一种食品有机污染物羟基多溴联苯醚的纯化富集预处理技术的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于食品有机污染物羟基多溴联苯醚的纯化富集预处理技术领域，特别是 涉及了一种使用固相萃取的纯化富集技术方法。
【背景技术】
[0002] 羟基多溴联苯醚（OH-PBDEs)是一类持久性有机污染物，来源主要包括两个方面， 一是海洋藻类的自然释放，一是PBDEs的生物转化。OH-PBDEs除与PBDEs具有类似的毒性作 用外，还具有影响雌二醇合成，干扰氧化磷酸化（0XPH0S)作用等毒理特征，如6-0H-BDE-47 在25nmol/L浓度下，斑马鱼胚胎出现畸形，在更高剂量下甚至会抑制发育出现死亡，而在 毫微摩尔浓度范围内能导致线粒体中0XPH0S的紊乱。OH-PBDEs也被证明能在有机体的血 液中积累。因此，监控食品中的羟基多溴联苯醚非常重要。目前羟基多溴联苯醚的主要检 测手段为色谱串联质谱方法，由于实际食品体系中羟基多溴联苯醚含量较低，一般在几十 到几百的ppm水平，因此，在进行色谱串联质谱检测之前，需要进行纯化、富集和浓缩等预 处理。
[0003] 固相萃取具有操作简单、溶剂消耗少、省时、省力和适用面广等优点，适合用于痕 量污染物的预处理过程中，而固相萃取柱填料的选择至关重要，其对羟基多溴联苯醚的吸 附效果是关系纯化、富集成败的关键；合适的淋洗液可以除去一些杂质，减少干扰；合适的 洗脱液则可以有效洗脱目标物，提高回收率。因此，本发明针对食品有机污染物羟基多溴联 苯醚，选择合适的固相萃取柱、淋洗液和洗脱液，达到有效纯化和富集的目的。
【发明内容】
[0004] 本发明目的在于提供一种简便、高效的食品中7种OH-PBDEs的纯化富集预处理技 术方法。本发明的技术方案如下：
[0005] (1)固相萃取小柱的活化：在固相萃取硅胶小柱中加入5mL二氯甲烧，真空抽滤淋 洗,弃去流出液；再加入5mL正己烷，真空抽滤淋洗，弃去流出液；
[0006] (2)上样：将511^含有011-?80￡8(3-羟基-2,2'，4,4'-四溴联苯醚（3-011-80￡-47)， 5-羟基-2, 2'，4,4' -四溴联苯醚（5-0H-BDE-47)，6-羟基-2, 2'，4,4' -四溴联苯醚 (6-011-80￡-47)，2'-羟基-2,3'，4,5'-四溴联苯醚（2，-011-80￡-68)，4-羟基-2,2'，3， 4 ' _ 四溴联苯醚（4-0H-BDE-42)，6-羟基-2, 2 '，3, 4, 4 ' -五溴联苯醚（6-0H-BDE-85)，6 ' -羟 基-2, 2'，4,4' 5-五溴联苯醚（6'-0H-BDE-99))的溶液缓慢加入到活化的固相萃取小柱中， 真空抽滤，控制流速约2mL/min,弃去流出液；
[0007] (3)淋洗：待含有OH-PBDEs的溶液全部通过固相萃取小柱后，加入5mL淋洗液，真 空抽滤淋洗，弃去流出液；
[0008] (4)洗脱：在固相萃取小柱中加入6mL洗脱液，真空抽滤，收集洗脱液至试管中；
[0009] (5)浓缩：洗脱液于40°C下用氮气缓慢吹至干，得到残留物；
[0010] (6)复溶：在残留物中加入lmL乙腈，轻轻摇动试管，至透明；
[0011] (7)过滤：透明液体用0. 22iim有机滤膜过滤，收集滤液，得到可用于液相串联质 谱检测用的样品。
[0012] 本发明的优点与有益效果是：采用本发明的纯化富集预处理技术，回收率高，能同 时预处理7种OH-PBDEs，可用于大规模样品检测，适于标准化。
【附图说明】
[0013] 图1HPLC-ESI-MS/MS检测7种OH-PBDEs混标溶液的色谱图。
【具体实施方式】
[0014] 下面结合实施例对本发明做进一步详细说明，但本发明并不仅仅局限于下述实施 例。
[0015] 实施例1
[0016] 采用HPLC-ESI-MS/MS同时检测 7 种 0H-PBDEs(3-0H-BDE-47,5-0H-BDE-47， 6-0H-BDE-47，2 ' -0H-BDE-68，4-0H-BDE-42，6-0H-BDE-85，6 ' -0H-BDE-99)，液相选用色谱 柱为Cls(150mmX2. 00mm，3iim);柱温：35°C;进样量：10yL;流动相：0? 1%甲酸和乙腈；梯 度洗脱程序见表1 ;流速：〇. 25mL/min。
[0017] 质谱采用电喷雾，电喷雾负离子扫描模式（ESI)，多重反应监测（MRM);离子喷雾 电压：4500V;离子源温度T:500°C;雾化气Gasl:25 ;雾化气Gas2 :20。
[0018] 7种OH-PBDEs的色图谱见附图1，定量标准曲线回归方程见表2。
[0019] 表1梯度洗脱条件
[0020]
[0021] 表2HPLC-ESI-MS/MS检测7种羟基多溴联苯醚的参数
[0022]
[0023] 实施例2
[0024] 准确量取7种标准溶液各100iiL于10mL棕色容量瓶中，用乙腈定容至10mL，配 制成100ng/mL的OH-PBDEs混合标准储备液。将硅胶SPE小柱（lg/6mL)用5mL二氯甲 烷和5mL正己烷活化，将用100ng/mL的OH-PBDEs混合标准储备液配置成的5mL10ng/ mL标准溶液缓慢加入到活化的固相萃取小柱中，待含有OH-PBDEs的溶液全部通过固相萃 取小柱后，加入5mL正己烷淋洗，真空抽滤淋洗液，弃去流出液；之后在小柱中加入6mL二氯 甲烷洗脱液，真空抽滤，收集洗脱液至试管中；于40°C下氮气缓慢吹干，再用lmL乙腈复溶 残留物，用〇. 22iim有机滤膜过滤乙腈溶液，进行HPLC-ESI-MS/MS检测，测定条件如实施 例1。验证回收率和标准偏差（R.S.D)，完成3个平行实验。分析结果见表3
[0025] 由表3可知，7种羟基多溴联苯醚的回收率在82. 83%~99. 83%之间，相对标准偏 差均低于10%，准确度与精密度良好。
[0026] 表37种羟基多溴联苯醚的准确度与精密度
[0027]
[0028] 以上较佳实施例仅用于说明本发明的内容，除此之外，本发明还有其他实施方式， 但凡本领域技术人员因本发明所涉及之技术启示，而采用等同替换或等效变形方式形成的 技术方案均落在本发明的保护范围内。
【主权项】
1. 一种食品有机污染物羟基多溴联苯醚的纯化富集预处理技术，其特征在于：包括如 下步骤： (1) 固相萃取小柱的活化：在固相萃取硅胶小柱中加入5mL二氯甲烷，真空抽滤淋洗， 弃去流出液；再加入5mL正己烷，真空抽滤淋洗，弃去流出液； (2) 上样：将5mL含有OH-PBDEs的溶液缓慢加入到活化的固相萃取小柱中，真空抽滤， 控制流速约2mL / min，弃去流出液； (3) 淋洗：待含有OH-PBDEs的溶液全部通过固相萃取小柱后，加入5mL淋洗液，真空抽 滤淋洗，弃去流出液； (4) 洗脱：在固相萃取小柱中加入洗脱液，真空抽滤，收集洗脱液至试管中； (5) 浓缩：洗脱液于40°C下用氮气缓慢吹至干，得到残留物； (6) 复溶：在残留物中加入ImL乙腈，轻轻摇动试管，至透明； (7) 过滤：透明液体用20. 22pm有机滤膜过滤，收集滤液，得到可用于液相串联质谱检 测用的杆品。2. 根据权利要求1所述的一种食品有机污染物羟基多溴联苯醚的纯化富集预 处理技术，其特征在于：涉及的羟基多溴联苯醚为：3_羟基-2, 2'，4,4' -四溴联苯醚 (3-OH-BDE-47)，5-羟基-2, 2'，4,4' -四溴联苯醚（5-OH-BDE-47)，6-羟基-2, 2'，4， 4 ' -四溴联苯醚（6-OH-BDE-47)，2 ' -羟基-2, 3 '，4, 5 ' -四溴联苯醚（2 ' -OH-BDE-68)， 4-羟基-2,2'，3,4'-四溴联苯醚（4-011-80￡-42)，6-羟基-2,2'，3,4,4'-五溴联苯醚 (6-OH-BDE-85)，6' -羟基-2, 2'，4,4' 5-五溴联苯醚（6, -OH-BDE-99)。3. 根据权利要求1所述的一种食品有机污染物羟基多溴联苯醚的纯化富集预处理技 术，其特征在于：所述步骤（1)-(4)中选用的固相萃取小柱为硅胶小柱。4. 根据权利要求1所述的一种食品有机污染物羟基多溴联苯醚的纯化富集预处理技 术，其特征在于：所述步骤（3)中选用的淋洗液为正己烷。5. 根据权利要求1所述的一种食品有机污染物羟基多溴联苯醚的纯化富集预处理技 术，其特征在于：所述步骤（4)中选用的洗脱液为二氯甲烷。6. 根据权利要求1所述的一种食品有机污染物羟基多溴联苯醚的纯化富集预处理技 术，其特征在于：所述步骤（4)中选用的洗脱液体积为6mL。7. 根据权利要求1所述的一种食品有机污染物羟基多溴联苯醚的纯化富集预处理技 术，其特征在于：7种羟基多溴联苯醚的回收率在82. 83%~99. 83%之间，相对标准偏差均 低于10%。
【专利摘要】本发明属于食品有机污染物羟基多溴联苯醚的纯化富集预处理技术领域，包括如下步骤：硅胶固相萃取小柱经二氯甲烷和正己烷活化后上样，先用正己烷溶液淋洗，再用二氯甲烷洗脱，洗脱液经氮气吹干，用乙腈复溶残留物，过滤后进行液相色谱串联质谱检测。采用本预处理技术，7种羟基多溴联苯醚(3-OH-BDE-47，5-OH-BDE-47，6-OH-BDE-47，2′-OH-BDE-68，4-OH-BDE-42，6-OH-BDE-85，6’-OH-BDE-99)的回收率在82.83％～99.83％之间，相对偏差均低于10％，准确度和精密度良好。
【IPC分类】G01N30/08, G01N30/88
【公开号】CN105021745
【申请号】CN201410155460
【发明人】丁洪流, 刘欣, 陈英, 纪丽君, 姚永青, 姚卫蓉
【申请人】苏州市产品质量监督检验所, 江南大学
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2014年4月17日