一种快速测定火锅食品中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱和那可丁的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于食品安全领域，具体涉及一种快速测定火锅食品中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱和那可丁的方法。
【背景技术】
[0002]吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱和那可丁等生物碱是罂粟果壳中的主要成分，长期吸食罂粟果壳及其制品，会出现发冷、出虚汗、乏力、面黄肌瘦、犯困等症状，可造成人注意力、思维和记忆性能的衰退的现象，严重时可能对神经系统、消化系统造成损害，出现内分泌失调等症状，甚至会导致呼吸停止而死亡，还会造成吸食者在心理生理上产生很强的依赖性，造成严重的毒物癖，严重危害消费者的健康。
[0003]我国禁止罂粟壳作为食品添加剂，但由于罂粟壳生物碱能够给人快感使人成瘾的特点，一些不法商家和饭店为了牟取暴利，在火锅食品中添加罂粟壳及其水浸物等违禁原料，使食物味道鲜美，吸引更多的食客。因此，国际条约关于麻醉品和精神药物管理指导原则中规定吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱和那可丁 5种生物碱禁止用于食品，国家卫计委、公安部、国家药品监督管理局相关法规规定严禁在食品中使用罂粟壳(籽)。
[0004]目前，吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱和那可丁常见的检测方法有:HPLC法，HPLC-MS/MS法，GC法，GC-MS法，酶联免疫法，极谱法，薄层色谱法等等。其中HPLC法，HPLC-MS/MS法，GC法，GC-MS法精密度高，灵敏度好，但均需对样品进行复杂的前处理和色谱分离，耗时长且成本高。酶联免疫法操作简便，快捷，但是特异性差，精密度低，受周围环境影响较大。
[0005]直接实时分析质谱(direct analysis in real time，DART)是一种新的质谱电离技术。其原理是直接在大气压条件下，中性或惰性气体(如氮气或氦气)经放电产生激发态原子，对该激发态原子进行快速加热和电场加速，使其解析并瞬间离子化待测样品表面的标志性化合物或待测化合物后进行质谱或串联质谱检测。DART的样品无需复杂的样品处理和制备，能在几秒钟内分析存在于气体、液体、固体或材料表面的化合物，从而减少了样品损耗，可快速进行定性和半定量分析，进而实现样品的实时直接分析。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是提供一种快速测定火锅食品中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱和那可丁的方法。
[0007]为实现上述目的，本发明采用如下技术方案:
[0008]火锅食品中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱和那可丁用水-乙腈(V/V，I: I)提取，正己烷去除油脂(含有油脂的食品)，使用实时直接分析离子源串联质谱(DART-MS/MS)进行定性、定量分析，并用内标法进行定量计算和方法学验证。质谱仪器条件:电离为正离子模式，DART离子源温度350 °C，栅级电压350V，质谱质量分析器电压4000V，母离子/定量离子/定性离子:吗啡286/181/165、吗啡-D3 289/165/152、可待因300/215/165、可待因-D3303/215/165、蒂巴因 312/58/249、罂粟碱 340/202/171、那可丁 414/220/353 (其中，蒂巴因、罂粟碱和那可丁均以可待因-D3为内标)，扫描模式:二级扫描。
【具体实施方式】
[0009]下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
[0010]精确称取5g火锅食品样品至50mL离心管中，加入浓度为lmg/kg的内标(吗啡-D3和可待因-D3) 100 μ L，5mL的水-乙腈(V/V，1:1)，1mL正己烷去除油脂(含有油脂的食品)，涡旋混匀，1000rpm离心5min，吸取离心管中提取液2 μ L上样。用DART离子源串联质谱测定二级离子吗啡m/zl81、吗啡-D3m/zl65、可待因m/z215、可待因-D3m/z215、蒂巴因m/z58、罌粟碱m/z202、那可丁 m/z220的离子强度，采用内标标准曲线法定量。
[0011]质谱仪器条件:电离为正离子模式，DART离子源温度350°C，栅级电压350V，质谱质量分析器电压4000V，母离子/定量离子/定性离子:吗啡286/181/165、吗啡-D3289/165/152、可待因 300/215/165、可待因-D3 303/215/165、蒂巴因 312/58/249、罂粟碱340/202/171、那可丁 414/220/353 (其中，蒂巴因、罂粟碱和那可丁均以可待因-D3为内标)，扫描模式:二级扫描。
[0012]实验结果表明，本发明方法测定结果与国标法一致。
[0013]最后需要注意的是，公布实施方式的目的在于帮助进一步理解本发明。但是本领域的技术人员可以理解:在不脱离本发明权利要求的精神和范围内，各种替换和修改都是可能的。因此，本发明不应局限于实施例所公开的内容。本发明要求保护的范围以权利要求书界定的范围为准。
【主权项】
1.一种快速测定火锅食品中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱和那可丁的方法，其特征在于:火锅食品中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱和那可丁用水-乙腈(V/V，I: I)提取，正己烷去除油脂(含有油脂的食品)，使用实时直接分析离子源串联质谱(DART-MS/MS)进行定性、定量分析，以内标法进行定量计算和方法学验证。2.权利要求1中的实时直接分析离子源串联质谱快速测定方法，其特征在于:质谱仪器条件:电离为正离子模式，DART离子源温度350°C，栅级电压350V，质谱质量分析器电压4000V ;母离子/定量离子/定性离子:吗啡286/181/165、吗啡-D3 289/165/152、可待因300/215/165、可待因-D3 303/215/165、蒂巴因 312/58/249、罂粟碱 340/202/171、那可丁414/220/353(其中，蒂巴因、罂粟碱和那可丁均以可待因-D3为内标)；扫描模式:二级扫描。3.权利要求2中的二级扫描模式，其特征在于:吗啡选用在39eV的碰撞能量下荷质比为m/zl81的子呙子为定量呙子，在38eV的碰撞能量下荷质比为m/zl65的子呙子为辅助定性离子；吗啡-D3选用在41eV的碰撞能量下荷质比为m/zl65的子离子为定量离子，在53eV的碰撞能量下荷质比为m/zl52的子离子为辅助定性离子；可待因选用在23eV的碰撞能量下荷质比为m/z215的子离子为定量离子，在37eV的碰撞能量下荷质比为m/zl65的子离子为辅助定性离子；可待因-D3选用在20eV的碰撞能量下荷质比为m/z215的子离子为定量离子，在46eV的碰撞能量下荷质比为m/zl65的子离子为辅助定性离子；蒂巴因选用在14eV的碰撞能量下荷质比为m/z58的子离子为定量离子，在IleV的碰撞能量下荷质比为m/z249的子离子为辅助定性离子；罂粟碱选用在24eV的碰撞能量下荷质比为m/z202的子离子为定量离子，在37eV的碰撞能量下荷质比为m/zl71的子离子为辅助定性离子；那可丁选用在21eV的碰撞能量下荷质比为m/z220的子离子为定量离子，在22eV的碰撞能量下荷质比为m/z353的子离子为辅助定性离子。
【专利摘要】本发明公开了一种快速测定火锅食品中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱和那可丁的方法，属于食品安全领域。火锅食品中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱和那可丁用水-乙腈(V/V，1：1)提取，正己烷去除油脂(含有油脂的食品)，使用实时直接分析离子源串联质谱(DART-MS/MS)进行定性、定量分析，并用内标法进行定量计算和方法学验证。质谱仪器条件：电离为正离子模式，DART离子源温度350℃，栅级电压350V，质谱质量分析器电压4000V，母离子/定量离子/定性离子：吗啡286/181/165、吗啡-D3 289/165/152、可待因300/215/165、可待因-D3 303/215/165、蒂巴因312/58/249、罂粟碱340/202/171、那可丁414/220/353(其中，蒂巴因、罂粟碱和那可丁均以可待因-D3为内标)，扫描模式：二级扫描。
【IPC分类】G01N27/68
【公开号】CN104897768
【申请号】CN201510353193
【发明人】熊晓辉, 王伟霞, 李壹
【申请人】南京工业大学
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月19日