一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂的制作方法
【技术领域】
[0001]涉及痰液粘液蛋白的赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键的酶切，尤其是加速其断裂而达到快速液化。
【背景技术】
[0002]细菌培养所用痰液的快速液化为公认的难题。目前所用方法是1%胰酶液消化法，该法不足之处:一是消化时间长，要60-90分钟，个别痰液需再延长时间；二是对痰液有稀释，影响结果的真实性；三是制剂保质期短，只有2周。
【发明内容】
[0003]痰液快速液化剂，1.只需5-20分钟液化痰液，对少部分高浓稠、高粘滞痰液也能在35分钟内使之液化；2.不稀释标本，结果真实；3.保质期长，可有效使用18个月。
[0004]实施办法
痰液快速液化剂由占总量2/3的胰蛋白酶和占总量1/3的糜蛋白酶组成。
[0005]作用原理
胰蛋白酶断裂粘液蛋白的赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键，糜蛋白酶与胰蛋白作用类似，作用较强。
[0006]制作所需器材一次性使用的男用取样管。
[0007]灭菌挖耳勺，独立包装，高压灭菌器125 °C灭菌。
[0008]高压灭菌器，有化学指示剂和生物指示剂。
[0009]冰箱、无菌箱、细菌鉴定系统、封口设备等。
[0010]所需原料
胰蛋白酶:活力单位1:250。检菌，明确可能检出的菌种，含菌量以半定量III区无菌落出现为准，变形杆菌不得检出。
[0011]糜蛋白酶:活力单位1000单位/毫克，应为无菌制剂，如果有菌则应明确菌种，并含菌量以半定量III区无菌落出现为准，变形杆菌不得检出。
[0012]干;剂袋，2克/袋，无囷。
[0013]制作方法
将约10毫克的胰蛋白酶和约5毫克糜蛋白酶在无菌操作的条件下装入男用取样管中，用带有拭子的管塞塞紧管口，不去掉拭子，同干燥剂袋一同放入无菌袋中，封口，2-8°C保存。
[0014]使用方法
将痰液快速液化剂倾倒于待检的痰液标本中，用所带的拭子搅动约30秒，使之充分混匀，放37°C温箱，5-20分钟观察，已液化者分区划线接种，做痰液半定量培养，难液化者延长液化时间至35分钟左右。
【主权项】
1.一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂，其特征在于，是由下述重量百分比的原料组成:(1).糜蛋白酶约30% ；(2).胰蛋白酶约70%。2.—种如权利要求1所述的一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂，其特征在于，其制作步骤如下: (1).将所需器具试管架、挖耳勺进行125°C高压灭菌，备用； (2).将约10毫克的糜蛋白酶和约5毫克的糜蛋白酶装入男用无菌取样管中，塞上管塞，连同干燥剂袋一同封入无菌袋中，放2°C — 8°C保存。3.—种如权利要求1所述的一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂，其特征在于，其使用方法如下:将痰液快速液化剂倾倒于待检痰液中，用所带拭子搅动约30秒，使充分混匀，放37°C温箱中，10 - 20分钟后观察，少数高粘稠痰液需放35分钟左右，观察液化，已液化者进行分区划线，做半定量培养。4.一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂的制作方法，其特征在于:所述的步骤(1)中，试管架、挖耳勺要经过独立包装，然后进行125°C高压灭菌，冷却后放2°C— 8°C保存。5.一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂的制作方法，其特征在于:所述的步骤(2)中，所使用的男用无菌取样管是带有无菌拭子的具塞无菌管，从原料加入至封口过程是在无菌厨中进行的；所选用的胰蛋白酶和糜蛋白酶以无菌制剂为好，如果有菌，则要鉴定，并且含菌量以半定量III区不得有菌生长。6.一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂的制作方法，其特征在于:所述的步骤(2)中，所选用的胰蛋白酶和糜蛋白酶为粉剂，要求糜蛋白酶活力不少于1000单位/mg，胰蛋白酶活力为1:250或更高。
【专利摘要】一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂，涉及痰液粘液蛋白的赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键的酶切，尤其是加速其断裂而达到快速液化。解决细菌培养用痰液快速液化这一公认难题。用于痰液的快速液化，有利于痰液细菌半定量分离培养鉴定。对痰液不稀释，对细菌不杀灭，制剂保质期长。
【IPC分类】G01N1/28
【公开号】CN105277402
【申请号】CN201410333004
【发明人】不公告发明人
【申请人】汪振宏
【公开日】2016年1月27日
【申请日】2014年7月14日