水玻璃纸上,保证目的凝胶在盖板的开口区域内,并且凝
当前第1页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1