一种环丙唑醇残留的gc-npd方法及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种检测方法，具体涉及一种环丙唑醇残留的GC-Nro方法及其应用。
【背景技术】
[0002] 环丙唑醇化学名称为2-(4-氯苯基）-3-环丙基-1-(1H-1，2,4-三唑-1-基） 丁-2-醇，是瑞士先正达公司1987年研制开发的一种新的具有治疗和内吸作用的三唑类杀 菌剂，通过抑制细菌体内留醇的生物合成而起作用。国内外文献关于环丙唑醇的残留检测 方法的报道主要有：Papadopoulou-Mourkidou等通过丙酮提取、C18柱净化、正己烧定容， 气相色谱-氮磷检测器检测，最低检测浓度为0. 05mg ? kg'研宄了葡萄中环丙唑醇的检测 方法;Miyauchi等通过甲醇提取、Oasis MCX固相萃取小柱净化、乙腈-磷酸盐缓冲液定容， 液相色谱-二极管阵列检测器检测，研宄了木材中环丙唑醇的检测方法Jim6nez等通过甲 醇和水提取，Lichrolut EN固相萃取柱净化，气相色谱-电子轰击离子源质谱法检测，研 宄了葡萄酒中环丙唑醇的检测方法；Momohara等通过甲醇提取，DISMIC-25HP滤膜过滤，丙 酮-正己烷（1 : 1)溶液定容，气相色谱-电子轰击离子源质谱法检测，研宄了木材中环丙 唑醇的检测方法。
[0003] 环丙唑醇对小麦根腐病、白粉病具有较好的防治效果，但是没有关于其在小麦粒、 小麦植株和其生长土壤中的检测方法的报道，且以上方法的提取液是甲醇或丙酮，丙酮提 取时用量较大、杂质多，不利于后期净化；甲醇提取时需要旋蒸，工作效率低，气相色谱-电 子轰击离子源质谱仪没有气相色谱普及率高。
【发明内容】
[0004] 为解决上述问题，本发明提供了一种环丙唑醇残留的GC-Nro方法及其应用，用于 分析小麦粒、小麦植株及土壤中环丙唑醇残留，精确度高。
[0005] 为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
[0006] 一种环丙唑醇残留的GC-NPD方法，包括如下步骤：
[0007] S1、称取样品5-10g于200ml玻璃瓶中，加10ml水及40-50ml乙腈，充分混匀后， 超声30min，然后用滤纸过滤至加有5g氯化钠的具塞量筒中，剧烈振荡lmin，静置lh后取 20mL上清液于100ml烧杯中，置于35 °C加热板上蒸干；
[0008] S2、将弗罗里硅土柱用5mL正己烷润洗，当溶剂液面达到柱吸附层表面时，用5mL 丙酮-正己烷（体积比10 : 90)溶解步骤S1所得的样品，过柱淋洗，重复2次，淋洗液弃 去，用5mL丙酮-正己烷（体积比20 : 80)洗脱液淋洗弗罗里硅土柱，重复5次，合并洗脱 液，置于电加热板上35°C挥发近干，正己烷准确定容至2mL，0. 22 y m滤膜过滤，待测；
[0009] S3、将样品倒入进样瓶中，置于自动进样器中；
[0010] S4、按照以下仪器条件设置仪器参数进行进样，柱温：150 250°C， 5min ;进样口温度：260°C;检测器温度：300°C;柱流量：氢气2. 3mL 空气60mL ?mirT1， 氮气2mL ? mirT1;进样量1 y L(不分流）；
[0011] S5、采集色谱峰面积，用外标法（峰面积）-标准曲线法对样品中环丙唑醇的残留 量进行定量，计算公式为：
[0013] 式中：C-待测样品中农药残留量，mg/Kg ;
[0014] Qr标准溶液浓度，y g/ml ;
[0015] A-待测样品峰面积；
[0016] Af标准溶液峰面积；
[0017] V。-标准溶液进样体积，y 1 ;
[0018] -待测样品定容的体积，ml ;
[0019] V2-待测样品的进样体积，y 1 ;
[0020] M-待测样品的质量，g。
[0021] 其中，所述氮气作为载气，纯度多99. 999%
[0022] 本发明具有以下有益效果：
[0023] 本发明建立了乙腈提取土壤、小麦植株及小麦籽粒中环丙唑醇的前处理方法和气 相色谱仪-氮磷检测器检测的仪器方法，最小检出量为8.2 X l(T12g，空白添加平均回收率 为79. 2 % -95. 6 %，相对标准偏差为1. 9 % -10. 0 %，最低检测浓度均为0. 05mg/kg。本方法 以50mL乙腈作为提取液，与已报道的丙酮作为提取液相比用量较少，后期净化较简单；与 甲醇作为提取液相比，提取、盐析后，加热板蒸干，不需要旋蒸，能提高工作效率；检测所用 的仪器普及率较高，方法易推广应用。方法的重现性，准确度、精密度及检出限均可满足该 农药在小麦上的残留分析要求。
【附图说明】
[0024] 图1为本发明实施例中标准曲线的示意图。
【具体实施方式】
[0025] 为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步 详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发 明。
[0026] 以下实施例中，所使用的试剂为：乙腈（分析纯），正己烷（分析纯），丙酮（分析 纯及色谱纯），氯化钠（分析纯，140°C烘烤4h)。弗罗里硅土固相萃取柱（lOOOmg，6mL)。 [00 27] 实施例1
[0028] 土壤：称取样品10. 0g于200ml玻璃瓶中，加10ml水及40ml乙腈，充分混勾后， 超声30min，然后用滤纸过滤至加有5g氯化钠的具塞量筒中，剧烈振荡lmin，静置lh后取 20mL上清液于100ml烧杯中，置于35°C加热板上蒸干。
[0029] 实施例2
[0030] 植株：称取样品5. 0g于200ml玻璃瓶中，加10ml水及50ml乙腈，充分混匀后，超 声30min，用滤纸过滤至加有5g氯化钠的具塞量筒中，剧烈振荡lmin，静置lh后取25mL上 清液于100ml烧杯中，置于35°C加热板上蒸干。
[0031] 实施例3
[0032] 小麦籽粒：将籽粒打碎成粉，称取样品10. 0g于200ml玻璃瓶中，加10ml水及40ml 乙腈，充分混勾后，超声30min，用滤纸过滤至加有5g氯化钠的具塞量筒中，剧烈振荡lmin， 静置lh后取15mL上清液于100ml烧杯中，置于35°C加热板上蒸干。
[0033] 将弗罗里硅土柱用5mL正己烷润洗，当溶剂液面达到柱吸附层表面时，5mL丙 酮-正己烷（体积比10 : 90)溶解上述实施例1-实施例3所处理样品，过柱淋洗，重复2 次，淋洗液弃去，用5mL丙酮-正己烷（体积比20 : 80)洗脱液淋洗弗罗里硅土柱，重复 5次，合并洗脱液，置于电加热板上35°C挥发近干，正己烷准确定容至2mL，0. 22 y m滤膜过 滤，待测。
[0034] 称取一定量的环丙唑醇标准品，用正己烷溶解定容制成1000mg/L的母液，再逐级 稀释为〇? 〇5mg/L、0.1 mg/L、0. 5mg/L、l. 0mg/L、2mg/L的标准溶液，以进样量（ng)-峰面积 (A)作标准曲线，回归方程为y= 266482X+2296. 7,R2= 0.9997,见图1。
[0035] 在小麦植株、土壤、籽粒的空白对照样品中添加不同浓度的环丙唑醇标准溶液，摇 匀，放置2h后按照样品提取、净化方法处理，测得添加回收率见表1。当添加水平为0. 05mg/ 1^、0.111^/1^、0.211^/1^时，测得土壤的平均回收率为79.24%~91.33%，相对标准偏差 为1. 86 %~5. 51% ;植株的平均回收率为84. 82 %~95. 60%，相对标准偏差为4. 09 %~ 5. 11% ;籽粒的平均回收率为86. 68%~91. 97%，相对标准偏差为6. 85%~9. 96%，符合 残留分析要求。
[0036] 表1小麦植株、土壤、籽粒的空白对照样品中添加不同浓度的环丙唑醇标准溶液 后所测得的添加回收率。
[0038] 综上所述，本具体实施建立了乙腈提取土壤、小麦植株及小麦籽粒中环丙唑醇的 前处理方法和气相色谱仪-氮磷检测器检测的仪器方法，最小检出量为8. 2 X l(T12g，空白 添加平均回收率为79. 2% -95. 6%，相对标准偏差为1.9% -10.0%，最低检测浓度均为 0. 05mg/kg。本方法以50mL乙腈作为提取液，与已报道的丙酮作为提取液相比用量较少，后 期净化较简单；与甲醇作为提取液相比，提取、盐析后，加热板蒸干，不需要旋蒸，能提高工 作效率；检测所用的仪器普及率较高，方法易推广应用。方法的重现性，准确度、精密度及检 出限均可满足该农药在小麦上的残留分析要求。
[0039] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种环丙挫醇残留的GC-NTO方法，其特征在于，包括如下步骤： 51、 称取样品5-lOg于200ml玻璃瓶中，加10ml水及40-50ml己膳，充分混匀后，超声 30min，然后用滤纸过滤至加有5g氯化钢的具塞量筒中，剧烈振荡Imin，静置比后取20mL 上清液于100ml烧杯中，置于35 °C加热板上蒸干； 52、 将弗罗里娃±柱用5血正己烧润洗，当溶剂液面达到柱吸附层表面时，用5血丙 酬-正己烧溶解步骤S1所得的样品，过柱淋洗，重复2次，淋洗液弃去，用5mL丙酬-正己 烧洗脱液淋洗弗罗里娃±柱，重复5次，合并洗脱液，置于电加热板上35°C挥发近干，正己 烧准确定容至2mL，0. 22ym滤膜过滤，待测； 53、 将样品倒入进样瓶中，置于自动进样器中； 54、 按照W下仪器条件设置仪器参数进行进样，柱温；15(TC^"^25(TC，5min;进样 口温度；260°C;检测器温度；300°C;柱流量：氨气2. 3血?min-i，空气60血?min-i，氮气 2mL? 进样量1化； 55、 采集色谱峰面积，用外标法-标准曲线法对样品中环丙挫醇的残留量进行定量，计 算公式为：式中；C-待测样品中农药残留量，mg/kg; C。-标准溶液浓度，μg/ml; A-待测样品峰面积； A。-标准溶液峰面积； V。-标准溶液进样体积，; Vi-待测样品定容的体积，ml; V2-待测样品的进样体积，yi; M-待测样品的质量，g。2. 根据权利要求1所述的一种环丙挫醇残留的GC-NTO方法，其特征在于，所述氮气作 为载气，纯度> 99. 999%。
【专利摘要】本发明公开了一种环丙唑醇残留的GC-NPD方法，包括如下步骤：样品提取精华后倒入进样瓶中，并置于自动进样器中；按照规定的仪器条件设置仪器参数进行进样，采集色谱峰面积，用外标法-标准曲线法对样品中环丙唑醇的残留量进行定量。本发明建立了乙腈提取土壤、小麦植株及小麦籽粒中环丙唑醇的前处理方法和气相色谱仪-氮磷检测器检测的仪器方法，最小检出量为8.2×10-12g，空白添加平均回收率为79.2％-95.6％，相对标准偏差为1.9％-10.0％，最低检测浓度均为0.05mg/kg，后期净化较简单；提取、盐析后，加热板蒸干，不需要旋蒸，能提高工作效率。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN104931614
【申请号】CN201510309891
【发明人】吴绪金, 张军锋, 马婧玮, 周玲, 刘丹黎, 李通, 董小海, 王铁良, 周娟
【申请人】河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2015年6月4日