一种简便、快速测定葡萄花青素的方法

文档序号:9372996阅读:3253来源:国知局
一种简便、快速测定葡萄花青素的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于分析化学领域,具体涉及一种测定葡萄花青素的方法。
【背景技术】
[0002] 葡萄(Vitaceae Lindl)在我国栽培历史悠久,至今已有7000年历史。葡萄食用品 质包括外观品质和营养品质,外观品质包括葡萄颗粒的大小、葡萄果实颜色、葡萄果实的性 状。营养品质包括含糖量、可溶性固形物、可溶性蛋白、花青素等。花青素含量和成分决定了 葡萄果实的颜色,同时也决定了葡萄价格和销售量的因素(贺普超.葡萄学[M] 1999. 8-32 ; Zohary D et al. Beginnings of fruit growing in the old world. Science, 1975, 187 : 319-327.)。花青素是一种特殊结构的黄酮类物质,目前在国际上公认的天然抗氧化剂,由 于其特殊的保健功能,市场上主要的抗氧化保健品主要以花青素为主要成分。
[0003]目前花青素的测定方法有可见分光光度法、HPLC分析法、盐酸/香草醛法。对于 葡萄中的花青素的测定方法,传统的分光光度法是KMnO4分光光度计法,该方法基于花青素 结构中含有还原性基因,能够在强酸性介质中与KMn04发生氧化还原反应,在545nm吸光度 值减少而在310nm处吸光度值增加,通过A 311^A545的比值来测定花青素。

【发明内容】

[0004] 发明目的:本发明在现有技术的基础上进行了改进,虽然本发明还是利用分光光 度计测定花青素的含量,但是在材料处理上较原来的简单。尤其是对于同一种植物不同品 种之间的差异能够迅速测定出来。缩短了测定时间,简化测定的步骤。
[0005] 技术方案:本发明提供了一种测定葡萄花青素的方法,将葡萄的果皮及果肉放入 乙醇和浓盐酸的混合液中,葡萄的果皮及果肉总质量与混合液体积的比例为〇. 〇5g :10ml ;
[0006] 浸提后利用分光光度计测定溶液中花青素的相对含量。所述的提浸时间小于等于 30min〇
[0007] 花青素相对含量的计算公式为:花青素相对含量=(A53(]-A657/4)/M。式中A 53。为在 波长530nm的吸光度;A657为在波长657nm的吸光度;M为实验取材的质量。花青素在酸性 溶液里呈红色,其颜色的深浅与花青素的浓度成正比,花青素酸性溶液的吸收高峰波长是 530nm。花青素在657nm处无吸收峰,本发明采用上述公式能够消除基线误差。
[0008] 上述步骤中所述的乙醇与浓盐酸的体积比为1:99。乙醇浓度为80%;浓盐酸的浓 度为37%。本发明采用上述的溶液体系浸提时间短,而且花青素在这种体系下比较稳定,不 易降解。操作简便、节能、高效等优点。
[0009] 有益效果:1、现有技术中采用盐酸甲醇法在材料处理中需要研磨、离心、还有加 热。本发明所采用的简化的步骤中省去前面繁琐的操作,直接浸提半小时就能将葡萄中的 花青素相对含量测出来。对于葡萄群体品质的比较,此方法较省时。
[0010] 2、整个测定过程对环境没有污染、安全性高、使用的药品简单、易于购买、节约成 本。
[0011] 3、本发明对材料处理能够节约时间,简化测定花青素含量在省时上要比传统的测 定提尚40%。
【具体实施方式】:
[0012] 实施例1(夏黑葡萄)
[0013] 称取0.05g夏黑葡萄果皮与果肉,将所称取的葡萄放入IOml上述配的乙醇 (80% ):浓盐酸=99:1混合液中,浸提30分钟测定溶液里花青素的相对含量。
[0014] 花青素相对含量=(A53Q-A657/4) /M,A53。为 0· 454 ;A 657为 0· 192 ;M 为 0· 05g。
[0015] 根据上述公式,实施例测得花青素的相对含量为8. 12。
[0016] 实施例2 (巨峰葡萄)
[0017] 称取0.05g巨峰葡萄果皮与果肉,将所称取的葡萄放入IOml上述配的乙醇 (80% ):浓盐酸=99:1混合液中,浸提30分钟测定溶液里花青素的相对含量。
[0018] 花青素相对含量=(A53Q-A657/4)/M,A53。为 0. 651 ;A 657为 0. 256 ;M 为 0. 05g。
[0019] 根据上述公式,实施例测得花青素的相对含量为11. 74。
[0020] 实施例3 (巨玫瑰葡萄)
[0021] 称取0. 05g巨玫瑰葡萄果皮与果肉,将所称取的葡萄放入IOml上述配的乙醇 (80% ):浓盐酸=99:1混合液中,浸提30分钟测定溶液里花青素的相对含量。
[0022] 花青素相对含量=(A53Q-A657/4) /M,A53。为 0· 913 ;A 657为 0· 288 ;M 为 0· 05g。
[0023] 根据上述公式,实施例测得花青素的相对含量为16. 82。
[0024] 对比例1 (常规方法对夏黑葡萄的测定)
[0025] 称取夏黑葡萄0. 05g,将其放于50mL容量瓶中,加入6mL3. 0*103mol/L疆叫溶 液,继而加入一定量的样品溶液,用I. 2mol/LH2S04溶液稀释至刻度线,室温下放置30min 后测定;以水为空白,在310余545nm处分别测量其吸光度,在一定浓度范围内,A310/A545 值。总共耗时90分钟,测得花青素的相对含量为10. 13。
[0026] 对比例2 (常规方法对巨峰葡萄的测定)
[0027] 称取巨峰葡萄0· 05g,将其放于50mL容量瓶中,加入6mL3. 0*10-3mol/L疆11〇4溶 液,继而加入一定量的样品溶液,用I. 2mol/LH2S04溶液稀释至刻度线,室温下放置30min 后测定;以水为空白,在310余545nm处分别测量其吸光度,在一定浓度范围内,A310/A545 值。总共耗时90分钟,测得花青素的相对含量为10. 98。
[0028] 对比例3 (常规方法对巨玫瑰葡萄的测定)
[0029] 称取巨玫瑰葡萄0· 05g,将其放于50mL容量瓶中,加入6mL3. 0*10-3mol/L KMnO4 溶液,继而加入一定量的样品溶液,用I. 2mol/LH2S04溶液稀释至刻度线,室温下放置30min 后测定;以水为空白,在310余545nm处分别测量其吸光度,在一定浓度范围内,A310/A545 值,总共耗时90分钟,测得花青素的相对含量为11. 23。
[0030] 将上述实施例1~3及对比例1~3的测定结果及耗时,列表如下
[0031]

[0032] 从上述实验结果可以看出,1,本发明所采用的方法与传统方法相比,均可以有效 的测出葡萄中花青素的含量,但本发明耗时较少,与传统方法相比,提供了约40%。
[0033] 2,本发明对于葡萄不同品种之间的差异能够迅速测定出来,而传统的测定方法对 于葡萄的不同品种的辨识度没有这么高。
【主权项】
1. 一种测定葡萄花青素的方法,其特征在于将葡萄的果皮及果肉放入乙醇和浓盐酸的 混合液中,葡萄的果皮及果肉总质量与混合液体积的比例为0. 05g :10ml ; 浸提后利用分光光度计测定溶液中花青素的相对含量,花青素相对含量的计算公式 为:花青素相对含量=(A53(]-A657/4)/M。2. 如权利要求1所述的方法,其特征在于所述的乙醇与浓盐酸的体积比为1:99。3. 如权利要求1所述的方法,其特征在于所述的乙醇浓度为80% ;浓盐酸的浓度为 37%〇4. 如权利要求1所述的方法,其特征在于所述的提浸时间小于等于30min。5. 如权利要求1所述的方法,其特征在于所述的计算公式中,A53。为在波长530nm的吸 光度;A657为在波长657nm的吸光度;M为实验取材的质量。
【专利摘要】本发明公开了一种测定葡萄花青素的方法,将葡萄的果皮及果肉放入乙醇和浓盐酸的混合液中,葡萄的果皮及果肉总质量与混合液体积的比例为0.05g:10ml;浸提后利用分光光度计测定溶液中花青素的相对含量。所述的提浸时间小于等于30min。花青素相对含量的计算公式为:花青素相对含量=(A530-A657/4)/M。本发明对材料处理能够节约时间,简化测定花青素含量在省时上要比传统的测定提高40%。
【IPC分类】G01N21/31
【公开号】CN105092500
【申请号】CN201510608950
【发明人】冯英娜, 王媛花, 王全智, 许建民, 刘叶琼, 蔡善亚, 孙颖, 胡德龙
【申请人】江苏农林职业技术学院
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2015年9月22日
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