自动分析装置的制造方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及利用抗原（antigen)和抗体（antibody)的反应的免疫分析 (immunoassay)用的装置，特别设及使用磁性体粒子来作为免疫反应用的固相的分析装置。
【背景技术】
[0002] 为了鉴定如血清或者尿那样的生物体样品内的抗体或者抗原而使免疫复合体 形成的免疫反应被使用。通常，在使固相与液相反应的情况下，将经标识的抗体用作试 剂，在反应之后利用感测元件来测定液相是一般的。关于标识，已知产生放射性同位素 (radioisotope)、酶、着色后的粒子、巧光物质、发光（luminescence)的物质等。
[0003]在现有技术的电化学发光流通池中，为了W高概率使发光试剂与极微量的测定对 象物结合，对测定对象物的量添加过量的发光试剂，因此，在溶液中存在很多不与测定对象 物结合的发光试剂（自由成分)，存在由于由来于自由成分的噪声信号而使SN比下降运样的 问题。
[0004]作为W往例，在专利文献1中公开了W下那样的技术。即，存在如下的记载：在 流通池的壁面的外部配置磁石，通过抗原抗体结合将测定对象物(激素、肿瘤标志物、药物、 酶、细胞因子、核酸等）保持于磁性珠，通过磁石将磁性珠保持于作用电极的面，通过水流 的力对未保持于作用电极的面的成分即成为噪声的原因的成分进行冲洗，从而提高测定精 度。保持于作用电极的面的成分(结合成分（Bind;B))和未保持于作用电极的面的成分（自 由成分（化ee;F))的分离被称为B/F分离。
[0005] 现有技术文献 专利文献 专利文献1 :日本特表平4-502207号公报。
【发明内容】
[0006] 发明要解决的课题 然而，在专利文献1所记载的结构中，不能除去由来于使不与测定对象物直接结合的 标识物激发的引诱剂（TPA等，在后文中叙述）与作用电极进行电化学反应的无用发光。特 别是在作用电极表面的磁性体粒子的密度相对小的区域中，由使标识物激发的引诱剂（TPA 等）所产生的无用发光出现的比例相对于来自作为目的的发光标识的发光的比例是大的， 而成为SN比局部诵对）低的区域。因此，难W得到高的SN比。
[0007]本发明的目的在于，通过减少运样的作用电极表面的磁性体粒子的密度相对小的 区域来减少SN比局部讨目对）低的区域，从而得到高的SN比。
[0008] 用于解决课题的方案 用于解决上述课题的本发明的特征如下。
[0009]本发明的分析装置的特征在于，具有：包含磁性体粒子的流体流过的流室；具有 流室的流通池；设置于流室内的作用电极和对置电极；在包含磁性体粒子的流体被导入到 流室内时在流室内施加用于捕捉磁性体粒子的磁场的磁石；w及检测来自留在流室内的磁 性体粒子上的标识物的发光的光感测元件，作用电极的在流室内露出的区域的面积比磁石 的顶上部的面积小。
[0010] 发明效果 根据本发明，在利用磁性体粒子的免疫分析用的方法和装置中，通过减少来自作用电 极表面的磁性体粒子的密度相对小的区域的测光量，从而能够减少SN比局部讨目对)低的区 域，得到高的SN比。上述W外的课题、结构W及效果根据W下实施方式的说明变得显而易 见。
【附图说明】
[0011] 图1是示出本发明的一个实施例的免疫分析装置的整体的概略结构的图。
[0012] 图2是示出图1所示的装置中的流通池单元的结构的纵截面图。
[0013] 图3是图2的流通池单元的线部分放大图。
[0014] 图4是图3的IV-IV线截面图。
[0015] 图5是比较例中的流通池的从与图3相同的方向的截面图。
[0016] 图6是实施例2中的流通池的从与图3相同的方向的截面图。
【具体实施方式】
[0017] 在样品为血清的情况下，作为分析对象的成分(分析对象物）为抗原、肤类激素、酱 类激素、药剂、病毒抗体、各种肿瘤标志物、抗体、抗体复合物、单一蛋白质等。
[0018] 作为固相的磁性体粒子的粒径为0. 5~10ym，比重为1. 2~1. 5。该粒子在液体内难 W沉淀且容易悬浮。抗体固定于粒子的表面。磁性粒子是例如将铁、氧化铁、儀、钻、氧化铭 等磁吸引物质的粉末埋置到基体(matrix)内而形成，该基体本身由包括很多合成和天然的 聚合性物质（例如纤维素、聚醋、聚苯乙締、二氧化娃、葡聚糖、白蛋白等）的广范围的物质构 成。
[0019] 通过免疫反应而包含分析对象物(抗原）和发光标识物的免疫复合体被结合于磁 性体粒子上。该免疫复合体与反应混合物中的其他的共存物质一起W悬浮液的形式被导入 到流通池（flow-t虹OU曲cell)的流室（flowchamber)。
[0020] 磁性体粒子在流室内平面地扩展的状态下，被磁力捕捉到规定的位置。在测定发 光时磁力被解除，但是，此时流室内的液体的流动停止，因此，磁性体粒子保持被捕捉的状 态而留在流室内。
[0021] 流室形成为宽度相对于深度（即厚度)为2~20倍，使得随着流体的流动而导入的粒 子容易在流（flow)的横方向上扩展。磁性体粒子的扩展方式理想地为单一层是优选的，但 是，实际上多少会产生粒子彼此的重叠。在本发明中，即使在存在运种重叠的情况下也称为 平面的扩展。关于流室内的平面的扩展，除了磁力的强度W外，还被包含反应混合物的悬浮 液的导入时的流速所影响。在流速的力大于通过磁力来捕捉粒子的力的情况下，粒子脱离， 因此，需要选择适当的流速。
[0022] 用于对流室施加磁场的磁石的磁通密度（magneticfluxdensity)优选为 0.5~3T。流通池在流室与光检测元件之间具有光透射性的窗。窗是用从玻璃、石英、丙締酸、 聚碳酸醋等光内部透射率90%W上的塑料之中选择的任一个材料来做成的。光感测元件是 从光电子倍增管、雪崩光电二极管、光电二极管、条纹管中选择的任一个元件。上述窗也可 W为凸透镜的形状。
[0023] 在流通池中，反应生成物从悬浮液的液相的分离使用磁阱（magnetictrap)单元 在置于导管中的规定的位置的流通池内的流室中进行。上述悬浮液通过由沿着导管来吸引 或者排出运些悬浮液的单元构成的送液单元而被引向流通池内的流室，当到达由配置在作 用电极下或者上的磁石产生的局部磁场的区域时，通过其磁力被捕捉到作用电极上。
[0024] 将该悬浮液导入到流通池内的流室并使反应生成物捕捉到作用电极上的工序中 所要求的条件如下。即，为了使标识物的发光的灵敏度（SN比)更高，使作用电极表面的磁性 体粒子的密度相对小的区域减少。在作用电极表面的磁性体粒子的密度相对小的区域中， 由激发标识物的引诱剂（attractant) (TPA等）产生的无用发光发生的比例相对于来自作 为目的的发光标识的发光的比例而言是大的，为SN比局部诵对）低的区域。因此，难W得 到高的SN比，因此，不优选。
[0025] 流室形状从上方观察为纺键形，是如下那样的构造：该纺键形的最大宽度部的宽 度相对于入口直径(最小宽度部）为10倍W内，从入口观察向最大宽度部的开口角为30° W内，其厚度为0.2~1.0mm。在不适当的形状的情况下，在室侧面附近容易发生流的剥离、 气泡的滞留，引起妨碍悬浮液中的反应生成物向作用电极上的捕捉，并且在对一度捕捉到 的反应生成物进行洗涂时洗涂液不会绕入至流室侧面部，因此，发光反应之后的反应生成 物的洗涂变得困难。
[0026] 此外，关于形成流室的构件的材质，为了难W附着由样品中的蛋白成分等产生的 污垢和极力防止由洗涂液等引起的劣化，从聚四氣乙締等氣树脂、下基橡胶、娃橡胶、玻璃 W及丙締酸树脂等电绝缘性物质中选择。
[0027] 在磁性体粒子的粒径为0. 75~3ym的情况下，在流室内导入包含反应生成物的悬 浮液时，将其线速度设为10~lOOmm/s，由此，能够使流动的状态最佳化，能够在作用电极上 W更分散的形式捕捉更多的反应生成物。在此，在线速度lOmm/sW下时悬浮液中的反应生 成物集中于作用电极上的一点而被捕捉，因此，在进行电化学性发光时难W确保高的发光 效率。此外，在线速度lOOmm/sW上时，反应生成物难W被捕捉到作用电极上，大部分流走， 因此，发光量低。
[0028] 由在上述悬浮液通过流通池内的流室时被捕捉到作用电极上的反应生成物构成 的固相能够通过导管使洗涂用液体流到流室内由此进行洗涂。固相保持被捕捉到作用电极 上的状态而残留，但是，其反应生成物露出于流动的洗涂液体，由此，进行洗涂。
[0029] 关于洗涂液体，如果考虑后续工序的发光反应，则包含激发标识物的引诱剂的缓 冲液是优选的。其目的在于，从固相去除悬浮液液相的残留痕迹W及将引诱标识物的激发 的物质再现性良好地供给到反应生成物的周围。
[0030] 通过在作用电极被置于流室上表面时被置于作用电极上、或者在其相反的情况下 被置于作用电极下的磁石而产生的局部的磁阱来捕捉磁性体粒子。作用电极无论配置在流 室上表面或者下表面中的哪一个都可W，但是当考虑捕捉效率和配置的容易度时，配置于 下表面是优选的，并且配置于纺键形的最大宽度部附近是优选的。
[003。 在此，优选为"作用电极的在流室内露出的区域的面积"比"磁石的顶上部的面积" 小，更优选为"磁石的顶上部的面积"的2/3W下，更优选为"磁石的顶上部的面积"的1/3倍W下，运提高装置的SN比，因此，是优选的。理由如下。目P，磁性体粒子的个数密度根据 磁石的磁通密度巧日流速等）来决定。通常，磁石的磁通密度具有空间分布，因此，磁性体粒 子