一种测定嘧菌酯和/或戊唑醇含量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种气相色谱检测方法，具体涉及一种测定嘧菌酯和/或戊唑醇含量 的方法。
【背景技术】
[0002] 嘧菌酯是甲氧基丙烯酸酯（Strobilurin)类杀菌农药，高效、广谱，对几乎所有的 真菌界（子囊菌亚门、担子菌亚门、鞭毛菌亚门和半知菌亚门）病害如白粉病、锈病、颖枯 病、网斑病、霜霉病、稻瘟病等均有良好的活性。可用于茎叶喷雾、种子处理，也可进行土壤 处理，主要用于谷物、水稻、花生、葡萄、马铃薯、果树、蔬菜、咖啡、草坪等。该产品主要信息 如下：
[0003] 通用名称：嘧菌酯
[0004] ISO 通用名称：azoxystrobin
[0005] 化学名称：(E)-[2-[6-(2-氰基苯氧基）嘧啶-4-基氧]苯基]-3-甲氧基丙烯酸 甲酯
[0008]实验式：C22H17N3O3 [0009] 相对分子质量：403. 4
[0010] 熔点：114 ~116Γ
[0011] 蒸气压（25°C ) :1. 1X10 10Pa
[0012] 溶解度（g/L，20°C):水6X103;易溶于乙酸乙酯、乙腈、二氯甲烷；溶于甲醇、甲 苯、丙酮；微溶于乙烷、正辛醇
[0013] 稳定性：水溶液中光解半衰期为2周，对水解稳定。
[0014] 戍唑醇（Tebuconazole)是一种轻乙基三唑衍生物，属于麦角留醇合成抑制剂， 能迅速被植物有生长力的部分吸收并主要向顶部转移，不仅具有杀菌活性，还可促进作物 生长。用于防治白粉菌属、丙锈菌属、核控菌属和壳针属引起的病害如小麦白粉病、三黑穗 病、玉米丝黑穗病、高梁丝黑穗病、大豆锈病、油菜菌核病、梨叶斑病、茶饼病、苹果斑点落叶 病、苹果轮纹病、葡萄灰霉病等效果较好。但它也存在使用成本较高，连续单一使用容易导 至病原菌产生抗性等问题。戊唑醇信息如下：
[0015] 通用名称：戊唑醇
[0016] ISO 通用名称：tebuconazole
[0017] 化学名称：I- (4-氯苯基）-3- (1H-1，2, 4-三唑-1-基甲基）-4, 4-二甲基戊-3-醇
[0018] 结构式：
[0020] 实验式：C16H22ClN3O
[0021] 相对分子质量：307. 8
[0022] 生物活性：杀菌
[0023] 熔点：102. 4°C
[0024] 蒸气压（25°C ) :1. 33X 10 5Pa
[0025] 溶解度（g/L，20°C):二氯甲烷>200,甲苯50~100,己烷<0. 1，异丙醇、水0. 032
[0026] 稳定性：在pH值4~9, 22°C条件下水解DT5。大于1年。
[0027] 嘧菌酯?戊唑醇悬浮剂是由嘧菌酯和戊唑醇混配而成，该复配杀菌剂对苹果斑点 落叶病菌有较好的增效作用，同时对环境影响小。
[0028] 如何简便、高效检测农药中二者的含量，尤其是两种药物复配时同时检测二者含 量，从而判断农药质量和药效，是目前需要解决的问题。
【发明内容】
[0029] 本发明公开了一种利用气相色谱法测定嘧菌酯和/或戊唑醇含量的方法，该方法 操作简单，能够同时测定嘧菌酯和戊唑醇的含量。
[0030] 本发明解决技术问题采用的技术方案为：
[0031] 一种测定嘧菌酯和/或戊唑醇含量的方法，包括以下步骤：
[0032] (1)、标样溶液的配制：在标准样品中加入内标溶液和三氯甲烷，混匀；其中内标 溶液为邻苯二甲酸二苯酯的三氯甲烷溶液；
[0033] (2)、试样溶液的配制：在试样中加入冰乙酸并置于超声波浴，然后水浴加热至液 体蒸干，加入内标溶液和三氯甲烷，振摇后置超声波浴，然后加入水振摇提取，取下层有机 相进行离心，取上清液作为试样溶液；
[0034] (3)按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序通过气相色谱仪进行测定。
[0035] 优选的，其中气相色谱仪具有氢火焰离子化检测器，毛细管色谱柱为 IOmXO. 53mm(id)，DB-1 石英毛细管柱。
[0036] 优选的，其中气相色谱的操作条件为：
[0037] 柱温：185°C保持I. 8min，以25°C /min升温速度升至238°C，并于238°C保持 I. 5min ；
[0038] 气化室温度：275°C ;
[0039] 检测器温度：275 °C ;
[0040] 气体流速（mL/min):载气（N2) 55,尾吹气25,氢气45,空气500 ;
[0041] 进样量：1 μ L。
[0042] 优选的，所述方法包括以下步骤：
[0043] (1)、标样溶液的配制：称取0. 015g嘧菌酯标样和/或0. 025g戊唑醇标样，置于 3〇mL具塞玻璃瓶中，用移液管准确加入IOmL内标溶液，加5mL三氯甲烷，混匀；
[0044] (2)、试样溶液的配制：称取0.1 g试样，置于50mL具塞锥形瓶中，加入3mL冰乙酸 溶液，置超声波浴lmin，置70°C水浴加热，待瓶内液体蒸发至近干后取出恢复至室温。用与 步骤（1)中使用的同一支移液管准确加入IOmL内标溶液，加5mL三氯甲烷，振摇后置超声 波浴3min，将瓶内溶液转移至梨形分液漏斗，加 IOmL水后紧塞猛烈振摇，静置2min，取下层 有机相溶液IOmL进行离心处理，取上清液进样；
[0045] (3)待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针嘧菌酯和/或戊唑醇与 内标物峰面积比值相对变化小于1. 2%后，按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺 序进彳丁测定。
[0046] 优选的，进行测定后还包括以下计算步骤：
[0047] 将测得的两针试样溶液和试样前后两针标样溶液中嘧菌酯和/或戊唑醇与内标 物峰面积之比，分别进行平均。试样中嘧菌酯和/或戊唑醇的质量分数O 1 (%)按式（1) 计算：
[0049] 式中：
[0050] Γι--标样溶液中，嘧菌酯和/或戊唑醇与内标物峰面积比的平均值；
[0051] r2--试样溶液中，嘧菌酯和/或戊唑醇与内标物峰面积比的平均值；
[0052] Hi1--嘧菌酯和/或戊唑醇标样的质量，单位为克（g);
[0053] m2--试样的质量，单位为克（g);
[0054] ω--标样中嘧菌酯和/或戊唑醇的质量分数，以％表示。
[0055] 优选的，测定样品为40%嘧菌酯?戊唑醇悬浮剂。
[0056] 优选的，所述40%嘧菌酯?戊唑醇悬浮剂由嘧菌酯原药、戊唑醇原药与助剂和填 料加工制成。
[0057] -种40%嘧菌酯?戊唑醇悬浮剂的质量控制方法，使用上述方法测定是否达到以 下指标要求，以确定农药质量是否合格：
[0059] 〇
[0060] 本发明方法操作简单，能够同时测定嘧菌酯和戊唑醇质量分数，并可作为40 %嘧 菌酯?戊唑醇悬浮剂的质量控制方法。
【附图说明】
[0061] 图1为40 %嘧菌酯?戊唑醇悬浮剂试样溶液气相色谱图。
【具体实施方式】
[0062] 以下具体描述通过上述方法测定40%嘧菌酯?戊唑醇悬浮剂中二者的质量分数， 其质量控制要求如下：
[0063] 1 要求
[0064] I. 1组成和外观
[0065] 样品应由符合标准的嘧菌酯原药、戊唑醇原药与适宜的助剂和填料加工制成。外 观为可流动、易测量体积的悬浮液体；经存放外观发生变化后，用手摇动应恢复原状，不应 有结块。
[0066] 1. 2技术指标
[0067] 40 %嘧菌酯?戊唑醇悬浮剂应符合表1要求。
[0068] 表1 40 %嘧菌酯?戊唑醇悬浮剂控制项目指标
[0070] 2试验方法
[0071] 2.1 -般规定
[0072] 本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682-2008 中规定的三级水。检验结果的判定按GB/T 8170-2008的4.3. 3 "修约值比较法"进行。
[0073] 2. 2 抽样
[0074] 按照GB/T 1605-2001中"液体制剂采样"方法进行。用随机数表法确定抽样的包 装件，最终抽样量应不少于200mL。
[0075] 2. 3鉴别试验
[0076] 气相色谱法一本鉴别试验可与嘧菌酯和/或戊唑醇质量分数测定同时进行。在相 同的色谱操作条件下，试样溶液被测目标色谱峰的保留时间对比标样溶液的嘧菌酯和/或 戊唑醇色谱峰的保留时间，其相对差值应在I. 5%以内。
[0077] 2. 4气相色谱法测定嘧菌酯和/或戊唑醇的质量分数
[0078] 2. 4. 1方法提要
[0079] 试样中的嘧菌酯和/或戊唑醇用三氯甲烷溶解，以邻苯二甲酸二苯酯为内标物， 使用DB-I键合型大口径石英毛细管柱和FID检测器，对试样中嘧菌酯和/或戊唑醇进行气 相色谱分离，内标法定量。
[0080] 2. 4. 2试剂和溶液
[0081] 三氯甲烷；
[0082] 嘧菌酯标样：已知准确质量分数，ω彡98% ;
[0083] 戊唑醇标样：已知准确质量分数，ω彡98% ;
[0084] 内标物：邻苯二甲酸二苯酯（应不含有干扰分析的杂质）；
[0085] 内标溶液：P (邻苯二甲酸二苯酯）=I. 4g/L.。称取I. 4g邻苯二甲酸二苯酯，用 三氯甲烷溶解并稀释至lOOOmL，摇匀；
[0086] 冰乙酸溶液：（冰乙酸+水）体积分数=30 %。3体积冰乙酸与7体积的蒸馏水 混匀。
[0087] 2. 4. 3 仪器
[0088] 气相色谱仪：具氢火焰离子化检测器；
[0089] 毛细管色谱柱：10mX0. 53mm(id)，DB-I石英毛细管柱。
[0090] 色谱工作站；
[0091] 单标玻璃移液管：IOmL ;
[0092] 恒温水浴：控制温度（70 ±0. 2) °C ;
[0093] 过滤器：滤膜孔径约0· 45 μ m ;
[0094] 梨形分液漏斗：250mL ;
[0095] 离心机：4000r/min。
[0096] 超声波清洗器。
[0097] 2. 4. 4气相色谱操作条件
[0098] 柱温：185 °C (保持 I. 8min) - 238 °C (升温速度 25 °C /min)，238 °C (保持 I. 5min)；
[0099] 气化室温度：275 °C ;
[0100] 检测器温度：275 °C ;
[0101] 气体流速（mL/min):载气（N2) 55,尾吹气25,氢气45,空气500 ;
[0102]进样量：lyL;
[0103] 保留时间（min):戊唑醇约1. 6,内标物（邻苯二甲酸二苯酯）约2. 4,嘧菌酯约 4. 4〇
[0104] 上述操作参数是典型的。可根据不同仪器特点，对给定的操作参数作适当调整，以 期获得最佳效果。典型的试样溶液气相色谱图见图1，图中数字标号分别代表一戊唑醇； 2 -内标物（邻苯二甲酸二苯酯）；3-嘧菌酯。
[0105] 2. 4. 5测定步骤
[0106] 2. 4. 5. 1标样溶液的配制
[0107] 称取0. 015g(精确至0. 00002g)嘧菌酯标样和0. 025g(精确至0. 00002g)戊唑醇 标样，置于30mL具塞玻璃瓶中，用移液管准确加入IOmL内标溶液，加5mL三氯甲烷，混匀。
[0108] 2. 4. 5. 2试样溶液的配制
[0109] 称取0. lg(精确至0.0002g)试样，置于50mL具塞锥形瓶中，加入3mL冰乙酸溶 液，置超声波浴Imin，置70°C水浴加热（瓶口端连接抽气装置），待瓶内液体蒸发至近干后 取出恢复至室温。用与4. 4. 5. 1同一支移液管准确加入IO