试样分析用设备及外泌体的捕捉方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及用于分析各种细胞所分泌的外泌体的试样分析用设备及外泌体的捕捉方法。
【背景技术】
[0002]通过将与疾病相关联的特定的抗原(或抗体)作为生物标记进行检测分析，从而对疾病的发现、治疗的效果等进行定量分析的方法已被广泛应用。近年来，被称为外泌体(exosome)的微小膜囊泡作为新的生物标记而受到期待。
[0003]外泌体在血液、淋巴液、唾液、尿液、母乳、精液等中含有。外泌体在液体中呈大致球形，以直径lOOnm左右为中心分布。外泌体被脂双层膜覆盖，脂双层膜上有各种物质例如膜蛋白质。此外，外泌体有时也被称为微泡、细胞外小泡，有多种称呼。
[0004]现有技术文献
[0005]专利文献1国际公开第2009/092386号
[0006]专利文献2国际公开第2006/016617号
[0007]专利文献1中记载了使用免疫学测定法(免疫测定法)来检测分析外泌体。使用专利文献1记载的免疫学测定法时，通过识别以外泌体的脂双层膜上存在的膜蛋白质作为抗原的抗体，从而能够检测外泌体。但是，由于膜蛋白质的数量在外泌体的个体上并不固定，所以不能够精度良好地检测外泌体的数量。
[0008]因此，需要能够高精度地检测外泌体的试样分析用设备及外泌体的捕捉方法。如果能够高精度地检测出外泌体，就可能高精度地定量测定外泌体。
【发明内容】
[0009]本发明为了应对这种需求，以提供能够高精度地检测外泌体的试样分析用设备及外泌体的捕捉方法为目的。
[0010]根据本发明的第1方式，为了解决上述以往的技术问题，提供试样分析用设备，其特征在于，具备:基部；以及凹部，所述凹部形成于所述基部上，并通过使与检测对象的外泌体中存在的抗原结合的抗体固定，使所述外泌体与所述抗体结合，从而使所述外泌体固定。
[0011]根据本发明的第2方式，为了解决上述以往的技术问题，提供外泌体的捕捉方法，其特征在于，包括外泌体固定工序，该外泌体固定工序为如下的工序:在具有固定有与检测对象的外泌体中存在的抗原结合的抗体的凹部的注入部内，注入含有所述外泌体的试样液，使所述外泌体中存在的抗原与固定在所述凹部的抗体结合，使所述外泌体固定于所述凹部。
[0012]根据本发明的试样分析用设备及外泌体的捕捉方法，能够高精度地检测外泌体。【附图说明】
[0013]图1是表示试样分析用设备的第1实施方式的立体图。
[0014]图2是表示图1中沿A — A线剖切的局部放大立体图。
[0015]图3是表示试样分析用设备的第1?第3实施方式中凹凸结构的尺寸形状的放大剖面图。
[0016]图4是表示试样分析用设备的第2实施方式的立体图。
[0017]图5是表示沿图4中A — A线剖切的局部放大立体图。
[0018]图6是外泌体的模式化剖面图。
[0019]图7是表示用于修饰外泌体的纳米粒子的剖面图。
[0020]图8是表示外泌体的捕捉方法的一个实施方式的流程图。
[0021]图9是表示用于说明在外泌体的捕捉方法的一个实施方式中执行的工序的局部放大剖面图。
[0022]图10是模式化表示通过在外泌体的捕捉方法的一个实施方式中执行的工序而在凹凸结构上产生的状态的局部放大剖面图。
[0023]图11是表示试样分析用设备的第3实施方式的俯视图。
[0024]图12是表示试样分析用设备的第3实施方式中凹凸结构的局部放大剖面图。
[0025]图13是表示试样分析用设备的第3实施方式的局部剖面图。
【具体实施方式】
[0026]以下，对于各实施方式的试样分析用设备以及外泌体的捕捉方法，参照附图进行说明。
[0027]第1实施方式的试样分析用设备
[0028]使用图1?图3，对第1实施方式的试样分析用设备的结构进行说明。在图1中，第1实施方式的试样分析用设备101例如由合成树脂形成矩形。试样分析用设备101的外形形状并不限于矩形，可以为任意形状。
[0029]也可以使用玻璃、金属、半导体基板等形成试样分析用设备101。
[0030]在试样分析用设备101中形成有多个为圆筒状凹部的孔10。在图1中，形成有8个孔10，但也可以形成更多的孔10，孔10的个数是任意的。孔10为下述注入各种液体的注入部。
[0031]在与试样分析用设备101的厚度方向垂直的方向切割孔10时的剖面形状为正圆形。也可以使孔10的剖面形状为椭圆形或矩形。但优选孔10的剖面形状为正圆形。
[0032]图2为放大表示图1的A — A剖面的图。如图2所示，在孔10的底面上形成有使凹部20a和与凹部20a邻接的凸部20b周期性地多个排列的凹凸结构20。在试样分析用设备101中，由合成树脂等形成的试样分析用设备101自身成为形成凹凸结构20的基部。
[0033]凹部20a及凸部20b大致呈直线状。凹部20a及凸部20b的各自的侧面倾斜。也可以形成使凹部20a及凸部20b各自的侧面与试样分析用设备101的面大致垂直的凹凸结构20。
[0034]如图3的放大剖面图所示，将凹部20a的深度(凸部20b的高度)设为H，将凹部20a及凸部20b各自的宽度设为用单点划线表示的从底面开始在H/2位置处的Wa、Wb。凹部20a的宽度Wa和凸部20b的宽度Wb优选满足Wa > ffb的关系。
[0035]如上述构成的试样分析用设备101，使用合成树脂形成的情况下，通过整体成形而能够容易地制作。
[0036]第2实施方式的试样分析用设备
[0037]使用图4、图5，对第2实施方式的试样分析用设备的结构进行说明。在图4、图5中，在与图1?图3实质上相同的部分标注同一符号，适当省略其说明。
[0038]在图4中，第2实施方式的试样分析用设备102，具有例如由合成树脂形成的基板112和由合成树脂形成并重叠在基板112上的薄片122。薄片例如为硅聚合物薄片。以下，称为硅聚合物薄片122。试样分析用设备102也可以形成矩形形状，外形形状为任意形状。
[0039]在基板112上重叠的薄片的材料并不限定于硅聚合物。薄片的材料也可以为比硅聚合物廉价的材料，例如聚苯乙稀、ABS、聚碳酸酯等树脂。
[0040]与试样分析用设备101相同，在试样分析用设备102中形成有多个圆筒状凹部即孔10。
[0041]图5是放大表不图4的A — A剖面的图。如图5所不，在基板112的整个表面上形成有使凹部20a和凸部20b多个排列的凹凸结构20。在试样分析用设备102中，由合成树脂等形成的基板112成为形成凹凸结构20的基部。
[0042]在第1实施方式的试样分析用设备101中，仅在孔10的底面形成有凹凸结构20，而与此相对，在第2实施方式的试样分析用设备102中，在基板112的整个表面上形成有凹凸结构20。
[0043]在试样分析用设备102中，在硅聚合物薄片122上形成有圆筒状的贯通孔11。通过将基板112和具有贯通孔11的硅聚合物薄片122相重叠，形成孔10。在使基板112和硅聚合物薄片122相重叠的状态下，试样分析用设备102实质上与在孔10的底面形成凹凸结构20的试样分析用设备101为相同的结构。
[0044]由于硅聚合物薄片122紧贴在基板112上，所以不需要将基板112和硅聚合物薄片122粘接。如果不使基板112和硅聚合物薄片122粘接，则在下述的外泌体的检测工序中，能够根据需要将硅聚合物薄片122剥离。当然，也可以将基板112和硅聚合物薄片122粘接。
[0045]也可以通过由硅橡胶等形成的密封件使基板112和硅聚合物薄片122粘合。例如密封件可以为配置于与贯通孔11相同的位置的形成有与贯通孔11大致相同直径的贯通孔的由硅橡胶形成的平板。
[0046]