一种组织切片的固定方法及其用图

文档序号:9287261
一种组织切片的固定方法及其用图
【技术领域】
[0001]本发明属于生物技术领域,具体涉及病理切片粘附防掉片方法。
【背景技术】
[0002]组织切片脱落始终是病理染色过程中不可避免的问题。目前已有的切片预防掉片的方法主要包括火棉胶涂覆、多聚赖氨酸及铬钒明胶处理玻片等。硬组织切片虽然也可以防止掉片,但其切片过厚(约40?100 μ m),组织重叠不易观察,无法进行病理染色。石蜡及冰冻切片可达到1ym以内,可以较好的观察细胞形态,但始终存在一些组织贴片不牢,在染色时易掉片的问题,尤其在蚕丝以及人工韧带等组织工程材料的切片染色中,掉片现象更加突出。同时在HE、丽春红三色和免疫组化等染色中,由于染色步骤繁琐,组织浸泡时间过长等原因,组织掉片现象尤为严重。

【发明内容】

[0003]本发明的目的在于提供一种组织切片的固定方法及其用途。
[0004]为达到上述目的,本发明采用了以下技术方案。
[0005]—种组织切片的固定方法,包括以下步骤:
[0006]I)将实验取材或手术病理标本用多聚甲醛固定,若实验取材或手术病理标本为骨组织,则在多聚甲醛固定后进行脱钙处理;
[0007]2)将经过步骤I)处理后的实验取材或手术病理标本用阿拉伯树胶溶液浸泡24?48小时,然后用冰冻切片机切至5?10 μ m,得组织切片;
[0008]3)将速干胶均匀涂覆于载玻片上,然后将组织切片固定在载玻片上均匀涂覆速干胶的区域上,然后自然风干或用烤片机于55?65°C烤片I?2小时。
[0009]所述组织切片取材自容易掉片的所有实验取材或手术病理标本。
[0010]所述实验取材或手术病理标本为蚕丝组织工程韧带。
[0011]所述将速干胶均匀涂覆于载玻片上具体包括以下步骤:滴若干滴速干胶于载玻片A上,然后立即用载玻片B覆盖在载玻片A上面,使滴在载玻片A上的速干胶水平铺展,从而使速干胶均匀涂覆于载玻片A以及载玻片B上。
[0012]上述组织切片的固定方法在组织染色中的用途。
[0013]所述组织切片用于HE染色、丽春红三色染色或免疫组化染色。
[0014]所述组织切片取材于蚕丝组织工程韧带。
[0015]本发明的有益效果体现在:
[0016]本发明在普通载玻片上均匀涂覆薄层速干胶后,将冰冻组织切片贴片,组织切片与载玻片结合紧密,且制作方便、操作简单,需要处理的时间短,成本低,有效避免了染色过程中出现的掉片现象,彻底解决了病理染色的掉片问题,尤其适用于易脱落的蚕丝材料、组织工程韧带或其他组织工程材料的切片染色,且有效解决了硬组织切片过厚,无法清晰显示细胞等结构的问题。
【附图说明】r> [0017]图1为在经铬钒明胶处理玻片上固定蚕丝韧带切片并进行HE染色结果;
[0018]图2为在涂覆速干胶的玻片上固定蚕丝韧带切片并进行HE染色结果。
【具体实施方式】
[0019]下面结合附图和实施例对本发明作详细说明。
[0020]取经多聚甲醛固定、脱钙的蚕丝韧带组织,使用阿拉伯树胶溶液(含质量分数10%阿拉伯树胶和30%的蔗糖的水溶液)浸泡24?48小时,得到样本,利用冰冻切片机将样本切成5?10 μ m厚的组织切片,在普通载玻片上滴I滴速干胶(例如,义乌市绿洁日用品厂,大象卡胶水),利用另外一张载玻片采用迅速压片的方法,将速干胶均匀地涂覆于两片载玻片上,再迅速将组织片粘附于其中一片载玻片上涂覆速干胶的区域上;然后自然风干或烤片机上(60°C )烤片I?2小时。对照组使用经铬钒明胶处理玻片粘附组织切片,同时进行HE染色。
[0021]参见图1以及图2,图1中可见染色后组织掉片严重(铬钒明胶处理玻片);图2中染色色泽正常(本发明方法处理的玻片),几乎无掉片现象。
[0022]本发明所述组织切片固定方法可以有效避免组织染色过程中的掉片(脱片)现象。
【主权项】
1.一种组织切片的固定方法,其特征在于:包括以下步骤: 1)将实验取材或手术病理标本用多聚甲醛固定,若实验取材或手术病理标本为骨组织,则在多聚甲醛固定后进行脱钙处理; 2)将经过步骤I)处理后的实验取材或手术病理标本用阿拉伯树胶溶液浸泡24?48小时,然后用冰冻切片机切至5?10 μ m,得组织切片; 3)将速干胶均匀涂覆于载玻片上,然后将组织切片固定在载玻片上均匀涂覆速干胶的区域上,然后自然风干或用烤片机于55?65°C烤片I?2小时。2.根据权利要求1所述一种组织切片的固定方法,其特征在于:所述组织切片取材自容易掉片的所有实验取材或手术病理标本。3.根据权利要求1所述一种组织切片的固定方法,其特征在于:所述实验取材或手术病理标本为蚕丝组织工程韧带。4.根据权利要求1所述一种组织切片的固定方法,其特征在于:所述将速干胶均匀涂覆于载玻片上具体包括以下步骤:滴若干滴速干胶于载玻片A上,然后立即用载玻片B覆盖在载玻片A上面,使滴在载玻片A上的速干胶水平铺展,从而使速干胶均匀涂覆于载玻片A以及载玻片B上。5.一种如权利要求1所述组织切片的固定方法在组织染色中的用途。6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于:所述组织切片用于HE染色、丽春红三色染色或免疫组化染色。7.根据权利要求5所述的用途,其特征在于:所述组织切片取材于蚕丝组织工程韧带。
【专利摘要】本发明提供一种组织切片的固定方法及其用途,将速干胶滴在载玻片上,均匀涂抹成薄层,将组织切片迅速粘附在挂速干胶的载玻片上,组织切片与载玻片结合紧密,几乎不会发生掉片现象,且操作简单,使用的载玻片比市场上带胶的切片价格低廉,且可用于HE染色、免疫组化等各种染色。
【IPC分类】G01N1/31, F16B11/00
【公开号】CN105004594
【申请号】CN201510419068
【发明人】李宏国, 范宏斌, 孙立国, 郝章英, 朱小燕, 薛英森, 刘鑫成, 吴拮
【申请人】中国人民解放军第513医院
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年7月16日...
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