一种抗性马唐快速检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及杂草抗性检测技术领域，特别涉及一种抗性马唐快速检测方法。
【背景技术】
[0002] 马唐（Digitaria sanguinalis)是我国华北地区玉米田主要杂草之一，分布广泛， 环境适应能力强，生长迅速，也是世界上公认的18种恶性杂草之一。在我国，马唐主要危害 小麦、大麦、玉米、水稻、高粱等作物，同时也是蔬菜田常见的主要杂草。马唐整个生育期与 作物重合度高，会与相应作物形成对光、养分、空间等方面的竞争，从而影响作物的正常生 长，从而导致作物产量损失。我国每年由杂草危害而导致的秋熟旱作粮田产量损失中有一 半以上是由马唐造成的。
[0003] 乙酰乳酸合酶（acetolactate synthase，简称ALS)是诱导植物和微生物体内三 种支链氨基酸（撷氨酸、亮氨酸和异亮氨酸）生物合成的关键酶。乙酰乳酸合酶抑制剂类 除草剂可以防除一年生和多年生禾本科杂草、部分阔叶杂草，是目前应用非常广泛的一类 除草剂。烟嘧磺隆、硝磺草酮和莠去津等是目前防治玉米田马唐的主要除草剂，该三种除草 剂均属于乙酰乳酸合酶抑制剂除草剂，可为杂草茎叶和根部吸收，随后在植物体内传导，造 成敏感植物生长停滞、茎叶褪绿、逐渐枯死，从而达到田间除草的目的。一般情况下田间施 药后，禾本科杂草会在20-25天左右死亡。
[0004] 随着单一药剂的广泛、持续使用，我国杂草抗性呈现出越来越严重的态势。但是我 国抗药性杂草的研究起步较晚，传统的室内生物测定法传统一直是检测抗药性杂草的主要 方法。但是该方法需要从田间收集种子，进行室内培养在一定叶龄期喷施除草剂，在在相应 时期后调查株防效和地上部分生物量来计算抗性指数。这种方法虽然能够客观反映杂草抗 性，但是也有其局限性。首先，该方法时效性较差，不能检测当季杂草。而且该方法耗时长、 工作量大，且所检测材料为室内培养杂草植株与田间杂草植株具有一定差异，不能完全准 确的反应抗性水平。因此找到一种直接以田间杂草为材料，快速当季的检测技术对于反应 杂草抗性水平并指导当季杂草治理至关重要。
【发明内容】
[0005] 为了解决以上现有技术中马唐抗性检测中存在的耗时长、工作量大的问题，本发 明提供了一种操作简单、效果显现快速的抗性马唐快速检测方法。
[0006] 本发明要解决的技术问题是为杂草马唐对烟嘧磺隆、硝磺草酮和莠去津等除草剂 的抗性检测提供快速方法，因此该方法的主要特征是操作简单、效果显现快速，能够以马 唐植株为材料，通过室内检测来对其抗性进行直观反映。
[0007] 本发明是通过以下步骤得到的：
[0008] -种抗性马唐快速检测方法，包括以下步骤：
[0009] 将2-4叶期的马唐植株放入容器内，向容器内加入除草剂液体，至没入马唐根茎 结合部位，室温放置7天，观察叶片是否萎蔫枯黄，是否有新根发出。
[0010] 本发明中的抗性观测方法为肉眼观察记录，具体鉴定标准为叶片大面积萎蔫、枯 黄为烟嘧磺隆敏感植株；叶片未发生大面积萎蔫、枯黄，和/或长出新根的为抗性植株。本 发明同时对所检测植株的抗性进行了整株检测。
[0011] 所述的抗性马唐快速检测方法，检测用浓度为30-240 μ g/mL的烟嘧磺隆液体， 如 30 μ g/mL、60 μ g/mL、120 μ g/mL 和 240 μ g/mL ;62· 5-500 μ g/mL 的硝磺草酮液体， 如 62. 5 μ g/mL、125 μ g/mL、250 μ g/mL 和 500 μ g/mL ;625_5000 μ g/mL 的莠去津液体，如 625 μ g/mL、1250 μ g/mL、2500 μ g/mL和5000 μ g/mL，为乙酰乳酸合成酶类抑制剂。
[0012] 所述的抗性马唐快速检测方法，本方法具体推荐使用浓度为烟嘧磺隆120 μ g/mL、 硝磺草酮250 μ g/mL和莠去津2500 μ g/mL。
[0013] 本发明中的检测温度为室温，具体温度范围为15-35Γ。检测对光照时间没有具体 要求，具体日光照时间再6-16个小时最佳，室内正常放置即可。
[0014] 所述的抗性马唐快速检测方法，每个容器内放置2-4棵马唐植株。
[0015] 所述的抗性马唐快速检测方法，2-4叶期的马唐植株为温室种植的马唐植株，或当 季度田间的马唐植株。
[0016] 所述的抗性马唐快速检测方法，容器为试管、塑料瓶或玻璃瓶等，根据容器大小设 置检测液体体积和待检测植株数目，例如试管内能够放置2-4棵马唐植株。
[0017] 本发明的有益效果：
[0018] 本发明不仅能以上一年度采集的种子为材料进行培养检测，也可直接以田间马唐 为材料进行检测，具有操作简单、省时、具有前瞻性等优点。可以作为早期抗性监测的方法， 能快速准确测定玉米田马唐对烟嘧磺隆、硝磺草酮和莠去津的抗性水平，从而指导生产实 践中抗性马唐的合理治理。本发明的快速检测方法所显示的数据与传统的整株测定法较为 吻合，准确性高，具有广泛推广应用价值。
【附图说明】
[0019] 图1是杂草马唐抗性快速检测流程图，A :温室种植或室外采集2-4叶期马唐植株； B :待检测马唐植株放于含有除草剂的试管内培养；C :7天后观察所检测植株的状况；
[0020] 图2是马唐抗性快速检测结果，A :敏感性植株除草剂处理7天后；B :抗性植株除 草剂处理7天后；
[0021] 图3是整株法进行的马唐抗性检测图。
【具体实施方式】
[0022] 以下通过实施例对本发明作进一步的详细说明。
[0023] 实施例1:待检测植株的准备和除草剂最佳检测浓度的筛选
[0024] 1. 1马唐植株的采集
[0025] 本发明中所用为马唐2-4叶期植株。主要可以通过两种方式获得，一：以上一年度 采集的马唐种子为材料，室内盆栽种植。具体为：将马唐种子均匀的撒播于事先放有土的 塑料盆（直径9厘米）内，并覆盖约1厘米的细土，25°C黑夜8小时、30°C光照16小时条件 下，室内培养至2-4叶期。二：田间直接采集2-4叶期马唐植株。以上植株采集过程中，为 避免对根部的破