一种分离测定比拉斯汀及其制剂中工艺杂质的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于分析化学领域，具体涉及一种采用高效液相色谱法分离和测定比拉斯 汀及其制剂中存在的6种工艺杂质A-F (包括一种降解产物）的方法。
【背景技术】
[0002] 比拉斯汀（Bilastine)是西班牙FAES制药公司开发的第2代组胺H1受体拮抗 剂，2010年欧盟批准其用于治疗变应性鼻炎及慢性特发性荨麻疹。本品安全性好，无常用 抗组胺药物存在的镇静作用及心脏毒性。比拉斯汀化学名2-[4-(2-(4-(1-(2_乙氧基乙 基）苯并咪唑-2-基）哌啶-1-基）乙基）苯基]-2-甲基丙酸，分子式为C 2SH37N303。比拉 斯汀结构式为：
通常来说，一种药物杂质总含量应小于0.3 %，单个杂质含量要小于0.1 % ;但是在实 验室制备比拉斯汀制备过程中存在5个工艺杂质及1个降解产物，杂质的化学名称及结构 式如下：
对于制备比拉斯汀过程中产生的杂质或引入的有关物质，不论是在原料药还是制剂中 均需要进行严格控制。申请号为201310267146. 8的发明专利公开了一种用液相色谱法分 离测定比拉斯汀原料及其制剂的方法，分离和测定的有关物质主要有四个中间体和两个杂 质(结构式参见申请号为201310267146. 8发明专利的【背景技术】部分)，其中公开的杂质1与 上述的杂质F结构是相同，其余均不同；并且在这个专利中，利用高效液相色谱法完全分离 四个中间体和两个杂质需要70分钟，耗时过长。目前还没有一种可快速同时分离上述表格 中记载的6种杂质的方法。
【发明内容】
[0003] 有鉴于此，本发明的目的在于提供一种分离测定比拉斯汀及其制剂中工艺杂质的 方法，该方法可同时实现6种工艺杂质A-F的分离和检测，且显著缩短了分离时间。
[0004] 为实现上述目的，本发明的技术方案为： 一种分离测定比拉斯汀及其制剂中工艺杂质的方法，所述的方法是采用高效液相色谱 法，所述高效液相色谱法分析过程中采用的色谱柱是以辛烷基硅烷键合硅胶为填料，采用 流动相A和流动相B进行梯度洗脱，然后进入检测器进行检测；所述的流动相A为添加有离 子对试剂的无机盐缓冲体系,所述的流动相B为有机溶剂。
[0005] 本发明所述的方法，所述的色谱柱填料为辛烷基硅烷键合硅胶，在本发明的一个
【具体实施方式】中，选择的是Agilent Eclipse XDB-C8。
[0006] 本发明所述的方法，所述无机盐缓冲体系为磷酸盐缓冲体系，所述的磷酸盐为磷 酸二氢钾、磷酸二氢钠和磷酸二氢铵中的一种或多种，优选为磷酸二氢钾。
[0007] 进一步，所述无机盐缓冲体系的pH值为3-5,优选pH值为4. 5。
[0008] 本发明所述的方法，所述离子对试剂为酸性离子对试剂，酸性离子对试剂可选 自1-戊烷磺酸钠（CAS: 22767-49-3)、1-己烷磺酸钠（CAS: 2832-45-3)、1-庚烷磺酸钠 (CAS: 22767-50-6)、1-辛烷磺酸钠（CAS: 5324-84-5)和 1-癸烷磺酸钠（CAS: 13419-61-9) 中的一种或多种，在本发明的一个【具体实施方式】中，选用的酸性离子对试剂为辛烷基磺酸 钠。
[0009] 本发明所述的方法，所述有机溶剂为低级醇，优选为甲醇和/或乙醇。
[0010] 本发明所述的方法，所述无机盐缓冲体系中无机盐的浓度为0. 01 mol/L-0. 05 mol/L，优选为0. 04mol/L，所述离子对试剂的浓度为无机盐缓冲体系中无机盐的浓度的 1/10,优选离子对试剂的浓度为4mmol/L。
[0011] 本发明所述的方法，在进行高效液相色谱法分析之前，采用甲醇或甲醇的水溶液 溶解样品，所述的甲醇的水溶液甲醇和水的体积比为90:10。
[0012] 本发明所述的方法，所述检测器的检测波长为212-273nm。
[0013] 本发明所述的方法，所述流动相流速为0. 5-1. 5ml/min，所述色谱柱柱温箱温度为 25-35。。。
[0014] 本发明所述的方法，具体可按照以下方法实现： (1) 取比拉斯汀适量，用90%甲醇水溶液（甲醇V :水V=90:10)溶解样品，配制成每1ml 含比拉斯汀I. 2-2. Omg的样品溶液； (2) 选用型号为岛津LC-2010AHT的色谱仪，色谱柱型号为Agilent Eclipse-XDB-C8 (150 X 4. 6 mm，5Mm)，流动相A的配制：称取5. 4436g磷酸二氢钾（0. 04mol/L磷酸二氢钾)、 0. 86512g辛烷基磺酸钠（4mmol/L辛烷基磺酸钠）于1000 ml容量瓶中，加水溶解并稀释至 刻度，用磷酸调节pH值至4. 5±0. 1 ;流动相B为甲醇；取步骤（1)的样品溶液1〇μ1注入液 相色谱仪中，设置流动相流速为I. 〇ml/min，检测波长为273nm，色谱柱柱温箱温度为30°C， 按下表1所示的数据进行线性梯度洗脱，完成比拉斯汀有关物质的分离及测定。
[0015] 表1进行线性梯度洗脱流动相A和流动相B的体积
本发明的有益效果在于：本发明的一种分离测定比拉斯汀及其制剂中工艺杂质的方 法，采用高效液相色谱法对比拉斯汀及6种工艺杂质A-F进行分离和检测，可在30分钟内 将比拉斯汀及6种工艺杂质A-F完全分离并进行检测，显著缩短了分离时间。本发明解决 了比拉斯汀及其制剂的6种工艺杂质的分离测定问题，从而确保了比拉斯汀及其制剂的质 量可控，并最终确定产品的安全有效。
[0016]
【附图说明】 图1为空白溶剂的高效液相色谱图； 图2为比拉斯汀及杂质A-F的混合溶液高效液相色谱图； 图3为比拉斯汀片辅料空白的高效液相色谱图； 图4为比拉斯汀片的高效液相色谱图； 图5为比拉斯汀氧化降解的高效液相色谱图； 图6为比拉斯汀及杂质A-F定量限测定的高效液相色谱图； 图7为比拉斯汀及杂质A-F检测限测定的高效液相色谱图。
[0017]
【具体实施方式】 所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说明，但并不是本发明的内容仅限于所 举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述
【发明内容】
对实施方案进行非本质的改进和 调整，仍属于本发明的保护范围。
[0018] 以下实施例中，采用的仪器及色谱条件如下： 高效液相色谱仪：岛津LC-2010AHT 色谱柱：Agilent Eclipse_XDB_C8 (150 X 4. 6 mm, 5Mm) 流动相： 流动相A :无机盐缓冲体系缓冲盐：称取5. 4436g磷酸二氢钾（0. 04mol/L磷酸二氢 钾)、0. 86512g辛烷基磺酸钠（4mmol/L辛烷基磺酸钠)于1000 ml容量瓶中，加水溶解并稀释 至刻度，用磷酸调节PH值至4. 5 ±0. 1 ; 流动相B :甲醇。
[0019] 流动相A和流动相B按下表进行线性梯度洗脱：
检测器检测波长：273nm 流动相流速：1. 〇ml/min 色谱柱柱温箱柱温：30°C 进样量：1